吕鹏
- 作品数：6 被引量：8H指数：2
- 供职机构：甘肃农业大学动物医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金甘肃省生物技术专项甘肃省科技支撑计划更多>>
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- HSPA9B在牦牛体外受精胚胎中的表达
- 2015年
- 本试验旨在研究热休克蛋白70-9B（heat shock 70 000protein-9B,HSPA9B）在牦牛早期体外受精胚胎中的表达差异及其与体外受精胚胎发育的关系。在正常生理条件下,采集青海高原牦牛卵巢,捡取质量良好的卵丘-卵母细胞复合体（cumulus-oocyte complexes,COCs）,进行体外受精和体外培养,采取实时荧光定量（RT-qPCR）和间接免疫荧光技术,检测HSPA9B在不同时期体外受精胚胎中的表达差异及其蛋白分布。实时荧光定量结果表明,HSPA9B在2~4细胞期胚胎中的相对表达量,分别是在桑椹胚和囊胚中的6.693 4、5.227 4倍,HSPA9B在4~8细胞期胚胎中的相对表达量分别是在2~4细胞期胚胎、桑椹胚和囊胚中的1.136 8、9.089 7和5.937 2倍。间接免疫荧光染色结果表明,在2~4细胞期胚胎、4~8细胞期胚胎和桑椹胚中,胞核HSPA9B的相对表达量较胞质弱,在囊胚中胞核HSPA9B的相对表达量较胞质强。由此得出结论：通过基因水平研究,发现HSPA9B在牦牛早期各时期的体外受精胚胎中存在表达差异,HSPA9B在2~4、4~8细胞期胚胎中的相对表达量与其在桑椹胚和囊胚中的相对表达量差异性极显著（P〈0.01）,提示：可能是HSPA9B在胚胎早期发育中发挥重要作用;通过蛋白水平研究,发现HSPA9B在2~4细胞期胚胎、4~8细胞期胚胎和桑椹胚中,胞核HSPA9B的表达量较胞质的表达弱,在囊胚中胞核HSPA9B的表达量较胞质的表达强,结果表明,在体外培养的环境应激条件下,牦牛体外受精胚胎发育至囊胚时,HSPA9B蛋白的分布可能发生了移位。
- 吕鹏潘阳阳崔燕李秦何翃闳张译夫李谷月樊江峰余四九
- 关键词：牦牛体外受精胚胎实时荧光定量间接免疫荧光
- 两种培养液对牦牛孤雌激活胚胎发育及DNMT1基因表达的影响被引量：2
- 2015年
- 为寻求较佳的牦牛胚胎培养液,将成熟的牦牛卵母细胞进行孤雌激活后分别置于培养液SOFaa和G1/G2中进行发育培养,观察培养开始后第24、48、96、120和168小时胚胎的发育情况,并采用实时荧光定量PCR检测DNMT1基因的表达量。结果显示,SOFaa液中2-4细胞胚胎、4-8细胞胚胎、9-16细胞胚胎、桑葚胚和囊胚的发育率分别为87.50%、68.00%、40.00%、34.29%、12.86%;而G1/G2联合培养液中2-4细胞胚胎、4-8细胞胚胎、9-16细胞胚胎、桑葚胚和囊胚的发育率分别为89.33%、81.33%、58.67%、49.33%、17.14%。胚胎中DNMT1基因在G1/G2联合培养液中的表达量显著高于SOFaa液中的表达量。以上结果表明,G1/G2联合培养液可通过调控DNMT1基因的表达而提高胚胎发育率,可作为牦牛胚胎体外培养的较佳培养液。
- 李秦潘阳阳张译夫郑红飞吕鹏何翃闳崔燕余四九
- 关键词：牦牛卵母细胞孤雌激活DNMT1基因
- 牦牛孤雌激活胚胎在不同培养液中的发育及DNMT1基因的表达
- 为寻求较佳的牦牛胚胎培养液,本实验中将成熟的牦牛卵母细胞进行孤雌激活后置于SOFaa和G1/G2两种不同的培养液中进行发育培养,统计其在24h、48h、96h、120h和168h的胚胎发育情况,并采用实时荧光定量PCR....
- 李秦潘阳阳张译夫郑红飞吕鹏何翃闳崔燕余四九
- 关键词：牦牛卵母细胞孤雌激活DNMT1实时荧光定量PCR
- 文献传递
- HSP27在黄体期牦牛主要生殖器官中表达差异的研究被引量：6
- 2015年
- 为了探讨正常生理条件下牦牛热休克蛋白27(HSP27)在黄体期牦牛主要生殖器官中的表达差异,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测了HSP27基因在黄体期牦牛卵巢、输卵管和子宫中的相对表达量,用Western-blot和免疫组织化学SP法研究了HSP27蛋白在黄体期牦牛卵巢、输卵管和子宫中的表达量和组织内分布。RT-qPCR分析表明,HSP27基因在黄体期牦牛卵巢、输卵管和子宫中均有表达,其中卵巢中的表达量分别是输卵管和子宫组织的1.03倍和4.63倍。免疫组织化学结果表明,牦牛卵泡膜内层、颗粒层、输卵管黏膜上皮、子宫内膜上皮和子宫腺中均有HSP27阳性表达。Western-blot和免疫组织化学结果表明,HSP27蛋白在黄体期牦牛各主要生殖器官组织中表达差异极显著(P<0.01),其中在卵巢中表达量最高,在子宫中表达量最低。本试验结果表明,HSP27在黄体期牦牛的各个主要生殖器官中存在表达差异,这为进一步研究HSP27在哺乳动物生殖过程中发挥的作用提供了理论依据。
- 何翃闳潘阳阳杨雪崔燕吕鹏樊江峰陈平温泽星李谷月余四九
- 关键词：热休克蛋白27牦牛实时荧光定量PCR
