章晶晶
- 作品数：7 被引量：14H指数：2
- 供职机构：河北省食品检验研究院更多>>
- 发文基金：河北省高等学校科学技术研究青年基金国家科技支撑计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程理学化学工程更多>>
- 酸乳中葡糖醋杆菌赖解旋酶恒温基因扩增检测方法的建立
- 2017年
- 建立酸乳中葡糖醋杆菌的赖解旋酶恒温基因扩增(helicase-dependent isothermal DNA amplification,HDA)检测方法。根据葡糖醋杆菌16S基因序列(基因号为HQ677466.1)设计特异性引物,并优化反应体系中UvrD解旋酶和T4 gp32的浓度。通过HDA法直接检测酸乳中的葡糖醋杆菌,并确定其检出限,在建立的HDA体系中对酸乳中多种菌株进行扩增和电泳检测,验证方法的特异性。结果表明:用HDA法检测酸乳中葡糖醋杆菌,得到了与设计序列长度(101 bp)一致的基因片段,检出限为102 CFU/g,反应体系中UvrD解旋酶和T4 gp32的适宜添加量分别为0.1μg和5.0μg。该方法用于检测酸乳中葡糖醋杆菌的灵敏度高、耗时短。
- 唐心怡刘波张涛李永艳张翠侠王赞章晶晶周巍
- 关键词：酸乳
- 狐狸和貉子动物源性成分双重PCR鉴别被引量：5
- 2017年
- 根据狐狸和貉子线粒体基因中保守序列设计特异性引物,建立一种基于双重聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)的肉及肉制品狐狸和貉子源性成分鉴定方法,同时通过双重PCR体系可一次反应同时扩增出狐狸和貉子条带,凝胶电泳条带整齐,背景清晰。结果表明:建立的狐狸和貉子动物源性PCR测定方法具有良好的特异性和灵敏度,其中狐狸引物单体系最低检测量为10 pg,貉子引物单体系最低检测量为1 pg,双重PCR体系由于引物的竞争作用使狐狸和貉子两种引物的检测灵敏度均降低至单体系的1/10。
- 杜利强章晶晶张涛齐艳玲李顺才李岩周巍张岩
- 关键词：狐狸貉子双重PCR
- 酸乳中葡糖杆菌的LAMP检测方法研究被引量：2
- 2016年
- 为了给酸乳生产企业提供一种快捷、简便、灵敏的葡糖杆菌的LAMP检测方法,本研究选取葡糖杆菌属的模式菌株氧化葡糖杆菌为代表菌株。根据Gen Bank中公布的氧化葡糖杆菌的16S r RNA(X73820)基因的强特异性序列设计四条引物,优化引物、Mg2+、温度等反应条件,建立了环介导等温扩增技术检测酸乳中葡糖杆菌的方法。对该方法的特异性和灵敏度进行评价,并与PCR方法的灵敏度进行比较。结果显示,该组引物的特异性强,对反应产物进行酶切分析,酶切产物的片段与理论值相符;该LAMP方法检测纯菌的灵敏度为7.5×101 CFU/m L,是PCR检测方法的10倍;用纯菌液对酸奶进行人工污染,提取模拟变质酸奶的DNA进行LAMP扩增,其最低检出限为7.5×102 CFU/m L。综上所述,本研究建立的LAMP检测方法特异性强、灵敏度高,耗时短,实现了对葡糖杆菌的快速检测,在食品检测行业具有很好的应用前景。
- 李月华张翠侠王爽章晶晶杨岚周巍张岩
- 关键词：葡糖杆菌属环介导等温扩增酸乳
- 应用依赖解旋酶DNA扩增技术检测转基因大豆被引量：1
- 2016年
- 目的:基于依赖解旋酶DNA恒温扩增(helicase-dependent isothermal DNA amplifi cation,HDA)技术,建立快速检测转基因大豆的方法。方法:采用以CaMV35S、NOS、CP4-EPSPS 3种外源基因和内源基因Lectin(大豆凝集素基因)为目的片段设计4对特异引物,建立反应体系,通过HDA方法对内源基因和3种外源基因的检测特异性和灵敏度进行实验,并对结果进行同源性分析。结果:建立了转基因大豆HDA检测法,检测特异性良好,3种外源基因的检出限为0.2%。结论:转基因大豆的HDA检测方法具有普通聚合酶链式反应的特异、灵敏等特点,并且对仪器要求更低,极适合基层实验室使用,具有广阔的应用前景。
- 章晶晶王赞张翠侠马超峰周巍张岩
- 关键词：转基因大豆
- 实时荧光PCR法快速鉴别狐狸貉子肉源性成分研究被引量：6
- 2017年
- 根据狐狸线粒体基因组中的保守序列和貉子线粒体D-loop基因保守序列设计狐狸、貉子特异性引物和Taq Man探针,建立一种基于实时荧光聚合酶链式反应的肉及肉制品狐狸、貉子源性成分测定方法,通过特异性、灵敏性、线性检测对该方法体系进行检验和评价。本研究建立的狐狸、貉子源性成分实时荧光聚合酶链式测定方法体系具有良好的特异性及灵敏性,最低可检测0.5 pg/μL纯狐狸DNA和5 pg/μL纯貉子DNA。本研究建立的狐狸貉子源性成分荧光PCR检测方法,可以用来检测实际样品中是否含有狐狸貉子源性。
- 章晶晶杜利强李永艳李顺才齐艳玲李永波张岩周巍
- 环介导等温扩增技术检测醋化醋杆菌
- 2016年
- 为实现醋酸菌的快速灵敏检测,以醋化醋杆菌为代表菌株,首次使用环介导等温扩增技术(LAMP)进行16S-23S ITS r RNA核酸扩增,通过特异性检测后对反应条件进行优化,并对扩增产物的检测方法进行比较。结果表明,该组引物特异性强,优化的25μL体系为:6 mmol/L Mg Cl2,1.4 mmol/L d NTPs,内引物(FIP和BIP)各0.8μmol/L,外引物(F3和B3)各0.2μmol/L,1×Bst DNA聚合酶反应缓冲液,8U Bst DNA聚合酶,0.8 mmol/L甜菜碱,2μL DNA模板,用灭菌蒸馏水补足体系。62℃反应30 min即可完成扩增反应,产物经琼脂糖凝胶电泳后检测灵敏度达3.63×101CFU/m L。用肉眼观察白色焦磷酸镁沉淀,仅观察到3.63×102 CFU/m L以上的阳性产物,而在终产物中加入10 000×0.1μL SYBR GreenⅠ后,可通过肉眼观察产物颜色变化,得到与琼脂糖凝胶电泳法相同的检出限,并且缩短了检测时间。
- 周巍付晓华章晶晶杨岚王红张岩张志胜
- 关键词：醋酸菌LAMP灵敏度
- 液态烷烃氧载体对褐黄孢链霉菌合成纳他霉素的影响
- 2015年
- 利用单因素摇瓶发酵的实验方法,以多种液态烷烃作为氧载体,分别研究了其不同添加浓度、添加时间对褐黄孢链霉菌生长及对纳他霉素生物合成的影响。实验结果表明,正己烷、正十二烷和正十六烷都不能作为碳源被细胞利用,是有效的氧载体。正十二烷作为氧载体效果较好:接种同时添加6%的正十二烷培养,细胞干重和纳他霉素含量分别比对照组提高了22.9%和46.4%;而最佳添加时间为发酵后24 h,纳他霉素含量比接种同时添加提高了7.0%。添加6%的正十六烷,纳他霉素含量比对照组提高了43.3%。添加高于3%浓度的正己烷,菌体干重和那他霉素产量均低于对照组,推测可能是正己烷对细胞产生毒性而抑制了菌体生长和纳他霉素的合成。
- 王爽张岩王赞李永波章晶晶马超峰周巍
- 关键词：褐黄孢链霉菌纳他霉素氧载体
