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过表达NAMPT脐带间充质干细胞外泌体的抗衰老作用被引量：2: 2021年; NAMPT是NAD+补救合成途径的限速酶,具有抗衰老作用。外泌体是一种包含蛋白质、miRNA、mRNA、lncRNA等内容物的天然内源性载体。利用慢病毒方法构建NAMPT过表达的人脐带间充质干细胞系,获得过表达NAMPT脐带间充质干细胞外泌体,随后通过与人皮肤成纤维细胞共培养和饲喂秀丽隐杆线虫,研究过表达NAMPT脐带间充质干细胞外泌体对其抗衰老的影响。结果表明:基因修饰后脐带间充质干细胞及其外泌体内NAMPT蛋白含量显著升高,并能促进人皮肤成纤维细胞增殖和延缓人皮肤成纤维细胞衰老;同时能延长秀丽隐杆线虫寿命和增加秀丽隐杆线虫抗氧化能力。这一研究提示过表达NAMPT基因的间充质干细胞外泌体具有一定的抗衰老作用。; 周琦琦孙振刘洋洋刘洋洋李华玲; 关键词：人脐带间充质干细胞外泌体 NAMPT 人皮肤成纤维细胞秀丽隐杆线虫

miR-155体外特异性靶向鸡内源性反转录病毒ALVE1 env转录物的研究被引量：2: 2016年; 通过生物信息学方法,发现了鸡内源性反转录病毒禽白血病E1(ALVE1)的env转录物存在gga-miR-155作用位点(AGCATTA),并在体外验证其靶位点的活性。将鸡胚成纤维细胞(CEF)基因组中扩增的ALVE1 env转录物构建至荧光素酶报告载体pmir GLO,获得重组质粒pmirGLO-ALVE1-ENV-WT(野生型),并利用重叠PCR将其miR-155作用位点AGCATTA突变为ATTCAAA,然后构建重组质粒pmir GLO-ALVE1-ENV-MU(突变型),同时将gga-miR-155前体序列构建至pc DNA3.1载体,获得重组质粒pc DNA3.1-gga-miR-155,将这些质粒共转染至DF-1细胞中,48 h后收集细胞并检测荧光素酶活性。结果发现:野生组能显著下调pmir GLO-ALVE1-ENV-WT荧光素酶活性,而对照组无显著改变;对照组和突变组均未能改变pmir GLO-ALVE1-ENV-MU荧光素酶活性。本研究证实gga-miR-155可直接靶向ALVE1 env转录物,为鸡内源性反转录病毒的调控机制提供了新的启示。; 朱文奇胡序明陈世豪刘洋洋孙振耿拓宇宋成义高波崔恒宓; 关键词：MIR-155 靶位点 ENV

禽内源性反转录病毒ALVE1LTR转录水平分析被引量：4: 2015年; 本研究以禽内源性反转录病毒ALVE1为研究对象,分析了ALVE1长末端重复序列(long terminal repeat,LTR)自身转录的变化规律。荧光定量PCR结果显示LTR在2日龄SPF鸡(发育早期)器官组织中转录水平高,而在35日龄SPF鸡(发育晚期)器官组织中转录水平低。焦磷酸测序和荧光定量PCR关联分析发现,ALVE1 LTR在鸡巨噬细胞系HD11和鸡T淋巴细胞系MSB1细胞中的转录水平可能受DNA甲基化调控,去甲基化处理HD11或MSB1 24 h后,LTR转录水平显著增加。通过序列分析发现ALVE1 LTR高度保守且存在先天性免疫应答激活转录因子如NF-AT、c-JUN等。本研究揭示了ALVE1 LTR自身转录的变化规律,为进一步分析ALVE1 LTR功能奠定了基础。; 胡序明朱文奇陈世豪刘洋洋孙振耿拓宇宋成义高波秦爱建崔恒宓; 关键词：长末端重复序列 DNA甲基化表观遗传学

DNA甲基化分析中重亚硫酸盐处理DNA转化效率的评估方法被引量：1: 2015年; 为建立一种评估重亚硫酸盐处理DNA样本后胞嘧啶转化效率的有效方法,以两组不同的Taq Man q PCR检测梯度稀释的重亚硫酸盐处理和未处理的DNA标准品,建立转化与未转化的DNA Ct值以及对应的DNA拷贝数的标准曲线。使用相同的探针定量检测重亚硫酸盐处理后的DNA样本评估转化效率。结果显示该方法应用两组探针,根据相应的标准曲线,精确评估样本经重亚硫酸盐处理的转化效率。使用已知转化和未转化拷贝数的混合DNA作为模板,证实了该方法的可靠性。同时也对不同重亚硫酸盐试剂盒处理DNA的转化效率进行了评估,结果显示,该方法能够有效地评估DNA样品重亚硫酸盐的转化效率,为DNA甲基化准确分析提供了可靠快捷的方法。; 刘洋洋崔恒宓; 关键词：DNA甲基化 TAQMAN 转化率

CRISPR/Cas9系统介导的早期斑马鱼lncRNA的沉默: 长链非编码RNA(Long non-coding RNA,lncRNA)是长度大于200个核苷酸的非编码RNA.研究表明,lncRNA在剂量补偿效应(Dosage compensationeffect)、表观遗传调控、细...; 田净净杨哲刘菲菲杨祎擎刘洋洋韩笑吕贝宋成义高波崔恒宓; 关键词：斑马鱼肿瘤

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刘洋洋