何俊波
- 作品数:5 被引量:15H指数:3
- 供职机构:江苏大学附属医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金江苏省自然科学基金江苏省普通高校研究生科研创新计划项目更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- ALKBH5对人胃癌AGS细胞迁移和侵袭的影响被引量:6
- 2017年
- 该研究探讨了6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenosine,m^6A)去甲基酶ALKBH5(alk B homolog5)对人胃癌AGS细胞迁移和侵袭的影响。通过数据库分析ALKBH5在胃癌组织中的表达水平;Real-time PCR和Western blot检测ALKBH5在胃癌细胞中表达水平;用sh-EGFP和sh-ALKBH5质粒转染人胃腺癌AGS细胞,Transwell实验检测细胞的迁移和侵袭能力,细胞划痕实验进一步检测细胞的迁移能力;用Western blot检测上皮–间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白质的变化。结果显示,弥漫性胃腺癌中ALKBH5的m RNA水平明显低于正常胃组织和其他类型的胃癌组织,且其基因拷贝数也明显低于正常胃组织。在胃癌细胞系中,AGS细胞ALKBH5蛋白质和m RNA水平最高,sh-ALKBH5干扰能明显促进AGS细胞迁移和侵袭能力,且下调其上皮指标水平,而上调间质指标水平。上述结果提示,ALKBH5在胃癌组织中可能是一个抑癌基因,与胃癌细胞的迁移和侵袭能力负相关。
- 陆瑛王大为何俊波周朦曾建龚爱华徐岷
- 关键词:胃癌细胞迁移细胞侵袭
- PRMT5对肝癌细胞增殖及凋亡的影响被引量:6
- 2015年
- 该文目的为探讨蛋白质精氨酸甲基转移酶5(protein arginine methyltranserase 5,PRMT5)对肝癌细胞增殖、凋亡的影响。设计PRMT5短发夹核糖核酸(sh RNA)序列,装入p LKO.1-TRC vector质粒,进行慢病毒包装,感染肝癌细胞SMMC-7721和BEL-7402,嘌呤霉素筛选并培养稳定低表达PRMT5细胞株。Western blot、q PCR检测sh RNA干扰效率;CCK-8检测细胞增殖活性;平板克隆法检测细胞克隆形成能力;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot检测细胞增殖、凋亡相关蛋白的影响。结果显示,成功构建慢病毒重组质粒sh-PRMT5并感染肝癌细胞。Western blot、q PCR结果表明,筛选出的稳转细胞株能低表达PRMT5;在肝癌细胞中下调PRMT5的表达,可抑制细胞增殖(P<0.05),降低cyclin B1、cyclin D1、cdc20和cdc25B蛋白质水平(P<0.05),降低细胞克隆形成能力(P<0.05),促进细胞凋亡(P<0.05),同时能诱导Caspase-3表达,降低Bcl-2/Bax的比值(P<0.05)。由此说明,下调PRMT5的表达能抑制肝癌细胞增殖,诱导细胞凋亡,为进一步研究体内PRMT5的作用提供基础。
- 张尤历葛璐陆瑛胡昌龙张行行彭琬昕何俊波龚爱华徐岷
- 关键词:肝癌增殖凋亡
- 甲基化结合蛋白2对人胰腺癌PANC1细胞增殖和迁移的影响被引量:3
- 2016年
- 目的:探讨甲基化结合蛋白2(methyl-CpG-binding protein 2,MeCP2)对人胰腺癌PANC1细胞增殖和迁移能力的影响。方法:采用qRT-PCR和免疫印迹法检测MeCP2在PANC1、Pa Tu8988、SW1990 3种胰腺癌细胞株中的表达水平;将干扰质粒sh MeCP2(实验组)与对照质粒sh EGFP(对照组)分别转入PANC1细胞中,CCK-8和克隆形成实验检测细胞增殖能力,Transwell检测细胞迁移能力。结果:MeCP2在3种胰腺癌细胞中差异性表达。与对照组相比,实验组PANC1细胞中MeCP2 mRNA和蛋白表达明显降低(t分别为6.58,8.42,P均<0.05);细胞相对增殖率、细胞克隆形成数及迁移能力明显降低(P均<0.05)。结论:下调MeCP2表达可降低胰腺癌PANC1细胞的增殖和迁移能力。
- 李杰张尤历何俊波吴琪周朦龚爱华徐岷
- 关键词:胰腺癌细胞增殖细胞迁移
- 蛋白质精氨酸甲基转移酶1促进胰腺癌细胞的增殖和迁移能力(英文)
- 2017年
- 该文探讨了蛋白质精氨酸甲基转移酶1(protein arginine methyltranserase 1,PRMT1)对胰腺癌细胞迁移和增殖的影响。在数据库中分析了PRMT1在正常胰腺组织和胰腺癌组织中的表达。用Western blot和Real-time PCR实验检测不同胰腺癌细胞中PRMT1的基础表达量。在Pa Tu8988和Bx PC3细胞中干扰PRMT1,Western blot、q PCR检测sh RNA干扰效率;CCK-8检测细胞增殖活性;平板克隆法检测细胞克隆形成能力;Transwell迁移实验检测细胞迁移能力;Western blot检测细胞EMT(epithelial-mesenchymal transition)相关蛋白变化。相反,在SW1990细胞中过表达PRMT1,并做上述同样的实验进行检测。结果显示,PRMT1在胰腺癌组织中的表达明显高于正常胰腺组织。在胰腺癌细胞中下调PRMT1的表达,可以抑制细胞的增殖和迁移能力,增高上皮标志物E-钙黏蛋白的水平,降低间质标志物N-cadherin钙黏蛋白的水平。上调PRMT1的表达得到相反的结果。结果表明,PRMT1能促进胰腺癌细胞的增殖和迁移能力,并影响EMT标志物蛋白质水平。该研究为进一步研究体内PRMT1的作用提供基础。
- 魏虹张尤历王珏周朦何俊波周海浪王大为周改冯雯龚爱华徐岷
- 关键词:胰腺癌增殖迁移
- 甲基化CpG结合域蛋白MBD2对胰腺癌细胞增殖和迁移的影响
- 2016年
- 该文探讨甲基化Cp G结合域蛋白2(methyl-Cp G-binding domain protein 2,MBD2)对人胰腺癌细胞增殖和迁移的影响。将干扰质粒MBD2 sh RNA转染入MBD2高表达的Pa Tu8988细胞和SW1990细胞中,运用CCK-8法检测细胞的增殖活性并绘制生长曲线,克隆形成实验检测细胞克隆形成率,Transwell检测细胞迁移率。结果显示,下调MBD2后,Pa Tu8988细胞中MBD2基因的表达量明显降低,细胞增殖减慢,克隆形成率降低,细胞迁移率减少;在SW1990细胞中下调MBD2基因后,得到类似结果。由此说明,沉默MBD2基因可以抑制胰腺癌细胞Pa Tu8988和SW1990的增殖和迁移,为进一步研究MBD2在胰腺癌细胞增殖与迁移中的作用机制奠定了基础。
- 张尤历王桢何俊波魏虹葛璐李杰龚爱华徐岷
- 关键词:胰腺癌克隆形成细胞增殖