王玉梁
- 作品数：5 被引量：8H指数：2
- 供职机构：武警后勤学院附属医院更多>>
- 发文基金：天津市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
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- 胶质瘤细胞H4中与多梳蛋白NSPc1相互作用的长链非编码RNA的鉴定被引量：1
- 2017年
- 【目的】鉴定胶质瘤H4细胞系中与多梳家族(polycomb group)蛋白NSPc1可能相互作用的长链非编码RNA(long noncoding RNA,lnc RNA)。【方法】在胶质瘤H4细胞系中,利用RNA结合蛋白免疫共沉淀RIP(RNA binding protein immunoprecipitation,IP)技术联合实时定量PCR技术在生物信息学预测与NSPc1蛋白结合评分较高的候选lnc RNAs中验证相互作用的lnc RNAs。【结果】鉴定出MALAT1、MEG3和SOX2OT可能与NSPc1蛋白相互作用。【结论】胶质瘤细胞中多梳蛋白NSPc1可能通过与lnc RNAs相互作用参与着肿瘤的发生发展、迁移、侵袭甚至肿瘤干细胞干性的维持。
- 王玉梁梁之孔李辉林彦琛正午龚燕华
- 关键词：胶质瘤NSPC1长链非编码RNA
- NRP-1在胶质瘤细胞系中表达水平及亚细胞定位的鉴定被引量：1
- 2016年
- 【目的】检测不同胶质瘤细胞系中神经纤毛蛋白1(neuropilin-1,NRP-1)的表达水平及亚细胞定位。【方法】传代培养人U87、U251、H4及大鼠C6胶质瘤细胞系,以人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)为阳性对照、正常大鼠脑组织为阴性对照,采用RT-PCR、Western-blotting及细胞免疫荧光技术三种检测手段从信使RNA及蛋白层面分析NRP-1在四种胶质瘤细胞系中的表达及定位。【结果】四种胶质瘤细胞系(U87、U251、H4及C6)中均有NRP-1的阳性表达,且表达水平均明显高于正常大鼠脑组织(P<0.05);恶性程度最高的U87的NRP-1表达水平明显高于恶性程度较低的U251及H4(P<0.05);而U251及H4之间NRP-1的表达水平无明显差异(P>0.05);细胞免疫荧光结果显示NRP-1在四种胶质瘤细胞系中均有表达,且亚细胞定位主要分布于胞膜及胞质中。【结论】本实验确定了NRP-1在U87、U251、H4及C6胶质瘤细胞系中表达水平及亚细胞定位,为今后进一步将NRP-1应用于胶质瘤鉴别诊断与分级诊断奠定了理论基础。
- 单煜恒孙佳王玉梁梁之孔龚燕华钟士江
- 关键词：胶质瘤神经纤毛蛋白-1亚细胞定位
- 肌细胞增强因子2c启动子的克隆与活性鉴定
- 2015年
- 【目的】克隆小鼠肌细胞增强因子2c(Myocyte enhancer factor 2c,Mef2c)的近端启动子,并检测启动子的活性。【方法】提取小鼠畸胎瘤P19细胞基因组DNA,用RT-PCR方法扩增Mef2c近端启动子片段(-1 130/+200),分别构建3个长度不同的Mef2c荧光素酶报告基因载体(约1.3 kb/0.8 kb/0.4 kb),双酶切鉴定所扩增的DNA序列,阳性质粒转染P19细胞,运用DualLuciferase®Reporter Assay System来检测启动子的活性,初步比较分析启动子片段间的活性差异。【结果】小鼠肌细胞增强因子Mef2c近端的启动子克隆成功,并构建了3段不同长度的启动子荧光素酶报告基因载体,双荧光素酶报告基因实验提示Mef2c近端启动子中的3段不同长度的启动子活性不一致。【结论】成功克隆肌细胞增强因子Mef2c的近端启动子并鉴定了相关活性,为进一步研究各种反式因子对Mef2c近端启动子的转录活性调节奠定了基础。
- 正午李辉梁之孔王玉梁龚燕华孙奕
- 关键词：荧光素酶报告基因基因转录活性
- 神经纤毛蛋白-1靶向性分子探针的构建及体外显像脑胶质瘤细胞的研究被引量：4
- 2016年
- 目的：合成以超小超顺磁性氧化铁颗粒（ ultrasmall superparamagnetic iron oxide， USPIO）为核心、tLyP-1（ CGNKRTR）为配体的新型磁共振分子探针USPIOPEGtLyP-1并检测其对神经纤毛蛋白-1（ Neuropilin-1，NRP-1）高表达的脑胶质瘤细胞的成像能力。方法利用碳二亚胺法将USPIOPEG同多肽tLyP-1偶联得到USPIOPEGtLyP-1，通过免疫印迹法检测不同脑胶质瘤细胞系中NRP-1的表达水平，利用噻唑蓝比色法检测分子探针的细胞毒性，利用普鲁士蓝染色、透射电镜及体外磁共振成像检测USPIOPEG及USPIOPEGtLyP-1同NRP-1高表达的脑胶质瘤细胞的结合能力。结果合成了水合粒径为43．84 nm的分子探针USPIOPEGtLyP-1，噻唑蓝比色法证实这种分子探针在有效浓度下（50μg Fe／ml）对细胞存活无显著影响（P＞0．05）。选择NRP-1表达水平最高的U87脑胶质瘤细胞作为实验对象（P＜0．01）。普鲁士蓝染色结果显示在相同浓度及时间的条件下，USPIOPEGtLyP-1组的蓝染颗粒较USPIOPEG组更多、更明显。透射电镜结果显示USPIOPEGtLyP-1同U87细胞结合后主要分布于溶酶体、内质网及线粒体中。磁共振成像结果显示在相同浓度下，USPIOPEGtLyP-1组细胞的SI值下降水平均明显高于USPIOPEG组细胞（P＜0．01）。结论 tLyP-1的修饰大大提高了USPIOPEG同脑胶质瘤细胞的结合能力，并且显著增加了磁共振下的阴性对比效果，为新型磁共振分子探针USPIOPEGtLyP-1的体外实验及今后的临床应用奠定了基础。
- 单煜恒梁之孔林彦琛代丽丽王玉梁龚燕华钟士江
- 关键词：脑胶质瘤神经纤毛蛋白-1分子探针NEUROPILIN-1
- 长链非编码RNA与多梳家族蛋白在神经胶质瘤中相互作用的研究进展被引量：3
- 2017年
- 多梳家族(polycomb group,Pc G)蛋白是一组在染色质水平调控靶基因的转录抑制因子,在胚胎发育、细胞周期、细胞增殖及肿瘤形成过程中起着非常重要的作用。长链非编码RNA(long noncoding RNA,lnc RNA)可以通过募集染色质修饰复合物(如多梳家族蛋白复合体)给非特异的酶活性提供了一种基因特异的靶向机制,靶向蛋白至特异的染色质位点发挥转录抑制效用。本文就lnc RNAs与Pc G蛋白相互作用在神经胶质瘤的进展进行综述,有助于理解神经胶质瘤治疗的基因靶点。
- 梁之孔王玉梁李辉孙奕龚燕华
- 关键词：长链非编码RNA神经胶质瘤
