王申五
- 作品数：190 被引量：678H指数：12
- 供职机构：北京大学人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金“九五”国家科技攻关计划国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学轻工技术与工程更多>>
- 多聚酶链反应技术及其在临床血液学上的应用
- 1990年
- 多聚酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)是一种在体外由引物(primers)介导的特定DNA序列的酶扩增,又称基因扩增.这种技术能在数小时内合成一百多万个特定DNA序列考贝,既敏感,又快速、方便.因此,虽然PCR于1985年底首见报道,但其应用日趋广泛.本文就PCR原理、基本过程及其在临床血液学上的应用作一综述.PCR原理PCR扩增的DNA片段的特异性基于两个寡核苷酸引物,这两个引物位于待扩增的DNA片段的两侧,并与相应的DNA链互补.该过程包括:DNA热变性使之成为单链状,然后退火,使引物连接于与引物互补的特定DNA链上。
- 金坤林王申五陆道培
- 关键词：血液学聚合酶链反应
- 转染bcl-2基因抑制足叶乙甙诱导的K562细胞凋亡
- 1998年
- 目的：观察ｂｃｌ２对Ｋ５６２细胞凋亡的影响。方法：用真核表达质粒ｐ２９０ｂｃｌ２转染Ｋ５６２细胞，用ＲＴＰＣＲ和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测ｂｃｌ２ｍＲＮＡ和蛋白表达；用ＭＴＴ实验检测Ｋ５６２细胞对化疗药物足叶乙甙的敏感性变化；用ＤＮＡ“ｌａｄｄｅｒ”检测ｂｃｌ２对凋亡的影响。结果：转染ｂｃｌ２后Ｋ５６２的ｂｃｌ２蛋白表达增高，细胞存活率明显提高，在足叶乙甙低于１２５μｍｏｌ／Ｌ时检测不到凋亡梯形ＤＮＡ；而Ｋ５６２细胞在足叶乙甙为３２μｍｏｌ／Ｌ时就能检测到凋亡梯形ＤＮＡ。结论：若把ｂｃｌ２导入正常造血干细胞，从而增强干细胞对化疗药物的耐受性，这将对化疗具有重要意义。
- 陈德喜王申五曹国栋
- 关键词：转染BCL-2基因细胞凋亡依托泊甙
- 结直肠癌中p53基因缺失的研究被引量：1
- 1998年
- 目的了解中国人结直肠癌p53基因缺失的情况。方法应用Southern印迹杂交技术检测24例结直肠癌p53基因缺失。结果发现24例结直肠癌中10例(41.7%)存在p53基因缺失,且发生淋巴结扩散和远处转移的结直肠癌中,p53基因缺失率较高(分别为60%和66.67%)。结论 p53基因缺失是结直肠癌的一种常见的分子结构改变,可能在结直肠癌的发生和发展中起着重要的作用。
- 薛涛祝学光王申五骆成玉
- 关键词：结肠肿瘤直肠肿瘤P53基因基因缺失
- 视网膜视细胞的成片移植被引量：3
- 2001年
- 目的 探索用准分子激光切削技术制备视网膜单层视细胞植片，经内入路视网膜下腔的单层视细胞成片移植。方法用准分子激光对大鼠视网膜进行切削，制取单层视细胞植片，此后，按内入路手术方法进行了兔视网膜下腔的异种移植。结果 切削后所得视细胞植片由单层视细胞组成，结构完整，包括外丛状层、外核层和外节层；视细胞植片经明胶包埋后被准确植入宿主视网膜下腔中，移植术后第１，２天宿主视网膜未能复位，呈脱离状态，移植物没能与视网膜色素上皮层相贴；移植后１０天，宿主视网膜复位，视细胞移植片平铺于宿主视网膜下腔中，植片视细胞外节与宿主视网膜色素上皮层相贴，未见明显免疫排异现象。结论 准分子激光制备单层视细胞植片方法简单、可行；初步观察到内入路单层视细胞成片移植后，视细胞植片能够在宿主视网膜下腔中以正常生理位置存活；视网膜下腔为理想的视网膜移植的受位。
- 刘世全王薇张惠蓉张薇夏英杰许艺民王申五
- 关键词：视网膜移植准分子激光视网膜下腔动物实验
- 反义ras基因增强足叶乙甙对白血病K562细胞的诱导凋亡作用
- 2002年
- 目的 研究rasp2 1蛋白在bcr ablp2 10蛋白抗凋亡信号传导通路中的作用。 方法 应用逆转录病毒载体pLXSN将反义N ras1cDNA转导到K 5 62细胞系中后 ,通过足叶乙甙对细胞进行诱导凋亡。结果 转导反义N ras1cDNA的K 5 62细胞内N rasp2 1表达下降。反义N ras转导细胞较对照细胞K 5 62易发生凋亡 ,对药物的敏感性显著增高。 结论 rasp2 1蛋白是bcr ablp2 10蛋白介导抗凋亡信号的重要的下游蛋白 ,阻断该蛋白的功能有可能成为治疗人类慢性髓性白血病的
- 刘乐宇孙金英殷慧君王申五
- 关键词：足叶乙甙白血病K562细胞细胞凋亡
- 一种敏感的反向杂交／酶促发光检测方法
- 1994年
- 一种敏感的反向杂交／酶促发光检测方法纪立农，孙继红，王虹，毛腾淑，王申五随着分子生物学的迅速发展，人们已能够用聚合酶链式反应（ＰＣＲ）及序列特异性寡核苷酸探针杂交（ＳＳＯＰＨ）方法对许多基因（如ＨＬＡ基因）的多态性进行分析。美国Ｐｋｉｎ－Ｅｌｍｅｒ／...
- 纪立农孙继红王虹毛腾淑王申五
- 关键词：反向杂交基因多态性
- 全文增补中
- 尿液中淋病双球菌的PCR快速诊断被引量：1
- 1995年
- 尿液中淋病双球菌的ＰＣＲ快速诊断北京医科大学微生物教研室陈宇青，闫玲北京医科大学人民医院刘红，云升，王申五本试验采用ＰＣＲ技术，通过扩增淋球菌１６ｓｒＲＮＡ基因（即ｒＤＮＡ）对淋病进行诊断。材料与方法一、标准菌株及处理方法：采用奈瑟氏淋球菌标准株２９...
- 陈宇青闫玲刘红云升王申五
- 关键词：淋病奈瑟氏淋球菌聚合酶链反应尿液
- 增敏化学发光体系的建立及其应用
- ＜正＞ 分子杂交技术及免疫测定技术为检测及分析核酸和蛋白质这二种重要的生物大分子提供了强有力的手段.但以往采用的放射性同位素标记技术存在半衰期过短、污染环境等诸多不足,近几年来陆续出现了一系列非放射性标记及检测手段.本研...
- 杨晓林黄岚李振雪刘红王申五
- 文献传递
- BCL—2蛋白不能抑制VP16诱导的乳腺癌细胞(Bcap37)凋亡被引量：4
- 1999年
- 目的 为了解BCL—2在Bcap37细胞表达增高能否抑制足叶乙甙诱导的细胞凋亡,把重组的逆转录表达载体pLXSN—bcl—2和pLXSN—neo转染Bcap37细胞,经G418筛选获得表达细胞(Bcap37—bcl—2,Bcap37—neo)。方法 经RT—PCR和Western blotting检测bcl—2基因的表达,并用不同浓度的VP16处理两种细胞16小时,经细胞形态观察、细胞凋亡原位显示、MTT实验检测细胞的凋亡变化。结果 两种细胞的凋亡变化没有显著差异。结论 BCL—2高表达不能阻滞VP16诱导的Bcap37细胞凋亡,这与我们以前所做的关于BCL—2能阻滞VP16诱导的K562细胞凋亡作用相反,推测BCL—2的抗凋亡作用可能和细胞类型有关,可能还有其它因素参与BCL—2对细胞凋亡的调节。
- 陈德喜马丽萍曹国栋王申五
- 关键词：VP16乳腺癌
- 增强化学发光技术的发展和在生物学与医学中的应用被引量：1
- 1995年
- 增强化学发光技术的发展和在生物学与医学中的应用杨晓林，王申五，蒋中华，毕建进，马立人（北京医科大学附属人民医院中心实验室，北京１０００４４）编者按：本刊自１９９３年第二期刊登“生物和化学发光技术在生物、医学中的应用”专题以来，该技术的应用又有了许多新...
- 杨晓林王申五蒋中华毕建进马立人
- 关键词：化学发光
