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嗜水气单胞菌群体感应信号分子AI-2的细胞外生物合成及活性检测被引量：8: 2015年; 【目的】对嗜水气单胞菌群体感应信号分子AI-2进行细胞外生物合成及活性检测。【方法】对Lux S、MtnN-1、MtnN-2蛋白进行氨基酸序列分析、表达及纯化。以S-腺苷同型半胱氨酸(SAH)为底物,利用纯化的Lux S分别与MtnN-1及MtnN-2蛋白共同作用合成AI-2,并利用哈维氏弧菌报告菌株BB170检测AI-2活性。【结果】嗜水气单胞菌培养液上清中AI-2活性在8 h达到空白对照的16.96倍。氨基酸序列分析表明,嗜水气单胞菌与水生病原菌哈维式弧菌和迟钝爱德华氏Lux S一致性达到76%以上,MtnN-1与MtnN-2氨基酸序列一致性为26.37%,其中MtnN-2与哈维氏弧菌和迟钝爱德华氏菌Pfs一致性达到53%以上。成功表达及纯化了Lux S、MtnN-1和MtnN-2蛋白,细胞外Lux S和MtnN-1共同作用合成的AI-2活性是空白对照的45.04倍,Lux S和MtnN-2共同作用合成的AI-2活性是空白对照的63.62倍。【结论】嗜水气单胞菌能够合成信号分子AI-2。MtnN-1和MtnN-2氨基酸序列尽管存在较大差异,但两者均能与Lux S共同催化AI-2的细胞外生物合成。; 赵晶张福蓉崔一许永斌陈明权春善范圣第; 关键词：嗜水气单胞菌生物合成 LUXS

水产养殖复合微生物制剂中菌群数量的分析被引量：10: 2016年; 对3种市售水产养殖复合微生物制剂进行菌群数量检测,利用选择性计数培养基,采用平板计数法和MPN法,分别对3种微生物制剂中的不同菌群进行计数。结果表明,选择性计数培养基能对复合微生物制剂进行有效的菌群计数,初步确定3种水产养殖复合微生物制剂主要由放线菌、芽孢杆菌、乳酸菌、酵母菌、硝化细菌五大类菌群组成,制剂菌群种类和数量与标注有一定偏差,粉剂中有少量霉菌检出。本研究提供的选择性计数培养基及计数方法能够有效对市售复合微生物制剂产品中不同菌群进行计数,为评估同类产品的安全性和有效性奠定基础。; 韦成相雷奇张福蓉崔一郭婉萍栾春雨赵晶权春善; 关键词：水产养殖复合微生物制剂微生物菌群选择性计数

嗜水气单胞菌ATCC7966 luxS基因缺失株构建及特性研究被引量：5: 2016年; 目的研究群体感应信号分子AI-2合成酶编码基因luxS对嗜水气单胞菌ATCC 7966生理特性及毒力因子的影响。方法利用同源重组原理,构建含有中间为卡那霉素抗性基因,两侧为luxS基因上、下游同源序列片段的基因敲除质粒,将构建好的质粒转化大肠埃希氏菌SM 10(λpir)感受态细胞,利用接合法将质粒转入嗜水气单胞菌ATCC 7966,通过抗性筛选、PCR和DNA测序确认嗜水气单胞菌luxS基因缺失突变株。比较野生株ATCC 7966和luxS基因缺失突变株生长速度、AI-2合成、胞外蛋白酶合成及生物膜形成的差异。结果嗜水气单胞菌luxS基因缺失突变株ΔluxS构建成功。与野生株相比,突变株生长周期延长,基本丧失合成AI-2和胞外蛋白酶的能力;突变株生物膜形成能力降低,生长24h时生物膜形成能力为野生株的14.5%,36h时生物膜形成能力为野生株的60.0%,突变株生物膜形成速度明显比野生株缓慢,结构更为疏松。结论 luxS基因参与调控嗜水气单胞菌的生长、AI-2合成和毒力因子表达,本研究为进一步研究luxS基因在嗜水气单胞菌致病性中发挥的作用奠定基础。; 崔一赵晶张福蓉郭婉萍陈明权春善范圣第; 关键词：嗜水气单胞菌 LUXS 胞外蛋白酶生物膜

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崔一