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刘娟: 作品数：12 被引量：12H指数：2; 供职机构：中国农业科学院兰州兽医研究所更多>>; 发文基金：国家肉牛牦牛产业技术体系项目国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>; 相关领域：农业科学生物学自动化与计算机技术更多>>

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环形泰勒虫TaSDP基因的原核表达及TaSDP蛋白多克隆抗体的制备被引量：4: 2015年; 利用PCR技术从环形泰勒虫裂殖体cDNA中扩增TaSDP(Theileria annulata schizont-derived protein)基因,用获得的基因片段构建原核表达载体pET-30a(+)-TaSDP,并在大肠杆菌BL21(DE3)pLysS中进行表达,蛋白以包涵体的形式存在;融合蛋白经纯化后免疫家兔,制备多克隆抗体,并分别用ELISA和Western-blot测定抗体的效价及特异性。结果显示,获得的TaSDP基因的长度为552bp,制备的多克隆抗体不仅可与重组蛋白His-TaSDP发生反应,而且可以识别天然的虫体蛋白,效价高于1∶215。上述研究结果为开展TaSDP在细胞调控方面的研究奠定了基础。; 杨聪山刘军龙李有全田占成赵洪喜刘娟刘爱红任巧云牛庆丽杨吉飞谢俊仁罗金陈泽张林刘志杰刘光远殷宏关贵全罗建勋; 关键词：环形泰勒虫裂殖体多克隆抗体

河南南阳某种牛场泰勒虫流行病学调查: 牛泰勒虫病是由泰勒科(Theileriidae)泰勒属(Theileria)的原虫所引起的一种蜱传性梨形虫病,对生产养殖危害极大；我国已报道出现过的有环形泰勒虫、中华泰勒虫和瑟氏泰勒虫三种病原,其中环形泰勒虫致病性最强,...; 刘娟刘军龙关贵全刘爱红赵洪喜杨聪山赵帅阳李有全殷宏罗建勋

一种CpG寡聚脱氧核苷酸及制备与其用途: 本发明公开了一种含CpG寡聚脱氧核苷酸复合佐剂的制备及其用途。本发明提供了序列为SEQ ID No.1的CpG寡聚脱氧核苷酸，且所有核苷酸均为硫代修饰。本发明的CpG寡聚脱氧核苷酸具有增强B细胞增殖和ThΙ型免疫反应的能...; 景志忠房永祥赵波贾怀杰陈国华何小兵沈岩尔李政厅杨帆刘娟秦娟; 文献传递

环形泰勒虫3-磷酸甘油醛脱氢酶的原核表达、多克隆抗体制备及亚细胞定位: 2016年; 为了研究环形泰勒虫3-磷酸甘油醛脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)的功能,本试验利用PCR技术从环形泰勒虫裂殖体cDNA中扩增环形泰勒虫GAPDH(TaGAPDH)基因,将扩增产物克隆到原核表达载体pET-30a(+)中,并转入大肠杆菌BL21(DE3)中进行融合蛋白诱导表达,融合蛋白纯化后免疫家兔,制备多克隆抗体,分别用间接ELISA和Western blotting检测抗体的效价和特异性;利用激光共聚焦荧光显微镜观察TaGAPDH蛋白在环形泰勒虫裂殖体中的亚细胞定位。结果显示,克隆得到了TaGAPDH全长基因,大小为1 020bp;SDS-PAGE分析结果显示,融合蛋白大小约44ku,且以包涵体形式存在。制备的多克隆抗体效价高达1∶12 800,具有很高的特异性;亚细胞定位显示TaGAPDH蛋白主要分布于环形泰勒虫裂殖体细胞质内。以上结果表明本试验成功克隆表达了TaGAPDH基因,并制备了针对TaGAPDH蛋白的兔多克隆抗体,为筛选环形泰勒虫病疫苗、药物靶点及研究环形泰勒虫能量代谢奠定了基础。; 赵洪喜刘军龙杨聪山赵帅阳刘娟刘光远殷宏关贵全罗建勋; 关键词：环形泰勒虫 3-磷酸甘油醛脱氢酶多克隆抗体

一种CpG寡聚脱氧核苷酸及制备与其用途: 本发明公开了一种含CpG寡聚脱氧核苷酸复合佐剂的制备及其用途。本发明提供了序列为SEQ ID No.1的CpG寡聚脱氧核苷酸，且所有核苷酸均为硫代修饰。本发明的CpG寡聚脱氧核苷酸具有增强B细胞增殖和ThΙ型免疫反应的能...; 景志忠房永祥赵波贾怀杰陈国华何小兵沈岩尔李政厅杨帆刘娟秦娟

一种CpG寡聚脱氧核苷酸及制备与其用途: 本发明公开了一种含CpG寡聚脱氧核苷酸复合佐剂的制备及其用途。本发明提供了序列为SEQ ID No.1的CpG寡聚脱氧核苷酸，且所有核苷酸均为硫代修饰。本发明的CpG寡聚脱氧核苷酸具有增强B细胞增殖和ThΙ型免疫反应的能...; 景志忠房永祥赵波贾怀杰陈国华何小兵沈岩尔李政厅杨帆刘娟秦娟; 文献传递

河南南阳某种牛场泰勒虫流行病学调查: 目的:牛泰勒虫病是由泰勒科(Theileriidae)泰勒属(Theileria)的原虫所引起的一种蜱传性梨形虫病,对生产养殖危害极大;我国已报道出现过的有环形泰勒虫、中华泰勒虫和瑟氏泰勒虫三种病原,其中环形泰勒虫致病性...; 刘娟刘军龙关贵全刘爱红赵洪喜杨聪山赵帅阳李有全殷宏罗建勋; 文献传递

检测鉴别山羊痘病毒属病毒的试剂盒及使用方法: 本发明涉及一种病毒检测试剂盒及其使用方法，特别是一种用于检测鉴别山羊痘病毒属病毒(山羊痘病毒，绵羊痘病毒、牛结节性皮肤病病毒)的试剂盒及用于非疾病诊断目的的使用方法。本发明的检测鉴别山羊痘病毒属病毒(山羊痘病毒、绵羊痘病...; 景志忠房永祥李政厅贾怀杰娄忠子何小兵朱丽珂陈国华李维克高真贞杨帆刘娟; 文献传递

牛泰勒虫的分离鉴定及进化分析被引量：5: 2016年; 牛泰勒虫病是严重危害养牛业可持续发展的血液原虫病,本试验采用血涂片镜检和特异性PCR检测技术,对中国某种牛场的18份血样进行了泰勒虫检测,然后分别用ITS基因通用引物和4种MPSP等位基因特异性引物自阳性样品中扩增出对应的基因,克隆测序后,进行序列比对和进化分析,确定泰勒虫基因型。结果显示,自18份牛血样中检出3份阳性样品,且全为瑟氏泰勒虫感染;3个阳性样品的瑟氏泰勒虫MPSP等位基因扩增结果显示,1个阳性样品为I(Ikeda)和C(Chitose)型的混合感染,另2个样品为I型单一感染,而均无B(Buffeli)和Thai型;用扩增的MPSP基因测序,构建进化树,确认其感染的瑟氏泰勒虫存在MPSP 1型和2型。这些结果表明,该种牛场存在瑟氏泰勒虫感染,且同时存在2种MPSP等位基因型;MPSP等位基因的复杂性可能使该病的免疫防控更加困难。本试验结果为深入研究瑟氏泰勒虫感染情况及免疫防控提供了数据支持,并为养防一体做好监控。; 刘娟刘军龙刘爱红赵洪喜杨聪山赵帅阳刘光远殷宏关贵全罗建勋; 关键词：ITS基因

一种用于区分鉴别感染不同种牛泰勒虫的试剂盒: 本发明公开一种用于能够检测与区分牛环形泰勒虫、瑟氏泰勒虫和中华泰勒虫的定量PCR检测引物和探针。本发明的引物对及探针的基因序列分别为：SEQ ID NO.1/SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3、SEQ ID ...; 刘军龙谢俊仁刘娟关贵全刘爱红李有全罗建勋殷宏刘光远; 文献传递