杨晋
- 作品数：7 被引量：18H指数：3
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- 慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞内与血清HBV DNA载量的相关性及超微结构研究
- 2011年
- 目的研究慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞(PBMCs)与血清中HBV DNA载量之间的相关性及PBMCs超微结构的变化。方法应用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测60例慢性乙型肝炎患者PBMCs与血清中HBV DNA的载量;并采用透射电镜分析观察其中20例PBMCs的超微结构所见。结果血清中HBV DNA载量为(5.25±2.11)log10copies/ml,PBMCs中HBV DNA载量为(3.74±1.08)log10copies/ml,两者的HBV DNA表达呈正相关(r=0.84,P<0.0001)。电镜观察到血清HBVDNA载量高(≥105copies/ml)的患者PBMCs胞浆中易见到HBV颗粒,线粒体膨胀、嵴消失,内质网也可见膨胀。病程5年以上或血清HBV DNA载量<103copies/ml的患者,虽然PBMCs中病毒颗粒不多见,但细胞器多有改变。结论慢性乙型肝炎患者PBMCs与血清中HBV DNA载量呈正相关,可作为疗效观察指标。随着病程延长,尽管血清HBV DNA载量明显减少,但PBMCs细胞器损伤明显,提示机体免疫功能受损。
- 赵绍林陈乃玲杨新玲杨新玲杨晋杨晋
- 关键词：外周血单个核细胞超微结构
- 外周血中性粒细胞膜碱性磷酸酶在预测全身炎症反应综合征患者血液细菌感染中的价值被引量：9
- 2015年
- 目的探讨中性粒细胞膜碱性磷酸酶（m NAP）在预测全身炎症反应综合征（SIRS）患者血液细菌感染中的价值。方法采用前瞻性研究方法,对进行血培养的SIRS患者149例（血培养阳性组59例,血培养阴性组90例）,用流式细胞仪检测患者外周血m NAP,乳胶增强散射免疫比浊法和电化学发光法分别测定C反应蛋白（CRP）和降钙素原（PCT）水平,比较各组间差异及指标间的相关性。应用ROC曲线评价m NAP、PCT和CRP预测SIRS患者血液细菌感染的价值。结果血培养阳性SIRS组外周血m NAP、PCT和CRP水平中位数（四分位数）分别为13 683（9 825,18 605）AB/c、5.680（1.300,18.390）ng/m L和139.00（65.60,201.00）mg/L,均明显高于血培养阴性SIRS组7 297（4 600,10 363）AB/c、0.432（0.115,1.645）ng/m L、75.25（36.90,125.25）mg/L,差异均有统计学意义（P〈0.01）。m NAP、PCT和CRP预测SIRS血液细菌感染的ROC曲线下面积（AUC）分别为0.806、0.797和0.692,敏感性分别为66.1%、76.3%和61.0%,特异性分别为83.3%、74.4%和70.0%,阳性预测值（PPV）分别为72.2%、66.2%和58.1%,阴性预测值（NPV）分别为78.9%、79.8%和73.3%,m NAP和PCT联合检测时AUC为0.841（95%CI：0.774~0.908）,敏感性和特异性分别为79.7%和78.9%。血培养阳性组m NAP水平与PCT呈显著正相关（r=0.509,P〈0.01）。结论 m NAP联合PCT检测对预测SIRS患者血液细菌感染具有较高的敏感性和特异性,有较好的临床应用前景。
- 张春艳李海宁张欢欢郑萍陈晓兵杨晋赵绍林吴惠毅
- 关键词：全身炎症反应综合征降钙素原
- 慢性乙型肝炎病毒感染者外周血单个核细胞病毒表达及超微结构研究
- 外周血单个核细胞(PBMCS)是T淋巴细胞、B淋巴细胞、巨噬细胞、自然杀伤(NK)细胞等免疫活性细胞的集合体，在机体免疫应答中起十分重要的作用，对乙型肝炎病毒(HBV)感染后的转归有重要影响。研究显示，PBMCS是仅次...
- 杨新玲陈乃玲赵绍林杨晋吴惠毅曹海燕
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- 体外培养中性粒细胞的活力、凋亡、活性氧变化趋势研究
- 2016年
- 目的:探讨中性粒细胞分离培养后细胞活力、凋亡、活性氧(Reactive oxygen species,ROS)生成的变化。方法:采用密度梯度离心法分离健康人外周血中性粒细胞,在含10%胎牛血清的培养液于37℃、5%CO2饱和湿度的培养箱中培养至96 h。应用流式细胞仪检测0、24、48、72和96 h的细胞活力、凋亡;在0、12、24和36 h检测ROS的生成。结果:中性粒细胞在体外培养24 h内,细胞活力可保持90%以上,24 h凋亡细胞比例与0 h相比差异无统计学意义(P>0.05),在体外培养72 h后细胞活力明显下降和细胞凋亡增加,在体外培养96 h细胞几乎全部死亡;中性粒细胞产生ROS的能力在12 h已显著下降。结论:中性粒细胞在24 h内处于相对稳定的状态,细胞活力大于90%,凋亡细胞数变化不明显,可用于一般体外的实验研究。然而,中性粒细胞在体外培养12 h产生ROS的能力显著下降,ROS功能实验要在细胞分离后立即进行。
- 李海宁赵绍林杨晋李伟
- 关键词：中性粒细胞细胞活力细胞凋亡活性氧
- 流式细胞术检测中性粒细胞膜碱性磷酸酶在血流感染诊断中的价值被引量：6
- 2015年
- 目的：探讨流式细胞术检测外周血中性粒细胞膜碱性磷酸酶（ mNAP）表达在血流感染诊断中的应用价值。方法选择2013年6月至2014年10月在连云港市第一人民医院住院病例中疑似血流感染而行血培养检查的患者298例，以同期医院体检中心80名健康体检者作为对照组。通过病原微生物学证实血流感染的诊断，应用流式细胞术检测mNAP，电化学发光法检测血清降钙素原（PCT），散射免疫比浊法检测血清 C反应蛋白（CRP）。采用受试者工作特征（ROC）曲线评价mNAP、PCT、CRP诊断血流感染的价值。结果298例患者中，根据病原微生物学证实血流感染109例，其中革兰阳性菌感染43例，革兰阴性菌感染66例。血流感染患者组CRP、PCT、mNAP中位数分别为138.71 mg／L、7.04 ng／mL、13929 AB／c，显著高于健康对照组的1.50 mg／L、0.12 ng／mL、1831 AB／c（U＝5.00、48.50和65.01，P＜0.01）。革兰阳性菌感染患者的mNAP为9598（6064-11643） AB／c，低于革兰阴性菌感染患者16512（11654-22001） AB／c，差异有统计学意义（ U＝250．00，P＜0.01）。 ROC曲线分析结果表明，mNAP、PCT 及CRP 诊断血流感染的曲线下面积（AUC）分别为0.987、0.962和0.901，最佳切点分别为4578AB／c、0.90 ng／mL 和13.50 mg／L，敏感性分别为95.8％、93.0％和90.3％，特异性分别为97.8％、95.6％和85.5％。结论在mNAP、PCT、CRP三个指标中，mNAP诊断血流感染的效能最高，可作为血流感染诊断的生物标志物。
- 张欢欢李海宁郑萍赵绍林张春艳张婷霍娟李伟杨晋吴惠毅
- 关键词：流式细胞术碱性磷酸酶中性粒细胞碱性磷酸酶血流感染
- 尿exosomes的分离方法及在临床中应用研究进展被引量：1
- 2016年
- 尿exosomes是肾和泌尿生殖系统上皮细胞分泌至尿中直径为40~100 nm的脂质双分子层结构圆形膜性小囊泡,能够反映分泌细胞的生理和功能状态,exosomes中蛋白质及RNA等分子可作为疾病标记物用于疾病诊断。尿液标本易得且无创,其exosomes中蛋白质及RNA较尿液中可溶性蛋白质和RNA稳定,在各种疾病的诊断中具有广泛的应用前景。本文就近年来尿exosomes分离纯化方法及其作为蛋白或RNA标记物应用于各种疾病诊断的研究进展作一综述。
- 朱迎星郑萍赵绍林杨晋吴惠毅
- 关键词：外泌体分离纯化
- 中性粒细胞碱性磷酸酶对中性粒细胞功能影响的体外研究被引量：4
- 2016年
- 目的探讨中性粒细胞碱性磷酸酶（neutrophils alkaline phosphatase，NAP）对中性粒细胞迁移、活性氧（ROS）生成以及凋亡的影响。方法通过慢病毒感染人早幼粒细胞白血病细胞株HL-60获得NAP高表达细胞株，采用RT-PCR和Westernblot技术分别检测感染后细胞NAP的基因转录及蛋白表达水平。HL-60细胞经1．5％DMSO体外诱导分化为类中性粒细胞后进行相关实验：分别利用Transwell迁移实验和流式细胞术检测高表达NAP中性粒细胞的迁移及ROS生成能力；流式细胞术检测细胞凋亡；Westernblot法检测高表达NAP中性粒细胞中凋亡相关蛋白Bax、caspase-3和caspase-9的表达情况。结果经慢病毒感染的HL-60细胞通过嘌呤霉素筛选后80％以上细胞可见绿色荧光，且NAP在基因及蛋白水平表达均明显升高。HL．60细胞经1．5％DMSO体外诱导分化5d后，细胞体积变小、表面出现许多突起，核质比例降低，核仁消失，核染色质由密集趋向疏松，细胞核扭曲折叠呈杆状或分叶，CD11b＋细胞百分比明显升高。Transwell迁移实验结果显示，高表达NAP的中性粒细胞迁移细胞数多于阴性对照组[（15．30±3．65）×10^3对（8．00±0．78）×10^3，P〈0．001]。流式细胞术检测结果表明，高表达NAP的中性粒细胞胞内ROS的平均荧光强度高于阴性对照组（355．70±20．10对103．22±4．71，P〈0．001）；与阴性对照组比较，高表达NAP中性粒细胞胞凋亡率及凋亡相关蛋白Bax、active-caspase．3以及active．caspase-9的表达水平明显上调。结论NAP具有促进类中性粒细胞迁移及ROS生成、加速细胞凋亡的生物学作用。
- 李海宁李伟杨晋张春艳吴惠毅
- 关键词：HL-60细胞碱性磷酸酶
