陈君
- 作品数:5 被引量:14H指数:3
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- 杨梅素对人卵巢癌SKOV3细胞的凋亡诱导作用被引量:6
- 2015年
- 目的:观察杨梅素对人卵巢癌SKOV3细胞的生长抑制及凋亡诱导作用,并探讨其可能机制。方法:体外培养人卵巢癌SKOV3细胞,按杨梅素给药浓度将细胞分为对照组和低、中、高浓度杨梅素组,杨梅素给药浓度分别为0、20、40和60mg·L-1。MTT法检测各组SKOV3细胞存活率;激光共聚焦显微镜观察各组SKOV3细胞核形态变化并计算异常细胞核比率;免疫荧光法检测各组SKOV3细胞中凋亡相关蛋白-活化半胱氨酸蛋白酶3(active Caspase-3)的表达;Western blotting法检测各组SKOV3细胞中DNA损伤相关蛋白γ-H2AX的表达水平。结果:与对照组比较,低、中和高浓度杨梅素组SKOV3细胞存活率明显下降(t=-12.35,t=-11.42,t=-10.21,P<0.05);激光共聚焦显微镜下各浓度杨梅素组细胞出现核皱缩等凋亡形态学改变,且细胞中异常细胞核比率高于对照组(t=6.87,t=9.35,t=7.22,P<0.05),高浓度杨梅素组异常细胞核比率高于低、中浓度杨梅素组(t=9.55,t=7.25,P<0.05);随着杨梅素给药浓度的增加,SKOV3细胞中active Caspase-3的表达水平有升高趋势,各浓度杨梅素组SKOV3细胞中γ-H2AX的表达水平高于对照组(t=5.41,t=3.21,t=6.58,P<0.05)。结论:杨梅素可抑制人卵巢癌SKOV3细胞增殖并诱导其凋亡,DNA双链断裂可能是其促凋亡的机制之一。
- 于洋刘亚萌吴少花谢奇衣丹徐海月胡耀狄陈君徐冶
- 关键词:杨梅素卵巢肿瘤SKOV3细胞DNA双链断裂
- 杨梅素抗肿瘤活性研究进展被引量:4
- 2015年
- 杨梅素(myricetin)是广泛存在于天然植物中的一种黄酮类物质,化学式为3,5,7-三羟基-2-(3,4,5-三羟基苯基)-4H-1-苯并呋喃-4-酮。杨梅素具有很高的药用价值,近年来人们发现它抗肿瘤方面也有很好的效果。本文将从杨梅素对肿瘤细胞细胞周期和细胞凋亡信号途径的影响以及杨梅素联合用药在抗肿瘤上的应用等方面进行综述。
- 吴少花陈君刘亚萌徐冶
- 关键词:杨梅素肿瘤凋亡
- 氯喹对杨梅素诱导HeLa细胞凋亡的影响被引量:1
- 2015年
- 目的研究氯喹(chloroquine,CQ)对杨梅素诱导的He La细胞凋亡的影响。方法体外培养宫颈癌He La细胞,实验分为Control组、单加杨梅素(50μg/ml)组、单加CQ(20μM/ml)组、合加药物组(杨梅素50μg/ml+CQ 20μg/ml)共4组,观察药物对He La细胞增殖率的影响。共聚焦显微镜下观察He La细胞核的形态变化、凋亡相关蛋白及自噬标志物的表达。结果与单加杨梅素组相比,合加药物组He La细胞增殖率明显下降,凋亡形态学改变更加明显及凋亡相关蛋白active caspase-3表达增加;自噬标志物微管相关蛋白轻链3(microtubule-associated protein light chain 3,LC3)表达增加。结论氯喹能够促进杨梅素诱导的HeLa细胞凋亡。
- 陈君吴少花窦茗瀚刘亚萌魏艳徐冶
- 关键词:杨梅素肿瘤自噬凋亡氯喹
- Ca^(2+)在顺铂诱导人卵巢癌SKOV3细胞自噬反应中的作用被引量:2
- 2016年
- 背景与目的:Ca^(2+)在维持细胞生物活性方面扮演着很重要的角色,其在细胞内的储存、释放和摄取主要受内质网调节,细胞内Ca^(2+)浓度的稳态是维持细胞生物能量代谢、蛋白质折叠和分泌的基础条件。本研究探讨Ca^(2+)在顺铂诱导SKOV3细胞内质网应激-自噬反应中的作用机制。方法:取人卵巢癌SKOV3细胞系为研究对象,按以下步骤分组:1探讨顺铂诱导内质网应激与自噬反应,用6μg/m L的顺铂处理SKOV3细胞0、6、12和24 h;2了解顺铂和毒胡萝卜内酯(thapsigargin,TG)诱导内质网应激释放的Ca^(2+)与自噬的关系,分别用TG和顺铂处理SKOV3细胞0、9和12 h;3探究Ca^(2+)对自噬的作用机制,分成对照组、顺铂组、TG组、BAPTA-AM组、顺铂联合BAPTA-AM组和TG联合BAPTA-AM组。用蛋白[质]印迹法(Western blot)检测内质网应激相关蛋白GRP78和自噬标志性蛋白LC3蛋白的表达水平;用Fluo-4钙离子荧光探针检测细胞质中的Ca^(2+)浓度变化;间接免疫荧光染色后,用共聚焦显微镜检测LC3蛋白的表达情况。结果:SKOV3细胞经6μg/m L顺铂作用6 h时GRP78灰度值(1.393±0.004)与其对照组(0.679±0.011)相比显著提高(t=113.2,P=0.000),在12 h时LC3灰度值(0.072±0.002)与其对照组(0.038±0.000)相比显著提高(t=25.5,P=0.000)。间接免疫荧光结果显示,顺铂(6μg/m L)组和TG(3μmol/L)组随作用时间的延长,细胞内LC3荧光斑点会逐渐增多,并伴随着细胞质Ca^(2+)浓度上升。后经钙离子络合剂BAPTA-AM干预后,细胞内LC3荧光强度进一步增强。Westren blot结果显示,顺铂组LC3灰度值(0.039±0.000)小于顺铂联合BAPTA-AM组(0.071±0.001),TG组(0.035±0.001)小于TG联合BAPTA-AM组(0.065±0.001),差异有统计学意义(P=0.000)。结论:顺铂诱导SKOV3细胞内质网应激和自噬的发生,并伴随着细胞质内Ca^(2+)浓度的上升。络合细胞质内Ca^(2+)能增强顺铂诱导的自噬反应。
- 曾林川邓慧敏陈君窦茗瀚徐冶
- 关键词:顺铂CA^2+内质网应激自噬
- 杨梅素诱导HeLa细胞凋亡的形态学研究被引量:5
- 2015年
- 目的研究杨梅素诱导宫颈癌HeLa细胞凋亡作用,并观察其形态学变化及凋亡相关蛋白的表达。方法体外培养宫颈癌HeLa细胞分为0、50、100、150mg/L共4组,以观察杨梅素对宫颈癌HeLa细胞增殖率的影响。光镜观察不同浓度杨梅素对HeLa细胞生长的影响;共聚焦显微镜观察HeLa细胞核的形态变化及凋亡相关蛋白表达。结果与不加药物组相比,给予不同浓度的杨梅素导致HeLa细胞增殖率明显下降,出现凋亡形态学改变及凋亡相关蛋白activecaspase-3表达增加。结论杨梅素引起HeLa细胞凋亡,且呈剂量依赖性。
- 刘师兵陈君吴少花窦茗瀚刘亚萌魏艳徐冶
- 关键词:杨梅素宫颈癌凋亡