刘燕青
- 作品数：4 被引量：0H指数：0
- 供职机构：贵州医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 缺氧相关NR2F1-AS1通过调控NR2F1/AKT通路在胰腺癌的作用和机制研究
- 目的:胰腺癌(Pancreatic cancer,PC)是高度恶性的实体肿瘤,起病隐匿,早期诊断困难,患者预后差,五年生存率不足9%。早期胰腺癌以手术切除为主,对放疗、化疗不敏感,缺乏有效的辅助治疗措施。近年来靶点治疗研...
- 刘燕青
- 关键词：胰腺癌长链非编码RNA缺氧诱导因子-1Α
- 文献传递
- HDAC2基因RNA干扰载体的构建
- 2015年
- 目的:构建组蛋白去乙酰化酶2(HDAC2)基因RNA慢病毒干扰质粒载体。方法:对比HDAC2基因序列,设计并合成短发夹RNA(shRNA)干扰靶点序列,克隆入经Age I与EcoRI双酶切后的RNA干扰载体p LKO.1-puro,构建p LKO.1-HDAC2-shRNA重组质粒,采用酶切法和测序法验证重组质粒。结果:成功退火合成3对短发夹RNA序列并将其克隆入p LKO.1-puro载体中,构建重组质粒p LKO.1-HDAC2-shRNA1、p LKO.1-HDAC2-shRNA2及p LKO.1-HDAC2-shRNA3,经酶切鉴定和测序验证重组质粒载体与预期靶序列相同。结论:成功构建HDAC2-shRNA慢病毒干扰载体,为进一步研究HDAC2的功能及应用提供有效工具。
- 刘燕青黄健黄韻祝娄方方孔维莹
- 关键词：RNA干扰慢病毒载体质粒
- 慢病毒载体介导的RNA干扰对HDAC2基因表达的影响
- 2015年
- 目的:构建组蛋白去乙酰化酶2(HDAC2)基因的慢病毒表达载体,研究HDAC2基因在肝癌Hep G2细胞中的表达。方法:将前期构建并鉴定正确的3条重组表达质粒p LKO.1-HDAC2-shRNA 1组、2组、3组及1条阴性对照p LKO.1-HDAC2-shRNAneg和空载体对照p LKO.1,运用脂质体法分别与包装质粒ps PAX2和包膜质粒p MD2.G共同转染人胚肾细胞293T,制备具有感染能力慢病毒颗粒;收集、纯化含病毒颗粒的上清液并感染人肝癌Hep G2细胞,设未处理Hep G2细胞为空白对照,采用Real time PCR和Western blotting检测感染48 h和72 h后Hep G2细胞中HDAC2基因mRNA和蛋白表达水平,鉴定、分析重组质粒的干扰效果。结果:与空白对照组相比,3条干扰序列转染肝癌Hep G2细胞后均能明显抑制HDAC2 mRNA的表达(P<0.05),其中以p LKO.1-HDAC2-shRNA 1组的抑制率更明显,达到82.09%;3条干扰序列均能明显抑制HDAC2蛋白的表达(P<0.05),以p LKO.1-HDAC2-shRNA 1组和3组的干扰效果最明显,但两者相比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:构建的重组质粒p LKO.1-HDAC2-shRNA能从转录水平和蛋白水平有效抑制HDAC2基因在Hep G2细胞中表达。
- 刘燕青黄健黄韻祝娄方方孔维莹
- 关键词：RNA干扰慢病毒载体
- RNAi沉默HDAC2基因对1,25(OH)2D3调控肝癌HepG2细胞p21表达影响的研究
- 目的：构建组蛋白去乙酰化酶2（HDAC2）基因的短发夹RNA（short hairpin RNA,shRNA），并对其在肝癌细胞株HepG2中的干扰效率进行鉴定。探讨1,25(OH)2D3对HDAC2的抑制作用和抑癌基因...
- 刘燕青
- 关键词：组蛋白去乙酰化酶肝癌
- 文献传递
