李红梅 作品数:30 被引量:119 H指数:5 供职机构: 华南农业大学动物科学学院 更多>> 发文基金: 黑龙江省自然科学基金 国家自然科学基金 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 农业科学 语言文字 文化科学 医药卫生 更多>>
湖北株H3N8亚型马流感病毒HA基因的序列测定及其HA蛋白遗传特性分析 被引量:3 2010年 2008年从湖北省分离到1株H3N8亚型马流感病毒A/equine/Hubei/6/08。以2002年美国KENTUKY株为模板设计HA基因测序引物,进行RT-PCR,然后测定该分离株的HA基因核苷酸序列。经NCBI上Blast同源性比较发现,与A/equine/Newmarket/5/2003(H3N8)同源性较高为98.7%。HA蛋白遗传进化分析表明该毒株隶属于H3N8亚型马流感病毒中的美洲系福罗里达亚系。该株与OIE现在推荐的疫苗候选株A/equine/Kentuck-y/5/2002(H3N8)HA1蛋白氨基酸序列比对发现有3处氨基酸替换位点;与OIE以往推荐的疫苗候选株A/e-quine/Kentucky/1/1994(H3N8)比对发现有11处氨基酸替换位点。研究结果表明该分离株可作为中国研制马流感疫苗的候选株。 黄文强 郭巍 赵立平 盛名巍 王宇 李红梅 相文华关键词:H3N8亚型马流感病毒 HA基因 中国华南、华中、东北和西北地区马动脉炎病毒(EAV)感染马血清流行病学调查 被引量:6 2012年 马病毒性动脉炎(EVA)是一种由马动脉炎病毒(EAV)引起马属动物主要通过呼吸系统和生殖系统传播的传染病,是危害养马业及赛马业的重要疾病之一。本试验应用纯化EAV全病毒为抗原建立EAV-IgG间接ELISA方法与西班牙INGEZIM-ARTERITIS试剂盒分别检测华南、华中、东北和西北地区共计383份马血清样品。其结果为:华南地区赛马动脉炎阳性率为26%,华中地区赛马动脉炎阳性率为0,东北地区役用马动脉炎阳性率为8.26%,西北地区役用马动脉炎阳性率为7.55%。鉴于此,有必要加强EVA检测,掌握EVA在我国分布,以有效的预防和控制本病传播。 李红梅 侯玉杰 时成龙 郭巍 胡兰 赵立平 相文华关键词:赛马 马动脉炎病毒 流行病学调查 标准听写训练提升外语听力水平的定量研究 被引量:4 2011年 本研究的目的在于检验标准听写训练在提升学生EFL听力水平方面的实际效果,并揭示标准听写训练效果与学生英语听力基础之间的关系。基于149名非英语专业硕士研究生听力对比实验的定量研究结果表明:(1)标准听写训练有助于学生英语听力水平的提高;(2)标准听写训练对英语听力水平的提升效果与学生英语听力基础之间存在负相关关系。 李红梅关键词:听力水平 RNAi抗猪繁殖与呼吸综合征病毒的研究进展 2013年 猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是世界上主要的猪传染性疾病之一,以妊娠母猪发热、厌食、早产、流产、死胎等繁殖障碍及仔猪高死亡率和育成猪呼吸困难,类流感症状、发育迟缓为主要的特征。该病给各个国家的养猪业带来巨大的经济损失,目前,疫苗和抗病毒药物只能提供有限的保护。自2006年以来,不断有研究者应用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术开展抗猪繁殖与呼吸综合征病毒的研究,并取得了一些阶段性成果。对已有的研究成果进行了综述。 李红梅 贺聪 张春红 张健騑 张建峰 孟轩 郭鹏举关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒 RNAI 抗病毒 腺病毒/日本脑炎病毒复制子嵌合载体的构建 被引量:1 2013年 为解决日本脑炎病毒(JEV)复制子DNA疫苗载体不稳定和递送效率低的缺点,本研究利用具有高效递送效率的人5型复制缺陷性腺病毒(AdV)来递送JEV复制子,构建嵌合载体。本研究将已构建的含有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因的JEV复制子克隆至经过改造的带有SwaⅠ酶切位点的pShuttle-CMV载体中,再将来自pCI载体的嵌合内含子插入JEV复制子中,得到转移载体pSh-JEV-In-EGFP,经SwaⅠ线性化后电转化至含有腺病毒骨架载体AdEasy-1的BJ5183感受态细胞,将所得重组腺粒经PacⅠ线性化后转染HEK293细胞,传代直至出现细胞病变,得到含有表达EGFP的JEV复制子的重组腺病毒,命名为rAdV-JEV-In-EGFP。结果表明,pSh-JEV-In-EGFP在细菌中传20代仍然保持稳定,而且在rAdV-JEV-In-EGFP感染的HEK293细胞中,JEV复制子能够自我复制,并启动EGFP蛋白稳定、高效地表达。本研究为进一步研发以腺病毒递送的JEV复制子为基础的二价新型疫苗奠定基础。 李红梅 孙元 亓文宝 孟其麟 田大勇 廖明 仇华吉关键词:腺病毒 内含子 马动脉炎病毒GL、M和N蛋白主要抗原域的原核表达及抗原性鉴定 被引量:1 2012年 采用RT-PCR方法从EAV Bucyrus株扩增了截短的GL、M和全长的N基因片段,将三者分别克隆到表达载体pGEX-6p-1中,测序验证后转化Rosetta(DE3)宿主菌中经IPTG诱导表达,诱导后菌体裂解物经SDS-PAGE分析。试验结果表明,重组菌表达出约35 000、34 000和38 000的特异性条带,通过条件优化及切胶纯化获得较高浓度的目的蛋白。经Western-blot和间接ELISA分析,纯化的蛋白只与抗马动脉炎病毒阳性血清发生特异性反应,证实该蛋白具有良好的反应原性和特异性。 王贵宾 郭巍 赵立平 李红梅 赵敏 相文华关键词:马动脉炎病毒 原核表达 抗原性 马疱疹病毒gD蛋白主要抗原域的表达及初步应用 被引量:1 2010年 根据GenBank马疱疹病毒1型(EHV-1)和4型(EHV-4)gD基因进行分析,选取同源性较高且抗原性强的C端序列设计一对引物进行扩增。将扩增的基因插入pET-30a的BamHⅠ和SalⅠ之间构建原核表达载体pET-gD。然后将pET-gD质粒转化至BL21(DE3)宿主菌,对培养和表达条件进行优化,实现EHV gD蛋白主要抗原区域的高效表达。将重组pET-gD蛋白进行纯化并接种长白兔制备高免血清。经免疫印迹试验鉴定,证实所得纯化表达产物具有良好的抗原性。 时成龙 侯玉杰 相文华 郭巍 李红梅 赵立平 何剑斌关键词:原核表达 免疫原性 马动脉炎病毒GP5蛋白主要抗原域的表达及鉴定 2010年 在分析EAV-GP5蛋白抗原性的基础上,设计一对引物扩增GP5蛋白的主要抗原域编码EAV-GP5 79~330 bp。将扩增基因插入pET-30aBamHⅠ和HindⅢ间构建原核表达载体pET-GP5。将pET-GP5质粒转入BL21(DE3)宿主菌并优化诱导表达条件,实现马动脉炎病毒EAV-GP5蛋白主要抗原域的高效表达。重组pGP5经纯化制备兔抗pGP5免疫血清,经免疫印迹及间接免疫荧光试验鉴定,证实所得表达产物具有良好的免疫原性。 侯玉杰 时成龙 相文华 郭巍 李红梅 赵立平 胡兰关键词:马动脉炎病毒 GP5蛋白 免疫原性 汉语“被”字结构中“被”字语类的解析:特殊动词说 被引量:1 2015年 作为汉语"被"字结构研究的焦点问题,"被"字语类归属的认定直接关系到对该结构句法生成过程的认知。按照句法理论发展的阶段顺序,对不同时期围绕汉语"被"字结构中"被"字的各种特殊动词说进行比较与分析。虽然早期研究者对"被"在句法运算中的"特殊性"持不同看法,并给"被"字冠以"ECM动词""轻动词""次动词""表示被动的功能性动词成分"等不同名号,但普遍认同"被"在"被"字句中承担的是辅助性的作用。据此,在句法理论发展的最新阶段,这种"辅助性"可以通过把"被"分析成"表示被动,且具有类似EPP特征的强名词性特征的功能性动词成分"以获得较好的解释。 李红梅shRNA抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)JXA1-R株在Marc-145细胞中复制及抗PRRSV细胞株的建立 被引量:1 2013年 猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是世界上主要的猪传染性疾病之一,目前,疫苗和抗病毒药物只能提供有限的保护。本研究选择猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)JXA1-R株ORF1a、ORF3、ORF4、ORF5、ORF6、ORF7的保守区域为靶序列,利用pSilencer2.1-U6neo构建shRNA表达载体并转染Marc-145细胞。经实时荧光定量PCR、细胞病变及病毒滴度分析,结果显示,ORF1a-4-shRNA、ORF3-1-shRNA、ORF6-2-shRNA干扰质粒能明显抑制病毒基因的转录,并有效抑制PRRSV在Marc-145上的增殖,显著降低病毒滴度。最后筛选ORF6-2-shRNA表达质粒转染猪胎儿成纤维细胞,构建稳定转染细胞株,为抗PRRSV转基因猪的生产奠定了基础。 李红梅 贺聪 张茂 孟轩 张建峰 张健騑 郭鹏举关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒 RNA干扰