李琳 作品数:11 被引量:22 H指数:3 供职机构: 华南农业大学兽医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广东省自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
H1亚型猪流感病毒一步法实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用 被引量:7 2014年 为建立一种快速、简便、准确的方法以诊断和检测H1亚型猪流感病毒(swine influenza virus,SIV),试验根据H1亚型SIV血凝素(hemagglutinin,HA)基因保守序列,分别设计并合成1对特异性引物和1条TaqMan MGB探针,建立检测H1亚型SIV的一步法实时荧光定量RT-PCR技术。结果显示,该方法的敏感性可达102拷贝/μL,除H1亚型SIV外,对H3N2亚型SIV、H9N1亚型SIV、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒的检测均为阴性,且应用该方法对疑似猪流感样品进行检测,其结果与SPF鸡胚分离病毒方法结果的符合率为94%。本试验结果表明该方法特异性强、重复性好,有望成为一种特异、敏感、快速、定量检测H1亚型SIV的方法。 刘好朋 胡京京 唐续 裴仉福 李冰 李琳 陈瑞爱 贺东生关键词:猪流感病毒 TAQMAN 2010-2012年中国H9亚型禽流感病毒HA基因的变异与进化分析 引言/目的H9亚型禽流感至今仍在我国流行,并且在一些免疫鸡群中仍然可分离到病毒。本研究分析2010年至2012年从国内11省市的鸡场分离的29株H9亚型AIV的HA基因,旨在从分子生物学角度了解当前国内该亚型毒株的变异和... 陈瑞爱 赖汉漳 李琳 刘玉鹏 盘伟岚 张文炎 徐家华 贺东生 唐兆新关键词:H9 禽流感 HA 我国29株H9N2禽流感毒株HA基因的同源性与遗传进化分析 前言禽流感病毒属正粘病毒科,其基因共编码十种蛋白,HA是其中变异频率最高的一种表面糖蛋白。主要决定病毒的抗原性和致病性。H9N2禽流感病毒为低致病性禽流感的代表,1994年在中国首次报道,接着迅速流行于中国大陆。它可导致... 李琳 陈瑞爱 贺东生 赖汉章 李宏星 汤钦文献传递 20株鸡源H9N2亚型禽流感病毒HA基因的变异分析 对2010年2月至2012年5月从国内7省市鸡场分离的20株H9N2亚型禽流感病毒HA基因进行测序和分析。结果表明,分离株间核苷酸序列相似性为88.8%-99.8%,与目前国内主要商品化疫苗株HA基因核苷酸序列相似性仅为... 陈瑞爱 赖汉漳 贺东生 唐兆新 李琳 刘玉鹏 张文炎关键词:禽流感病毒 基因变异 分子生物学 不同病毒血凝素的比较与稳定性研究 被引量:1 2010年 血凝素是某些病毒的重要功能蛋白之一,起着重要的生理功能。通过NCBI获得不同病毒血凝素序列,使用Clustal W 1.81软件比较发现不同病毒血凝素氨基酸序列相似性低,二级结构差异显著。在不同温度和pH下,发现病毒血凝素具有温度稳定性,但受pH的影响较大,在pH大于5或者小于2时血凝素较为稳定,在pH为3~5血凝素稳定极差。 徐家华 陈瑞爱 柏建山 李琳 唐秀英 何芳 黄星强 练柄兴关键词:血凝素 稳定性 2012-2015中国H9N2亚型禽流感病毒流行变异分析 对2012-2015年从中国9个省份的己免疫鸡场中分离到的42株H9N2亚型AIV及近年流感数据库中新增410株中国分离株HA序列和306株全基因序列比较和抗原性分析.42株H9N2亚型AIV的HA基因的核苷酸相似性为8... 赖汉漳 刘郁夫 李琳 刘玉鹏 徐家华 高任 罗琴芳 陈瑞爱关键词:H9N2 禽流感 病毒 传染性胃肠炎病毒PY-D株的分离鉴定及其S基因B、C抗原位点的克隆与序列分析 2014年 猪传染性胃肠炎(transmissible gastroenteritis,TGE)是由猪传染性胃肠炎病毒(Porcine transmissible gastroenteritis virus,TGEV)引起的、猪的一种急性、高度接触性传染病,具有高致病性、高死亡率的特点,不同年龄和品种的猪对该病均易感,表现为呕吐、严重腹泻和脱水等临床特征,且该病在世界范围内广泛分布,我国从20世纪50年代末期就有该病的报道,近年来TGE在我国部分地区时有发生和流行,给养猪业造成了极大的危害。对该病的有效监测是预防该病的方法之一,而其中以病毒分离鉴定、抗体监测为主要内容。 刘好朋 胡京京 李冰 张显浩 裴仉福 李琳 唐续 尚辉琴 陈瑞爱 贺东生关键词:猪传染性胃肠炎病毒 病毒分离鉴定 抗原位点 S基因 抗体监测 新兴地区鸭疫里默氏杆菌血清3型的分离鉴定 2010年 通过对广东省新兴地区某番鸭养殖场疑似鸭疫里默氏杆菌病的病死鸭进行病原分离、生化鉴定及血清学鉴定,确诊该次疫情为鸭疫里默氏杆菌血清3型所引起。 区德庆 陈瑞爱 王林川 唐秀英 周玉琼 黄文科 林绮萍 李琳关键词:鸭疫里默氏杆菌 血清型 试验鸡感染H5N1亚型禽流感病毒后排毒规律的研究 被引量:4 2004年 目的 为揭示H5N1亚型禽流感病毒感染试验鸡后体内各组织的排毒规律。方法 将 180只 2 8d非免疫石岐杂鸡随机分为两组 ,每组 90只 ,一组为攻毒组 ,用含H5N1亚型AIV(A/Goose/GD/ 2 / 96 ,对 2 8d非免疫石岐杂鸡LD50 为 10 -5 4× 0 2ml)尿囊液 10 -4× 0 2ml/只经肌肉注射途径攻毒 ,一组接种 0 2ml/只灭菌生理盐水为对照。攻毒后前 4d ,每隔 6h观察试验组和对照组鸡的临床表现 ,每组随机抽取两只剖杀 ,收集脑、肝、脾、肾、胰腺、肌肉、喉头与泄殖腔拭子进行病毒分离 ;攻毒4d后改为每隔 12h取样 ,直至第 11d ,同时采集血清测定禽流感HI抗体效价。结果 试验鸡攻毒 18h后可从泄殖腔及喉头拭子中分离到病毒 ,持续到攻毒后第 7d左右 ;攻毒后 36h可以从脑、肝、脾、肾、胰腺的混合样品中分离到病毒 ,可持续到攻毒后第 10d左右 ; 廖明 罗开健 程珏益 姚旋 苏湘文 李琳 辛朝安关键词:H5N1亚型 禽流感病毒 排毒规律 两株鸡传染性支气管炎病毒的分离鉴定及S1基因序列分析 被引量:10 2015年 为调查广东地区鸡传染性支气管炎病毒(IBV)的流行及其遗传变异情况,本研究通过病料SPF鸡胚接种和鸡胚尿囊液的RT-PCR鉴定,于2013年从广东湛江地区不同发病鸡场分离到两株IBV,分别命名为CK/CH/GD/ZJ10/2013和CK/CH/GD/ZJ11/2013,并对这两株IBV的S1基因进行序列分析。结果显示,CK/CH/GD/ZJ10/2013株S1基因全长1 626bp,编码542个氨基酸,其裂解位点为NRFRR,属于基因型Ⅲ,并推测其为基因型Ⅲ毒株(CK/CH/GX/NN11-3)与基因型Ⅰ毒株(GX-NN-6)在S1基因处发生重组而产生的新毒株;CK/CH/GD/ZJ11/2013株S1基因全长1 620bp,编码540个氨基酸,其裂解位点为HRRRR,属于基因型Ⅰ(类QX型);两株IBV的S1基因间核苷酸序列及其推导的氨基酸序列同源性较低,与位于同一基因型的参考毒株间同源性较高,而与中国使用的Mass型常规疫苗H120和H52之间的同源性最低,仅为75.7%~76.3%和77.1%~77.9%。本研究可为广东省IBV的流行病学调查和分子生物学研究提供参考。 尚辉琴 李琳 陈瑞爱 刘红波 梁梅兰 贺东生关键词:鸡传染性支气管炎病毒 S1基因