黄秋
- 作品数：8 被引量：33H指数：3
- 供职机构：重庆医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 焦脱镁叶绿酸-a甲酯介导的光动力疗法诱导人骨肉瘤MG63细胞凋亡的研究被引量：3
- 2016年
- 目的探讨焦脱镁叶绿酸-a甲酯(pyropheophorbide-a methyl ester,MPPa)介导的光动力疗法(photodynamic therapy,PDT)对人骨肉瘤MG63细胞凋亡的影响及其作用机制。方法取对数生长期人骨肉瘤MG63细胞分为4组,分别为空白对照组(对照组)、单纯MPPa药物组(MPPa组)、单纯光照组(LED组)以及MPPa-PDT实验组(MPPa-PDT组)。MPPa-PDT组和MPPa组于避光条件下加入MPPa(0.75μmol/L),对照组及LED组加入等量完全培养基;避光孵育20 h后,LED组及MPPa-PDT组细胞接受集成LED特种光源照射120 s(剂量为4.8 J/cm2)。光照结束后,于避光条件下继续培养,倒置相差显微镜观察细胞形态变化,透射电镜观察内质网形态变化,Hoechst33258染色观察细胞凋亡,流式细胞术检测细胞凋亡率及细胞内钙离子水平,Western blot检测p-PERK、内质网源性转录因子(C/EBP homologous protein,CHOP)、活化半胱氨酸蛋白酶12(cleavedCaspase-12)表达水平。结果 MPPa-PDT组倒置相差显微镜下见细胞明显回缩变圆;Hoechst33258染色示细胞核固缩、碎裂等典型凋亡形态学改变;流式细胞术检测细胞凋亡率为48.76%±3.54%,明显高于对照组5.04%±0.41%、MPPa组5.33%±0.38%及LED组6.48%±0.46%(P<0.05);细胞内钙离子水平为485.29±58.77,显著高于对照组(97.24±4.77)、MPPa组(97.95±6.30)、LED组(101.17±5.26)(P<0.05);透射电镜下见细胞内质网明显肿胀;Western blot检测示p-PERK、CHOP、cleaved-Caspase-12相对表达量分别于培养1、3、6 h后明显高于其他3组(P<0.05)。对照组、MPPa组及LED组细胞无显著凋亡形态改变和内质网形态改变,上述检测指标组间比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 MPPa-PDT可诱导人骨肉瘤MG63细胞发生凋亡,且内质网应激通路参与了MPPa-PDT诱导细胞凋亡的过程。
- 陶勇黄秋欧云生尹航陈艳阳涂平华
- 关键词：光动力疗法骨肉瘤细胞凋亡
- 雷公藤红素通过内质网应激相关通路促进人骨肉瘤HOS细胞凋亡被引量：4
- 2017年
- 目的:观察雷公藤红素对人骨肉瘤HOS细胞凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制。方法 :用不同浓度(0、1.5、2.5、3.5和4.5μmol/L)的雷公藤红素处理骨肉瘤HOS细胞24 h后,采用CCK-8法检测细胞活性,确定最佳实验浓度。采用倒置相差显微镜观察细胞形态变化,Hoechst33258染色后相差显微镜观察细胞凋亡的形态学改变,FCM法检测细胞凋亡率和细胞内Ca2+浓度变化,蛋白质印迹法检测结合免疫球蛋白(binding immunoglobulin protein,BIP)、钙联蛋白(calnexin,CNX)、内质网氧化还原酶1-Lα(endoplasmic reticulum oxidoreductin 1-L alpha,Ero1-Lα)、蛋白质二硫键异构酶(protein disulfide isomerase,PDI)、肌醇依赖酶1(αinositol-requiring enzyme 1 alpha,IRE1α)、蛋白激酶样内质网激酶(protein kinase-like endoplasmic reticulum kinase,PERK)和磷酸化PERK(phosphorylatedPERK,p-PERK)、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CCAAT/enhancerbinding protein homologous protein,CHOP)、剪切型caspase-12(cleavedcaspase-12,c-caspase-12)和c-caspase-3的表达变化。结果 :不同浓度的雷公藤红素均可抑制HOS细胞活性(P值均<0.05),且呈浓度依赖性。3μmol/L雷公藤红素处理24 h后,HOS细胞形态明显萎缩、紊乱,漂浮细胞增多,且出现明显核固缩和核碎裂等典型的细胞凋亡形态学改变。与未处理对照组相比,3μmol/L雷公藤红素处理24 h后细胞凋亡率和细胞内Ca2+浓度明显升高(P值均<0.05)。3μmol/L雷公藤红素处理24 h后,内质网应激相关标志蛋白BIP、CNX、Ero1-Lα、PDI、IRE1α和p-PERK以及内质网应激介导凋亡相关蛋白CHOP、c-caspase-12和c-caspase-3的表达水平明显升高(P值均<0.05)。结论 :雷公藤红素可诱导人骨肉瘤HOS细胞凋亡,其作用机制可能与内质网应激介导细胞凋亡通路有关。
- 陈艳阳欧云生陶勇尹航黄秋钟申熹李剑箫
- 关键词：骨肉瘤内质网应激细胞凋亡雷公藤红素
- 纤维羧甲基醚联合明胶海绵在腰椎后路手术中止血效果的临床观察被引量：3
- 2015年
- 目的观察局部应用止血材料纤维羧甲基醚联合明胶海绵对腰椎后路减压融合术术中椎管内出血及术后引流量的影响。方法笔者选取2014年3月-2014年6月行腰椎后路减压融合术的88例患者,纤维羧甲基醚联合明胶海绵组（F＋G组）45例[男性20例,女性25例;年龄27-71岁,平均（53.68±14.39）岁],明胶海绵组（G组）43例[男性19例,女性24例;年龄31-69岁,平均（51.25±13.87）岁],观察记录两组术中椎管内出血量及术后24、48、72h及拔管当天引流量,并观察术后伤口渗血渗液、感染、愈合及术后住院时间,对以上指标进行统计学分析。结果纳入研究患者经手术治疗后均好转出院,F＋G组与G组术中椎管内出血量及术后24、48、72h、拔管当天总引流量均具有统计学差异（P〈0.05）;术后伤口渗血渗液、切口表浅感染、切口愈合及住院时间显示无明显差异（P〉0.05）。结论局部应用纤维羧甲基醚联合明胶海绵在腰椎后路融合手术中具有良好的止血效果,可减少椎管内出血及术后切口引流量。
- 邓乾兴欧云生刘渤朱勇蒋电明黄秋吴鹏
- 关键词：腰椎减压术止血
- MPPa-PDT诱导人骨巨细胞瘤细胞自噬被引量：4
- 2015年
- 目的探讨焦脱镁叶绿酸-a甲酯介导的光动力疗法(MPPa-PDT)对人骨巨细胞瘤SGC-0404细胞自噬的影响,研究自噬与凋亡的关系。方法 SGC-0404细胞经MPPa-PDT处理后采用Hochest33258染色观察细胞凋亡,DCFH-DA荧光探针检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,单丹磺酰戊二胺(MDC)染色和透射电镜观察细胞内自噬体的形成,Western blot检测LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ和Beclin-1蛋白的表达水平,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果 MPPa-PDT处理SGC-0404细胞以后,Hochest33258染色可观察到细胞核固缩、核碎裂等典型凋亡形态学改变;DCFH-DA染色结果显示MPPa-PDT组细胞内ROS水平分别是对照组、MPPa药物组、LED光照组的21.07、18.68倍和19.66倍(P<0.05);MDC染色及透射电镜下可见细胞内有典型自噬体形成;Western blot检测结果则显示LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ和Beclin-1蛋白的表达明显高于各对照组(P<0.05);流式细胞仪检测发现经3-MA抑制自噬后MPPa-PDT所致的细胞凋亡率明显升高[(27.69±2.23)%vs(43.17±2.87)%,P<0.05]。结论MPPa-PDT能诱导SGC-0404细胞发生凋亡与自噬;自噬在MPPa-PDT作用的早期可以延缓凋亡的发生,具有抗凋亡的保护作用。
- 黄秋涂平华欧云生刘渤陶勇尹航
- 关键词：光动力疗法骨巨细胞瘤自噬
- 芦荟大黄素介导的光动力疗法通过ROS-JNK通路诱导人骨肉瘤MG63细胞
- 目的：探讨芦荟大黄素(AE)介导的光动力疗法(AE-PDT)对人骨肉瘤MG63细胞活性的影响及其机制。方法：AE-PDT作用于人骨肉瘤MG63细胞后,采用CCK-8法检测细胞活性的变化,DCFH-DA染色流式细胞术检测细...
- 涂平华黄秋欧云生李开庭陶勇尹航赵增辉
- 关键词：芦荟大黄素光动力骨肉瘤
- 经椎间孔单节段腰椎椎间融合术后融合器下沉的危险因素分析被引量：19
- 2018年
- 目的 探讨单节段经椎间孔腰椎椎间融合术（transforaminal lumbar interbody fusion,TLIF）术后融合器下沉对临床疗效的影响及其危险因素。方法 回顾性分析2011年5月至2014年5月采用聚醚醚酮（polyetheretherketone,PEEK）椎间融合器行TLIF手术的患者,于X线片上测量术前及术后各随访时点的手术节段椎间隙高度、节段性前凸角。根据手术节段椎间隙高度在随访期间的丢失值将患者分为融合器下沉组（≥2 mm）与融合器未下沉组（〈2 mm）。采用Oswestry功能障碍指数（Oswestry disability index,ODI）、腰腿痛视觉模拟评分（visual analogue scale,VAS）评价临床疗效。对可能影响融合器下沉的因素如年龄、性别、椎间隙高度、节段性前凸角等进行单因素与Logistic回归分析。结果 36例发生融合器下沉,发生率33.6%（36/107）。融合器下沉组36例,男15例,女21例,平均年龄（52.61±13.82）岁,平均随访（26.33±7.66）个月;融合器未下沉组71例,男28例,女43例,平均年龄（53.80±14.94）岁,平均随访（23.82±8.95）个月。两组患者性别、年龄、疾病病程、随访时间等基本资料的差异无统计学意义。融合器下沉组下沉2.02~5.53 mm,平均（2.79±0.78） mm。单因素分析结果为术前椎间隙高度、术后椎间隙高度、术后节段性前凸角与融合器下沉有关;Logistic回归分析结果为术后椎间隙高度为融合器下沉的危险因素[OR=1.864,95%CI为（1.207,2.879） mm]。术前及术后各随访时点融合器下沉组与融合器未下沉组VAS评分及ODI的差异均无统计学意义。结论 融合器下沉受术前手术节段椎间隙高度、术后节段椎间隙高度、术后节段性前凸角的影响,其中术后节段椎间隙高度是独立危险因素,椎间隙过度撑开可增加融合器下沉风险。
- 邓乾兴欧云生朱勇赵增辉黄秋
- 关键词：脊柱融合术
- MPPa介导的光动力疗法诱导人骨肉瘤MG63细胞自噬和凋亡的实验研究
- 目的：探讨焦脱镁叶绿酸-a甲酯(MPPa)介导的光动力疗法(MPPa-PDT)对人骨肉瘤MG63细胞活性的影响及其机制。
- 黄秋欧云生
- 关键词：光动力骨肉瘤自噬凋亡
- MPPa-PDT抑制骨肉瘤MG-63细胞侵袭和迁移被引量：1
- 2017年
- 目的:探讨焦脱镁叶绿酸-a甲酯介导的光动力疗法(methyl ester pyropheophorbide-a mediated photodynamic therapy,MPPa-PDT)对人骨肉瘤MG-63细胞迁移及侵袭的影响及其可能机制。方法:采用CCK-8检测经MPPa-PDT处理后不同时间点的人骨肉瘤MG-63细胞增殖活性;划痕实验及Transwell实验检测细胞迁移、侵袭能力;Western blotting检测E-钙黏蛋白(E-cad)和基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-2、-9蛋白的表达水平。结果:MPPa-PDT处理MG-63细胞12、24及48 h后MPPa-PDT组细胞增殖能力明显较对照组、MPPa组和LED组细胞降低(均P<0.05),且MPPa-PDT组细胞的划痕愈合能力、迁移活力及侵袭能力也较这3组细胞显著下降(均P<0.05);MPPa-PDT组细胞E-cad的表达显著高于其他3组,MMP-2、MMP-9的表达则明显低于其他3组(均P<0.05)。结论:MPPa-PDT抑制人骨肉瘤MG-63细胞的侵袭和迁移能力;上调E-cad的表达,下调MMP-2、-9的表达可能是其作用机制之一。
- 尹航陶勇欧云生黄秋陈艳阳
- 关键词：光动力疗法骨肉瘤迁移
