王思伟
- 作品数：14 被引量：7H指数：2
- 供职机构：河北农业大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家肉羊产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域：农业科学轻工技术与工程生物学更多>>
- 山羊线粒体cytB基因片段特异性PCR反应条件优化被引量：1
- 2014年
- 研究建立了一个特异性扩增山羊线粒体cytB基因的PCR方法。根据线粒体cytB基因序列设计引物,对山羊肉进行扩增。结果显示,山羊可扩增出578 bp条带。PCR方法的反应条件优化试验表明,引物浓度和退火温度对反应结果影响不大。推荐的引物浓度为0.15μmol/L,退火温度为60℃,循环次数为30次。
- 王思伟刘静静李芸张英杰刘月琴李雪梅杨佳栋李兰会
- 关键词：山羊肉CYTB基因
- 不同饲喂水平对陶赛特羊×小尾寒羊杂交母羊妊娠前期生长性能的影响
- 2014年
- 选取24只健康且体重相近的母羊(43 kg)进行同期发情处理并人工辅助配种,随机分成3组:自由采食组、80%限饲组和60%限饲组,每组8只,每只为一个重复。试验从净增重、平均日增重、耗料量、日采食量和耗料增重比几个方面进行统计。试验结果显示,妊娠前期,自由采食组净增重最高且耗料增重比最低,饲料利用效率较高;60%限饲组净增重最低,且耗料增重比最高,饲料利用率低,且不利于胎儿的发育。
- 李芸董世伟王思伟刘月琴张英杰
- 关键词：饲喂水平妊娠早期
- 一次性鉴别绵羊、山羊、水貂、海狸鼠和鸭肉的方法
- 针对市场上用水貂肉、海狸鼠肉和鸭肉冒充羊肉的现象，本发明利用动物种属间特异性较强的线粒体DNA序列设计5种动物(绵羊、山羊、水貂、海狸鼠和鸭)种属特异性引物，通过PCR反应得到长度各不相同的特异性扩增片段，对扩增产物电泳...
- 张英杰王思伟刘月琴
- 文献传递
- 绵羊miR-200b启动子鉴定及其对卵泡颗粒细胞线粒体功能的影响
- 2023年
- 旨在鉴定绵羊miR-200b的启动子区并研究其对卵泡颗粒细胞线粒体功能的影响。本研究体外分离培养绵羊卵泡颗粒细胞,通过构建包含3个不同长度启动子区重组质粒,利用生物信息软件和双荧光素酶报告试验预测并鉴定绵羊miR-200b核心启动子区;利用在线工具预测转录因子NR4A1的结合位点;通过双荧光素酶报告试验和qRT-PCR检测过表达NR 4A1基因对miR-200b启动子活性和表达水平的影响;通过转染miR-200b mimic和mimic NC,分别检测颗粒细胞线粒体形态和数量、线粒体膜电位、ROS水平、ATP和线粒体呼吸链复合物Ⅰ的浓度,并检测线粒体氧化磷酸化相关基因表达水平。结果表明,miR-200b-P1(-159/+36 nt)活性最高,确定该区域为miR-200b核心启动子区;预测出核心启动子存在1个NR4A1的结合位点,且过表达NR 4A1基因显著上调miR-200b启动子活性和miR-200b的表达水平(P<0.01)。与mimic NC组相比,转染miR-200b mimic导致颗粒细胞平均光密度显著降低(P<0.01),细胞长度显著缩短(P<0.01)、线粒体膜电位下降(P<0.05)、ATP(P<0.05)和线粒体呼吸链体复合物Ⅰ(P<0.01)的浓度降低、ROS水平升高(P<0.01),同时下调ATP 6V1G1和NDUFV 1的表达(P<0.01),上调NOX 4的表达水平(P<0.01)。该研究确定了绵羊miR-200b的核心启动子区(-159/+36 nt),NR4A1正向调控miR-200b的转录,且miR-200b能够影响线粒体氧化磷酸化过程,诱导颗粒细胞线粒体损伤。该研究结果为进一步揭示miR-200b调控绵羊卵泡发育的机制提供了理论依据。
- 宋鹏琰王思伟王思伟张寅梁陈晓勇陈晓勇
- 关键词：绵羊启动子卵泡颗粒细胞线粒体
- 利用动物肌肉组织进行物种鉴定方法的研究进展
- <正>如今'食品安全'已成为人们最关注的问题之一,不法商贩为牟取暴利,利用化学物品和低廉材料对市场上的高价值产品进行伪造和掺假,不仅使群众损失财产,更严重威胁着人们的健康。由于制假产品在外观、气味等宏观方面不易辨别,为此...
- 王思伟张英杰
- 关键词：物种鉴定PCR技术
- 文献传递
- 利用多重PCR和荧光定量PCR对羊肉进行物种鉴定方法的建立
- 引言/目的对肉类进行物种鉴别是保证食品安全、维护公共健康的重要手段。羊肉广受消费者的喜爱,却经常被不法分子用其他价格较低的肉类进行掺杂掺假。近年来,掺假肉的来源主要是鸭肉和水貂、海狸鼠等毛皮动物。因此,本研究旨在利用多重...
- 王思伟张英杰刘月琴
- 文献传递
- 山羊线粒体cytB基因片段特异性PCR反应条件优化
- 研究建立了一个特异性扩增山羊线粒体cytB基因的PCR方法。根据线粒体cytB基因序列设计引物,对山羊肉进行扩增。结果显示,山羊可扩增出578 bp条带。PCR方法的反应条件优化试验表明,引物浓度和退火温度对反应结果影响...
- 王思伟刘静静李芸张英杰刘月琴李雪梅杨佳栋李兰会
- 关键词：山羊肉CYTB基因
- 文献传递
- 绵羊早孕因子重组蛋白在大肠杆菌中的高效表达被引量：2
- 2014年
- 构建含有绵羊早孕因子基因的原核表达重组质粒pGEX4t-EPF,并转入大肠杆菌BL21(DE)中进行高效表达,为获得大量绵羊早孕因子蛋白肽提供可靠依据。方法:通过SDS-PAGE分析导剂浓度和诱导时间因素对重组蛋白表达的影响。结果:菌株在37℃时,当菌种OD值达到0.6~0.8后,加入终浓度为0.5mmol/mL的IPTG,诱导4 h,收获的蛋白产量可达最高。结论:摸索出重组菌pGEX4t-EPF-BL(21)的最佳表达条件,为下一步大量制备绵羊早孕因子蛋白肽奠定基础。
- 刘静静王思伟董世伟刘月琴张英杰
- 关键词：绵羊大肠杆菌
- 利用动物肌肉组织进行物种鉴定方法的研究进展被引量：4
- 2014年
- 如今"食品安全"已成为人们最关注的问题之一,不法商贩为牟取暴利,利用化学物品和低廉材料对市场上的高价值产品进行伪造和掺假,不仅使群众损失财产,更严重威胁着人们的健康。由于制假产品在外观、气味等宏观方面不易辨别,为此,执法机关在打击制假犯罪的时候,需要一种科学准确的方法对市面上的样品进行鉴定,为打假掺杂提供确凿的证据。因此,对未知的动物组织进行物种鉴定,一直是研究人员们致力解决的问题。
- 王思伟张英杰
- 关键词：物种鉴定动物组织化学物品DNA实时荧光定量
- 利用线粒体CytB基因特异性鉴别海狸鼠肉的方法研究
- 2015年
- 为了建立可以快速对海狸鼠肉进行鉴别的特异性PCR方法,试验采用线粒体Cyt B基因序列设计引物,对海狸鼠肉进行特异性扩增,并对此PCR方法进行条件优化。结果表明:海狸鼠可扩增出305 bp的条带,且对其他常见物种无反应;引物浓度、退火温度和Mg2+浓度对反应结果影响不大;当模板稀释100倍时仍有清晰条带;对肉品进行高温高压处理以及掺杂处理均不影响扩增结果。说明此方法可以应用于海狸鼠的物种鉴别。
- 王思伟张英杰刘月琴
- 关键词：CYTB基因PCR方法物种鉴别线粒体
