刘纯杰
- 作品数：5 被引量：12H指数：3
- 供职机构：北京生物工程研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 幽门螺杆菌重组腺病毒双价疫苗的构建及免疫学评价被引量：4
- 2004年
- 幽门螺杆菌 (Hp)是导致胃炎、消化道溃疡和胃癌的的主要病原菌 .利用基因重组技术 ,成功将Hp的ureB和hspA基因融合 .将ureB hspA融合基因成功构建到腺病毒载体上 .检测结果表明 ,该重组腺病毒具有侵染真核细胞能力 ,且能在真核细胞中表达目标抗原 .以血清中IgG和新鲜粪便中sIgA ,评价其免疫效果 ,结果显示 。
- 刘秀丽刘纯杰陶好霞李淑琴李勣张兆山
- 关键词：幽门螺杆菌重组腺病毒尿素酶B热休克蛋白A体液免疫
- 幽门螺杆菌尿素酶B基因的克隆与高效表达被引量：3
- 2001年
- 目的克隆并表达幽门螺杆菌尿素酶B基因。方法提取幽门螺杆菌染色体DNA用PCR方法扩增尿素酶B基因。将其克隆至表达载体pQE30,转化大肠杆菌M15,IPTG诱导表达。结果分离得到了1.7kb的ureB基因片段,并在大肠杆菌中实现了该基因的高效表达。在37℃诱导表达4h后,表达产物约占细菌总蛋白的34.0%。表达以可溶性蛋白和包涵体两种形式存在,其中主要是包涵体的形式,目的蛋白占不溶性蛋白的55.8%。结论幽门螺杆菌ureB基因的克隆与表达为Hp疫苗的研制打下了基础。
- 刘纯杰张兆山陶好霞李淑琴周围黄翠芬
- 关键词：幽门螺杆菌尿素酶B基因克隆
- 幽门螺杆菌HspA亚基的表达与纯化
- 2005年
- 目的:利用原核表达载体高效表达幽门螺杆菌热休克蛋白A(HspA),并进行纯化. 方法:PCR扩增hspA基因,将其克隆至原核表达载体pET22b,pQE-60,pGEX-4T-2中,转化大肠杆菌,经IPTG诱导后,SDS—PAGE分析表达.利用镍离子亲和层析对表达产物进行纯化.免疫印迹检测蛋白的抗原性. 结果:PCR扩增得到hspA基因,在载体pQE-60中以HspA和HspA-His6两种形式得到表达,表达量高达菌体总蛋白的40%以上.经镍离子亲和层析后,纯化率分别为88.63%和86.32%,但HspA—His6在纯化过程中发生降解.免疫印迹实验表明,HspA和HspA-His6都有很好的抗原性. 结论:实现了HspA蛋白的高效表达和纯化,为幽门螺杆菌HspA亚单位疫苗的免疫实验奠定基础.
- 刘秀丽张兆山陶好霞展德文刘纯杰
- 关键词：幽门螺杆菌A亚基HSPA免疫印迹检测纯化过程
- 幽门螺杆菌热休克蛋白A基因的克隆及论著高效分泌表达被引量：4
- 2000年
- 目的 :从幽门螺杆菌 (Hp)分离热休克蛋白A基因 ,并实现在大肠杆菌中的融合分泌表达。方法 :提取Hp染色体DNA ,用PCR方法扩增hspA基因。经克隆、测序后 ,构建融合分泌表达载体 pMAL HspA ,转化大肠杆菌 ,IPTG诱导表达。 结果 :分离得到了高度保守的 354bp的hspA基因片段 ,并在大肠杆菌中实现了该基因的融合分泌表达。在 37℃诱导表达 3h后 ,其融合分泌表达蛋白可占细菌周质总蛋白的 66.6%。该表达带可被抗Hp的特异抗体所识别。 结论 :幽门螺杆菌hspA基因的克隆与表达为Hp疫苗的研制打下了基础。
- 刘纯杰张兆山李淑琴黄翠芬
- 关键词：幽门螺杆菌热休克蛋白聚合酶链反应胃疾病
