孙志贤
- 作品数：24 被引量：91H指数：6
- 供职机构：中国医学科学院放射医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 抗人GPA^N单克隆抗体的制备及鉴定
- 2000年
- 目的 制备抗GPA单克隆抗体以建立“GPA体细胞突变分析法”。方法 用O ,N型人红细胞 ,以及纯化人GPAN 免疫BALB/c小鼠 ,经杂交瘤技术制备 ,用细胞凝集、间接免疫荧光筛选 ,用ELISA、Westernblot、酶处理红细胞的间接免疫荧光标记鉴定。结果 获得抗GPAN 单克隆抗体 6A8杂交瘤细胞系。其单抗属lgG3亚类 ,λ型轻链 ,识别和结合GPAN 氨基端 1～ 8位决定位点 ,对糖链依赖。流式细胞分选结果显示 6A8特异结合二甲亚胺固定的人MN和N型红细胞。结论 对分析由于基因突变和糖基化变异所致N ,MN红细胞GPAN 突变有理论研究和应用价值。
- 毛建平董燕刘斌孙志贤
- 关键词：MN血型血型糖蛋白A红细胞单克隆抗体
- 染色体着丝粒探针的制备及其在检测染色体畸变中的应用
- 1998年
- 人类染色体的着丝粒区含有多种高度重序列家族，其中α卫星ＤＮＡ在每号染色体的着丝粒区都存在，它们由１７１ｂｐ长的重复序列单元构成，其中大部分序列高度保守［１］。本文通过简并引物扩增１７１ｂｐ的重复单元，生物素标记制备成着丝粒探针，并应用此探针对辐射诱发...
- 张泽云金璀珍刘秀林程昕叶常青孙志贤
- 关键词：染色体染色体畸变
- 荧光原位杂交检测上海625事故受照者的染色体畸变被引量：6
- 2000年
- 张泽云刘秀林程昕金璀珍叶常青孙志贤
- 关键词：荧光原位杂交染色体畸变
- 蛋白融合技术的应用
- 1995年
- 蛋白融合技术的应用葛伟文，贺福初，孙志贤（北京放射医学研究所北京１００８５０）将通过人工合成或蛋白酶酶切获得的几个不同来源的肽段相互连接，获得不同蛋白质之间的融合体，可能体现所有来源蛋白质的活性和功能，甚至可能获得协同效应。另外，随着基因工程技术的成...
- 葛伟文贺福初孙志贤
- 关键词：蛋白
- GPA分析法的建立及其在人体细胞突变检测中的应用
- 血型糖蛋白(Glycophorin或Sialoglycophorin,GP或sGP)是红细胞膜中主要含唾液酸的跨膜蛋白,有A,B,C和D四种。GPA是MN血型糖蛋白,GPB表达Ss、U血型,GPC、GPD则是Gerbic...
- 毛建平董燕孙志贤
- 关键词：GPA红细胞膜体细胞突变红系细胞
- 文献传递
- 利用酵母双杂交系统研究caspase相互作用蛋白
- 童新刘斌孙志贤
- 关键词：相互作用蛋白酵母细胞CASPASE细胞凋亡CASPASE酵母双杂交系统
- 文献传递
- γ-射线诱导HL-60细胞凋亡的观察被引量：4
- 2000年
- 目的 观察γ-射线诱导HL-60细胞凋亡的时间和剂量效应，以探求辐射诱发肿瘤细胞凋亡分子机制。方法 分别以2.5、5、7.5、10、15Gy γ射线照射HL60细胞，于照后继续培养3、6、9、12、24、27、30h，分别收获细胞。电泳检测DNA梯状带；流式细胞术(FCM)细胞凋亡定量并观察细胞周期变化；Hoechst 33258-PI复染荧光显微镜计数凋亡细胞及已死亡细胞百分率。结果 HL-60细胞受照后死亡方式主要是凋亡，其首先阻滞在G２／M期并由此走向凋亡；DNA梯状带及FCM检测结果发现，细胞凋亡具有时间和剂量依赖性；Hoechst 33258PI染色法检测结果与FCM检测的凋亡细胞随剂量的加大及时间的推移而增多的结果并不呈平行关系。结论 γ-射线诱导HL-60细胞凋亡时间和剂量效应关系的确立为进一步探讨该凋亡途径分子机制奠定了基础。
- 李小明童新宋天保孙志贤
- 关键词：细胞凋亡HL-60细胞白血病Γ射线
- OSM对黑色素瘤的抑制作用与基因-放射治疗效果
- 目的探讨OSM对黑色素瘤体内生长的抑制作用及其在基因-放射治疗中的应用。方法人OSMcDNA插入pCI-neo构成OSM表达质粒(pO);Egr-1基因调控序列(Egr-1R)连接于OSMcDNA上游构成辐射诱导性OSM...
- 吕星邢瑞云孙志贤裴雪涛吴祖泽
- 关键词：黑色素瘤肿瘤抑制率基因-放射治疗
- 文献传递
- 小鼠Egr-1基因调控序列的克隆及其辐射诱导特性的鉴定被引量：18
- 1998年
- Egr-1(early growth response-1)系-具有辐射诱导特性的转录因子.其调控序列被证实可通过与肿瘤杀伤基因相连接的方法而赋予后者以辐射诱导特性,因而被用于肿瘤的基因-放射治疗研究.为此,我们用PCR方法从BALB/c小鼠基因组DNA扩增出445bp长Egr-1基因调控序列,序列分析证实,除-392位一个碱基(A→G)相差外,其余均与文献报道一致,包括6个对辐射诱导特性起关键作用的CC(A+T)_6GG结构域-将克隆的Egr-1基因调控序列连入pCL3荧光素酶报告质粒,转染小鼠恶性黑色素瘤细胞(B16),转染细胞用^(60)Coγ-线进行2.5、5.0和10.0Gy不同剂量照射后,检测细胞裂解液中荧光素酶活性.与未照射细胞比较.照射后细胞荧光素酶活性明显提高,以2.5Gy剂量最为显著.提高约138%,表明Egr-1基因调控序列具有辐射后诱导下游基因表达的功能.
- 吕星邢瑞云孙志贤裴雪涛吴祖泽
- 关键词：EGR-1基因放射疗法肿瘤
- 辐射后单个细胞DNA结构变化的定量检测被引量：11
- 1994年
- 细胞照射后可产生ＤＮＡ链断裂、ＤＮＡ－ＤＮＡ交联、ＤＮＡ－蛋白质交联等重要的ＤＮＡ结构损伤，最终可导致ＤＮＡ高级结构－ＤＮＡ超螺旋结构状态的改变，而引发ＤＮＡ复制、表达等一系列改变．参考国外报导，建立了单细胞电泳法（ｓｉｎｇｌｅｃｅｌｌｇｅｌｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓａｓｓａｙ），并辅以图象分析技术，可快速检测低达０．１Ｇｙ剂量所致ＤＮＡ结构损伤，并得到了较好的剂量－效应关系，可望成为生物剂量计，用于环境低剂量辐射的监测．
- 罗瑛孙志贤杨瑞彪张振声
- 关键词：细胞DNA
