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CD20片段抗体在红花悬浮细胞中的表达研究被引量：2: 2017年; 【目的】研究用红花愈伤组织建立红花悬浮细胞培养体系的条件,并利用红花悬浮细胞通过农杆菌介导转化法表达CD20复合片段抗体。【方法】以红花子叶为外植体,研究不同种类激素组合对愈伤诱导率的影响,筛选优质愈伤组织进行悬浮培养,探索不同初始接种量、蔗糖质量分数、水解酪蛋白质量浓度对红花悬浮细胞生长的影响。将CD20复合片段抗体基因两端引入XmaⅠ/EcoRⅠ酶切位点,并将其与pEASY-T1和pBasta载体相连,构建pEASY-T1-CD20克隆载体和pBasta-CD20表达载体,再将构建的pBasta-CD20表达载体转入根瘤农杆菌,利用根瘤农杆菌介导红花悬浮细胞转化法表达CD20复合片段抗体。【结果】红花子叶愈伤诱导最佳条件为MS+NAA 2mg/L+6-BA 0.5mg/L、温度(25±0.1)℃、光照70μmol/(m2·s)连续光照,继代培养条件为MS+NAA 1mg/L+6-BA 0.5mg/L、30μmol/(m2·s)连续光照、温度(25±0.1)℃。悬浮细胞体系培养最佳条件为不加琼脂粉的MS+NAA 1mg/L+6-BA 0.5mg/L、接种量2.5g(50mL培养基)、蔗糖质量分数2%、水解酪蛋白800mg/L。pBastaCD20表达载体构建成功,且目的蛋白在红花悬浮细胞中成功表达。【结论】成功构建了红花悬浮细胞培养体系,并用该体系成功表达了CD20复合片段抗体。; 王立勇刘秀明张玲姚娜王德仲历雯清蔡静波李海燕姜潮; 关键词：悬浮细胞农杆菌介导

成纤维细胞生长因子9(FGF9)的研究进展被引量：12: 2015年; 成纤维细胞生长因子9(fibroblast growth factor 9,FGF9)是成纤维细胞生长因子家族(FGFs)的成员之一。广泛分布于人体各种组织中,它参与骨骼发育、血管形成、胚胎发育、损伤修复、细胞凋亡、神经再生、肿瘤生长等多种生理和病理的过程,可有效促进有丝分裂和细胞生长。研究发现,FGF9不仅在骨骼发育和生长期对软骨形成和成骨生成起着重要的作用,而且对卵巢癌的发生、神经再生、性腺分化等方面也有重要的影响,对FGF9作为一个有用治疗靶点发挥作用的功能和机制仍有待进一步的发现及研究。现针对FGF9的特点,综述了其在表达及适应征机制方面的研究进展,为FGF9进一步的研究及合理开发利用提供参考。; 易善勇杨晶官丽莉王艳芳黄建王立勇李海燕李校堃姜潮

利用红花悬浮细胞生产CD20抗体的方法: 本发明公开了一种利用红花悬浮细胞系统生产CD20单链抗体的方法。本发明按照植物偏好性密码子，人工合成CD20单链抗体基因，将其连接到含有35S启动子的植物表达载体pBasta上，采用农杆菌介导的方法转化红花愈伤组织，筛选...; 姜潮李校堃李海燕刘秀明王立勇姚娜; 文献传递

利用红花悬浮细胞生产CD20抗体的方法: 本发明公开了一种利用红花悬浮细胞系统生产CD20单链抗体的方法。本发明按照植物偏好性密码子，人工合成CD20单链抗体基因，将其连接到含有35S启动子的植物表达载体pBasta上，采用农杆菌介导的方法转化红花愈伤组织，筛选...; 姜潮李校堃李海燕刘秀明王立勇姚娜; 文献传递

红花(Carthamus tinctorius L.)不同开花时期的转录组测序及黄酮合成相关基因的验证被引量：5: 2015年; 应用454测序技术对红花(Carthamus tinctorius L.)初花期和盛花期两个样本进行转录组测序,分别获得了577 664和562 930条Clean reads片段,其平均长度分别为427 bp和436 bp。差异表达分析结果发现,在初花期获得40 139个基因,盛花期获得39 768个基因,在两个时期同时表达的基因有28 316个。COG/KOG分析中,获得了大量与代谢相关的功能注释信息,注释到比例最高的为功能预测,占24.681%。KEGG Pathway富集分析中,找到红花黄酮化合物合成途径中的关键酶基因,利用Real-time PCR方法验证了三个基因的正确性。表达量分析表明,查尔酮合酶在两个红花品种中各个开花时期的相对表达量最高。; 刘秀明张宇姚娜崔喜燕王立勇董园园王南李晓薇李海燕李校堃; 关键词：红花转录组测序

利用红花悬浮细胞表达CD20抗体的研究: 植物悬浮细胞具有良好的均一性、分散性、生长迅速、生物价格低廉等特点,因此利用植物悬浮系统作为植物反应器生产生物药,是极具价值与前景的项目。CD20分子为B淋巴细胞表面特有的抗原,CD20分子具有不易脱落、与抗体结合后不内...; 王立勇; 关键词：悬浮细胞农杆菌介导; 文献传递

红花查耳酮异构酶基因植物表达载体的构建及拟南芥转化被引量：3: 2016年; 目的构建红花查耳酮异构酶(CHI)基因的植物表达载体并在拟南芥中进行超表达验证该基因的功能。方法将已经分离的红花CHI基因作为目的基因,在其两端引入Bam H I和Eco R I酶切位点,构建含有35S启动子的植物超表达载体p BASTA-CHI,通过Flora-dip法将其转化到拟南芥中,并对转基因拟南芥T2代植株进行PCR和总黄酮量检测。结果转基因拟南芥T2代植株的PCR检测,红花CHI基因已经初步整合到拟南芥基因组中,黄酮量检测表明,转红花CHI基因的拟南芥比野生型拟南芥中的黄酮量有所提高,最高提高到2.3倍。结论成功构建了含有红花CHI基因的植物表达载体,并在拟南芥中进行超表达,获得了转基因拟南芥T2植株。; 刘秀明李晓璇姚娜王立勇李晓薇董园园王南孟璐璐李海燕; 关键词：红花黄酮拟南芥 PCR

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王立勇

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