高爱君
- 作品数:2 被引量:4H指数:1
- 供职机构:第三军医大学西南医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 聚凝胺增强Ror2重组腺病毒感染K562细胞效应的研究被引量:3
- 2015年
- 目的探索应用聚凝胺(polybrene)试剂增强Ror2重组腺病毒对K562细胞转染效率的技术。方法在K562细胞中分别加入0~12μl Ror2重组腺病毒,摸索最佳重组腺病毒用量;同时加入0~5μg/ml polybrene和最佳重组腺病毒用量,培养1~3d后,在荧光显微镜下计数,对比加入polybrene前后被感染的细胞数。台盼蓝染色观察重组腺病毒引起K562细胞死亡的情况。采用RT-PCR和Western blotting检测Ror2基因的表达情况。结果 Polybrene浓度为3μg/ml和重组腺病毒8μl时,感染效果最佳,对细胞生长影响较小,实验组感染效果是对照组的17倍;加入polybrene后,外源性Ror2m RNA和蛋白表达水平均明显增高。结论 Polybrene能显著增强重组腺病毒感染K562细胞的作用,并能高效表达外源性Ror2基因,该法简便、价廉、有效,是血液疾病分子生物学研究的一个良好策略。
- 高爱君司维柯赵宸吴韦铷
- 关键词:聚凝胺腺病毒科K562细胞
- 孤儿受体ROR2诱导慢性髓细胞白血病细胞株K562凋亡的研究被引量:1
- 2016年
- 目的研究ROR2抑制慢性髓细胞白血病细胞株K562增殖并诱导其凋亡的作用,初步探讨可能的机制。方法采用重组ROR2腺病毒(AdROR2)感染K562细胞为实验组,重组RFP腺病毒(AdRFP)感染K562细胞为对照组。采用CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期变化和细胞凋亡。Western blot检测实验组和对照组促凋亡基因caspase3和抗凋亡基因survivin的表达。结果与对照组比较,实验组ROR2感染K562细胞48 h后,细胞增殖明显受抑(P<0.05),细胞周期主要阻滞在G2/M期(P<0.05),细胞凋亡增多,48 h凋亡显著(P<0.05),同时促凋亡蛋白caspase3表达升高(P<0.05),抗凋亡蛋白survivin表达下降(P<0.05)。结论过表达ROR2能够抑制K562细胞的增殖并诱导其凋亡,其机制可能与上调了促凋亡蛋白caspase3和下调了抗凋亡蛋白survivin表达有关。
- 高爱君司维柯赵宸吴韦铷
- 关键词:K562细胞细胞周期