李伟
- 作品数：13 被引量：18H指数：3
- 供职机构：贵州省人民医院更多>>
- 发文基金：博士科研启动基金贵州省优秀科技教育人才省长资金项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 一种近平滑念珠菌与MAF-1A抗菌关联性的测定方法
- 本发明公开了一种近平滑念珠菌与MAF‑1A抗菌关联性的测定方法，包括以下步骤：S1：菌株培养，将菌株取出并培养复苏；S2：多肽合成，合成MAF‑1A并将肽溶解保存；S3：MIC测定及时间‑杀菌曲线绘制；S4：提取RNA，...
- 罗振华张湘燕李伟刘琳李红凌胡方芳成荣许强
- 文献传递
- 激活TLR5和NLRC4通路的重组鞭毛素蛋白对4T1乳腺癌细胞及荷瘤小鼠的影响被引量：2
- 2019年
- 目的:激活TLR5和NLRC4通路的重组鞭毛素蛋白对4T1乳腺癌细胞及荷瘤小鼠的影响。方法:表达和纯化重组鞭毛素蛋白即全长鞭毛素蛋白FliC(同时激活TLR5和NLRC4两条通路)、FliCΔ90-97(不能激活TLR5通路)、FliC-L3A(不能激活NLRC4通路)和FliCΔ90-97:L3A(两条通路都不激活)。ELISA实验检测IL-8和IL-1β验证重组鞭毛素蛋白激活TLR5和NLRC4通路的生物学活性。MTT法检测鞭毛素蛋白对4T1乳腺癌细胞的抑制作用。用4T1乳腺癌细胞建立BALB/c小鼠乳腺癌肿瘤模型,分别腹腔注射鞭毛素蛋白或生理盐水,并定期记录小鼠肿瘤大小、体重变化。结果:重组鞭毛素蛋白能够激活相应的信号通路,具有正常生物学活性。不同重组鞭毛素蛋白对4T1细胞均有抑制作用,且与阴性对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),各重组鞭毛素蛋白对4T1的抑制作用无显著差异。体内实验:FliC处理组的小鼠前3周平均体重显著下降,FliCΔ90-97:L3A组、FliCΔ90-97组和FliC-L3A组体重在整个实验期间有不同程度的增加;FliCΔ90-97对小鼠肿瘤生长没有明显抑制作用,但FliC-L3A、FliCΔ90-97:L3A和FliC都能够显著抑制肿瘤的增殖。结论:重组鞭毛素蛋白体外抑制乳腺癌4T1细胞增殖与TLR5和NLRC4通路的激活无关,体内NLRC4通路的激活减弱了鞭毛素蛋白抑制肿瘤增殖的能力,TLR5通路的激活并不能显著增强鞭毛素蛋白的抗肿瘤免疫应答。
- 张景李荣辉罗力卓召振袁军李伟
- 关键词：乳腺癌
- 激活TLR5和NLRC4通路对小鼠先天免疫细胞的影响被引量：4
- 2016年
- 目的:探讨用重组鞭毛素蛋白同时或者分别激活C57BL/6小鼠模型TLR5和NLRC4通路对小鼠先天免疫细胞的影响。方法:首先,表达和纯化重组鞭毛素蛋白即全长鞭毛素蛋白FliC(同时激活TLR5和NLRC4两条通路);FliCΔ90-97(不能激活TLR5通路);FliC-L3A(不能激活NLRC4通路);FliCΔ90-97:L3A(两条通路都不激活)。将小鼠分为5组,分别为:PBS组、FliC组、FliC-L3A组、FliCΔ90-97和FliCΔ90-97:L3A组。分别用PBS和10μg重组鞭毛素蛋白腹腔注射C57BL/6小鼠,每组3只。12 h后收集腹腔灌洗液,流式抗体染色检测腹腔灌洗液中的中性粒细胞和NK细胞的比例。同时,取小鼠脾脏制成脾细胞悬液,流式抗体染色检测DC表面共刺激分子CD80和CD86的表达情况及脾细胞中调节性T细胞(Treg)的比例。结果:激活TLR5(FliC组和FliC-L3A组)和NLRC4通路(FliCΔ90-97组)小鼠的腹腔灌洗液中中性粒细胞和NK细胞的比例都显著高于PBS组和FliCΔ90-97:L3A组(P<0.01)。激活TLR5通路的FliC组和FliC-L3A组的DC表面CD80和CD86表达水平显著高于PBS组、FliCΔ90-97和FliCΔ90-97:L3A组(P<0.01)。FliC-L3A组调节性T细胞的比例高于其他组(P<0.05)。结论:激活TLR5和NLRC4通路可以趋化中性粒细胞、NK细胞,两条通路激活对中性粒、NK细胞有相同的趋化能力。鞭毛素蛋白只有激活TLR5通路才可以上调DCs表面共刺激分子CD80和CD86,促进DCs的成熟。
- 卓召振李伟袁军
- 关键词：DC调节性T细胞
- 不同抗原诱导后小鼠调节性T淋巴细胞趋化特性动态研究被引量：1
- 2015年
- 目的:了解不同抗原诱导下调节性T淋巴细胞表面趋化因子受体表达的情况及在趋化因子CCL20、CCL22引导下T淋巴细胞的趋化行为。方法:用C57BL/6小鼠皮肤抗原、卡介苗或生理盐水诱导BALB/c小鼠,于诱导后1、2、3及4周,用流式检测两组小鼠脾脏单个核细胞悬液中CD4+CD25-T、CD4+CD25+CD127-T细胞表面趋化因子受体CCR4和CCR6表达的动态变化,并用趋化试验观察CCL20、CCL22作用下各CD4+T细胞亚型的趋化特性。结果:1皮肤抗原诱导组CD4+CD25-T细胞表面CCR4表达平均荧光强度在第4周时显著高于第3周,卡介苗诱导组趋化因子受体表达无显著变化;皮肤抗原诱导组CD4+CD25+CD127-T细胞表面CCR4表达平均荧光强度在第4周时最高(P<0.05),卡介苗诱导组趋化因子受体表达无显著变化。2皮肤抗原诱导组CD4+CD25-T细胞表面CCR6表达的平均荧光强度在第2周最高(P<0.05),卡介苗诱导组是第4周最高(P<0.05);皮肤抗原诱导组CD4+CD25+CD127-T细胞表面CCR6表达的平均荧光强度前两周显著高于第3周、第4周(P<0.05),在卡介苗诱导组第2周及第4周比第1周高(P<0.05)。3CCL20趋化下CD4+CD25+CD127-T细胞的趋化指数在卡介苗诱导4周时较高(P<0.05),皮肤抗原诱导2周和4周时升高(P<0.05);CCL22趋化下,卡介苗诱导组与皮肤抗原诱导组CD4+CD25+CD127-T细胞的趋化指数变化均无统计学意义。结论:1提示Treg表面趋化因子受体的表达与抗原性质有关。2诱导早期CCL22对Treg细胞的趋化作用明显,诱导后期CCL20作用明显。
- 郭音李伟叶艾竹安宇骆姝琳刘水和袁军
- 关键词：抗原诱导调节性T细胞趋化因子趋化因子受体
- 激活TLR5和NLRC4通路的重组鞭毛素蛋白对不同乳腺癌细胞系增殖的抑制作用被引量：1
- 2017年
- 目的:探究激活TLR5和NLRC4通路的重组鞭毛素蛋白对不同乳腺癌细胞系增殖的抑制作用。方法:表达和纯化重组鞭毛素蛋白即全长鞭毛素蛋白Fli C(同时激活TLR5和NLRC4两条通路)、Fli CΔ90-97(不能激活TLR5通路)、Fli C-L3A(不能激活NLRC4通路)和Fli CΔ90-97:L3A(两条通路都不激活)。用不同浓度的重组鞭毛素蛋白刺激MCF-7细胞和MDA-MB-231细胞,72 h后,利用CCK8法检测其对肿瘤细胞增殖的影响,并计算抑制率。软琼脂形成实验:每孔细胞数为1 000个MCF-7细胞铺于6孔板中,重组鞭毛素蛋白浓度为1μg/ml,培养14 d后,结晶紫染色,显微镜下计数克隆数,计算克隆形成率。结果:四种鞭毛素蛋白在0.1μg/ml的浓度刺激下,对MCF-7细胞的抑制率达到30%,Fli CΔ90-97对MCF-7的抑制作用是剂量依赖的。在1μg/ml时单独激活TLR5的Fli C-L3A鞭毛素蛋白的抑制率高于全长的Fli C和单独激活NLRC4的Fli CΔ90-97。Fli CΔ90-97:L3A也对MCF-7细胞有抑制作用。四种鞭毛素蛋白对MDA-MB-231细胞在加转染试剂之后才表现出抑制效应。结论:鞭毛素蛋白可以抑制乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231细胞的增殖,其机制可能是由于分别激活胞膜和胞内的除TLR5和NLRC4以外的其他通路。
- 李伟卓召振李荣辉袁军
- 关键词：乳腺癌细胞
- 一种实验室用家蝇饲养装置
- 本实用新型公开了一种实验室用家蝇饲养装置，主要包括主体、照明装置、透气孔、操作孔、滤网、底座、悬垂条、饲料盆、支架、纱网、海绵垫、水盆、把手、挡板，照明装置安装于主体顶部中心处，透气孔均匀分布于主体前后左右四个侧面的上下...
- 罗振华李伟陈辉聂瑛洁成荣吴建伟杨斌许强
- 文献传递
- 一种近平滑念珠菌与MAF-1A抗菌关联性的测定方法
- 本发明公开了一种近平滑念珠菌与MAF‑1A抗菌关联性的测定方法，包括以下步骤：S1：菌株培养，将菌株取出并培养复苏；S2：多肽合成，合成MAF‑1A并将肽溶解保存；S3：MIC测定及时间‑杀菌曲线绘制；S4：提取RNA，...
- 罗振华张湘燕李伟刘琳李红凌胡方芳成荣许强
- 贵州地区273对习惯性流产夫妇的染色体异常分析被引量：1
- 2015年
- 目的:探讨染色体异常与贵州地区习惯性流产的关系。方法:采集就诊于贵州省某3级甲等医院的237对习惯性流产夫妇外周血,进行淋巴细胞培养,G显带,染色体核型分析。结果:273对(546例)习惯性流产的夫妇中异常染色体的检出率为8.60%(47/546),其中染色体平衡易位7例、罗伯逊易位3例及多态性变异37例,总异常率分别为14.89%(7/47)、6.38%(3/47)及78.73%(37/47);多态性变异中包括16例Y染色体异染色质增长;6例1号、9号、16号染色体次缢痕增长,15例D组和G组短臂随体变异。结论:染色体异常是引起贵州地区习惯性流产的重要病因之一,有必要对有习惯性流产史的夫妇双方进行异常染色体分析。
- 骆姝琳袁军安宇陈琨任淩雁令狐克燕李伟张春林
- 关键词：细胞遗传学分析染色体核型
- 不同乳腺癌细胞系中TLR5和NLRC4受体的表达和定位被引量：3
- 2016年
- 目的:探究TLR5和NLRC4受体在不同乳腺癌细胞系MDA-MB-231、MCF-7和MDA-MB-435中的表达和定位情况,并探讨重组鞭毛素蛋白对乳腺癌细胞TLR5受体的激活情况。方法:利用Real-time PCR法检测MDA-MB-231、MCF-7和MDA-MB-435细胞TLR5和NLRC4 mRNA表达水平,用流式细胞仪检测MDA-MB-231、MCF-7细胞TLR5受体的表达和定位。纯化重组鞭毛素蛋白即全长鞭毛素蛋白Fli C(同时激活TLR5和NLRC4两条通路)、Fli CΔ90-97(不能激活TLR5通路)、FliCL3A(不能激活NLRC4通路)、Fli CΔ90-97:L3A(两条通路都不激活)。用1μg/ml重组鞭毛素蛋白刺激MCF-7细胞,12 h后,ELISA法检测IL-8的分泌。结果:MCF-7细胞TLR5 mRNA表达水平最高,约是MDA-MB-435细胞的1 700倍,MDA-MB-231细胞TLR5表达水平是MDA-MB-435的约200倍。TLR5在MCF-7细胞浆和胞膜上均有表达,而MDA-MB-231细胞只在胞浆中表达。激活TLR5通路的Fli C和Fli C-L3A能够刺激MCF-7细胞分泌IL-8,而不激活TLR5通路的Fli CΔ90-97和Fli CΔ90-97:L3A则不能。结论:不同乳腺癌细胞系都表达TLR5和NLRC4,但是表达部位和表达水平不同。MCF-7细胞TLR5和NLRC4表达高于其他乳腺癌细胞系。乳腺癌细胞系表面的TLR5受体可以被鞭毛素蛋白激活,为进一步探讨TLR5通路的激活在乳腺癌细胞增殖中的作用提供实验基础。
- 李伟卓召振骆姝琳任凌雁陈琨刘水和袁军
- 关键词：乳腺癌细胞系
- 趋化因子CCL22和CCL20协同皮肤抗原诱导的调节性T淋巴细胞对皮肤移植的影响被引量：3
- 2016年
- 目的:研究小鼠皮肤移植模型中趋化因子CCL20和CCL22联合调节性T细胞对移植皮肤存活时间的影响。方法:将皮肤移植小鼠分为四组,每组3只小鼠,分别为Treg组、Treg+CCL20组、Treg+CCL22组与对照组。其中Treg细胞经同种异体皮肤抗原诱导。以C57BL/6小鼠为同种异体供体,BALB/c小鼠为受体行皮肤移植手术。进行皮肤移植后立即于异体皮下注射Treg细胞2×105个细胞/鼠,体积为200μl。以后每日于异体皮下注射趋化因子CCL20或CCL22,共连续注射10d,观察并记录皮肤的存活情况。Treg细胞定植实验:首先利用磁珠分选方法分离皮肤抗原诱导Treg细胞,并利用锝99标记分离到的Treg细胞;皮下注射3 h后,处死小鼠,用GC-2016γ放射免疫计数器检测各脏器及移植皮肤的放射性活度。结果:1经Treg进行干预的小鼠,其异体皮肤存活时间均显著长于手术对照组(P<0.05),而且同种异体抗原诱导Treg在趋化因子CCL20或CCL22存在下异体皮肤存活时间显著高于单纯使用Treg组和对照组(P<0.001)。2注射皮肤抗原诱导的Treg细胞后,自体和异体皮肤移植组Treg细胞主要分布在自体和异体皮肤,分别占注射Treg组细胞的60%和98%;加趋化因子CCL20组和CCL22组的Treg主要分布在肝脏。结论:趋化因子CCL20和CCL22能够协同促进经皮肤抗原诱导的Treg细胞延长异体皮肤的存活时间,这种作用效果可能与趋化因子CCL20和CCL22趋化Treg细胞向肝脏大量定植相关。
- 李伟宋云叶艾竹安宇骆姝琳刘水和袁军
- 关键词：TREG皮肤移植CCL20
