陈春蓉
- 作品数:4 被引量:13H指数:3
- 供职机构:福建中医药大学药学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金福建省自然科学基金陈可冀中西医结合发展基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 巴戟天-牛膝醇提物对SD大鼠软骨细胞G_(1/S)周期蛋白与基因表达影响的实验研究被引量:3
- 2017年
- 目的:探究巴戟天-牛膝醇提物(M-AAE)对体外培养的SD大鼠软骨细胞G_(1/S)周期蛋白与m RNA含量表达的影响,为其防治骨关节炎的临床应用提供依据。方法:1用乙醇加热回流法获得其醇提物成分;采用机械-酶消化法分离SD大鼠膝关节处的关节软骨,建立体外培养细胞模型并进行鉴定;2 MTT法检测M-AAE对软骨细胞增殖特性的影响,使用倒置相差显微镜镜下观察软骨细胞状态;3 PCR、Western blot法分别检测体外培养大鼠软骨细胞经M-AAE的0,75,150,300μg·m L^(-1) DMEM溶液干预48 h后的m RNA、蛋白含量的表达。结果:1软骨细胞经Ⅱ型胶原法染色后,阳性对照组胞浆区域浸染为棕黄色;2经MTT检测M-AAE对软骨细胞增殖具有一定的时效-量效关系,其最佳干预时间和浓度分别为48 h和150μg·m L^(-1);3 M-AAE干预软骨细胞后,各加药组细胞周期蛋白依赖性激酶-4(CDK4)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)的m RNA与蛋白含量的表达量均明显高于0μg·m L^(-1)组,其中以150μg·m L^(-1)组的表达量最高(P<0.01),75μg·m L^(-1)组和300μg·m L^(-1)组在CDK4及CyclinD1 m RNA上比较,其表达量差异无统计学意义(P>0.05)。结论:M-AEE可上调CDK4、Cyclin D1m RNA及蛋白表达,对SD大鼠软骨细胞具有一定的促增殖作用。
- 吴子健吴桂玲陈达婷苏澜陈春蓉叶锦霞洪振强
- 关键词:巴戟天牛膝醇提物软骨细胞
- 透骨消痛胶囊及其拆方对退变软骨细胞Wnt/β-catenin信号通路的影响被引量:6
- 2016年
- 背景:前期研究表明,透骨消痛胶囊能调控软骨细胞Rho/Rock信号通路、抑制软骨细胞线粒体凋亡通路的信号转导、改变软骨下骨重塑的速率和模式、改善软骨下骨胶原纤维和钙磷结晶的排列等对骨性关节炎发挥治疗作用。目的:进一步观察透骨消痛胶囊及其拆方含药血清对大鼠退变软骨细胞Wnt/β-catenin信号通路的影响,揭示方中治疗骨性关节炎的主要治法。方法:(1)取SD大鼠40只随机分为透骨消痛胶囊组、补肾柔肝组、活血祛风组和生理盐水组,按照药理试验中动物间和动物与人体间的等效剂量换算,前3组分别灌服等效剂量的透骨消痛胶囊、补肾柔肝药、活血祛风药,生理盐水组灌服生理盐水,制备含药血清用于细胞实验。(2)体外培养SD大鼠软骨细胞并分为5组:空白对照组、模型组、透骨消痛胶囊组、补肾柔肝组和活血祛风组。模型组及各给药组用白细胞介素1β干预软骨细胞24 h后,加入各组血清干预软骨细胞72 h,空白对照组用盐水血清培养,同一时间收集空白对照组软骨细胞。(3)采用实时定量反转录-聚合酶链反应和Western blot法分析Wnt 4、β-catenin、基质金属蛋白酶13的表达。结果与结论:(1)与空白对照组相比,模型组Wnt 4、β-catenin、基质金属蛋白酶13表达均明显增加。(2)与模型组相比,透骨消痛胶囊组、补肾柔肝组和活血祛风组的Wnt 4、β-catenin、基质金属蛋白酶13表达均明显降低,且降低程度为透骨消痛胶囊组>补肾柔肝组>活血祛风组。(3)结果提示透骨消痛胶囊对白细胞介素1β诱导的软骨细胞具有协同保护作用,补肾柔肝为透骨消痛胶囊治疗骨性关节炎的主要治法。
- 吴追乐陈星强陈春蓉于超朱晓勤庄志强
- 关键词:软骨软骨细胞WNT/Β-CATENIN信号通路透骨消痛胶囊活血祛风
- 从Wnt/β-catenin信号通路探讨透骨消痛胶囊对关节软骨的保护作用被引量:6
- 2015年
- 目的:从Wnt/β-catenin信号通路观察透骨消痛胶囊对大鼠膝骨关节炎关节软骨的保护作用。方法:60只健康清洁级2月龄雄性SD大鼠,随机分为正常对照组、模型对照组和透骨消痛胶囊组,每组20只。模型对照组和透骨消痛胶囊组采用质4%木瓜蛋白酶双膝关节腔注射,成功复制骨关节炎模型后,透骨消痛胶囊组给予透骨消痛胶囊287.5 mg·kg^(-1),正常对照组和模型对照组给予相同剂量的生理盐水。给药2个月后,采用Western blot法观察各组关节软骨中含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶-5(ADAMTS-5)、Wnt-4、β-catenin和基质金属蛋白酶-13(MMP-13)的表达。结果:与正常对照组比较,模型对照组ADAMTS-5、Wnt 4、β-catenin和MMP-13表达升高(P<0.05);与模型对照组比较,透骨消痛胶囊组ADAMTS-5、Wnt 4、β-catenin和MMP-13表达降低(P<0.05)。结论:透骨消痛胶囊对关节软骨的保护作用与其降低Wnt/β-catenin信号通路表达相关。
- 吴追乐曾建伟陈星强陈春蓉吴广文庄志强林如辉尤玉莹郑春松
- 关键词:透骨消痛胶囊WNT/Β-CATENIN信号通路
- 基于Wnt/β-catenin信号通路探讨透骨消痛胶囊含药血清对经TNF-α诱导的软骨细胞多靶点保护作用被引量:3
- 2015年
- 目的观察透骨消痛胶囊含药血清对经TNF-α诱导的软骨细胞Wnt/β-catenin信号通路的影响,探讨其对关节软骨细胞的多靶点保护作用。方法将4周龄SD大鼠关节分离软骨细胞进行体外培养、传代,用免疫组化法鉴定第三代软骨细胞。以第3代软骨细胞为靶细胞,分为正常组、模型组和治疗组,模型组和治疗组用TNF-α诱导软骨细胞凋亡后,分别给予生理盐水血清和透骨消痛胶囊含药血清作用24 h,Western blot法观察各组软骨细胞中Wnt/β-catenin信号通路关键蛋白Wnt 4、β-catenin和GSK-3β的表达。结果 (1)细胞鉴定结果为Ⅱ型胶原免疫细胞化学染色阳性,由此说明分离细胞为软骨细胞。(2)与正常组相比,模型组Wnt 4和β-catenin表达升高(P<0.05),而GSK-3β的表达降低(P<0.05);与模型组相比,治疗组Wnt 4和β-catenin表达降低(P<0.05),而GSK-3β的表达升高(P<0.05)。结论透骨消痛胶囊能多靶点调控Wnt/β-catenin信号通路,对软骨细胞具有保护作用,为其治疗骨关节炎提供依据。
- 隋利强陈星强陈春蓉庄志强
- 关键词:软骨细胞透骨消痛胶囊WNT/Β-CATENIN信号通路多靶点