韩玲玲
- 作品数：6 被引量：192H指数：6
- 供职机构：青岛海洋大学海洋生命学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家攀登计划国家重点基础研究发展计划更多>>
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- 中国对虾遗传多样性的RAPD分析──朝鲜半岛西海岸群体的DNA多态性被引量：62
- 1999年
- 1997年4月自黄海越冬场采集中国对虾朝鲜半岛西海岸群体样品。采用RAPD技术对该群体共33个个体的基因组DNA多态性进行了检测。利用20个随机寡核苷酸引物共检测105个位点，其中多态位点41个，占39％。单个引物获得的标记为1－10个，分子量为180－2200bp。个体间的平均遗传距离为0．093，群体的平均余合度为0．2176。表明该对虾群体的遗传多样性较低。低水平的遗传多样性一方面使中国对虾的生存情况更加危险，同时其本身也可能是对虾对病害、恶劣环境等不利因素的抵抗力下降，从而导致资源衰退的原因之一。研究结果证实：在检测种群遗传变异度大小方面，RAPD具有比同工酶更高的灵敏度和分辨率。
- 石拓孔杰刘萍韩玲玲庄志猛邓景耀
- 关键词：中国对虾RAPD多态位点
- 中国对虾黄渤海沿岸群亲本及子一代RAPD分析被引量：30
- 2000年
- 1997年 3月从山东海阳市近海捕获中国对虾 ,取两尾单独暂养 ,产卵后培育出子代 ,用随机扩增多态性 DNA(Random Amplified Polymorphic DNA,RAPD)技术对亲本和子代的基因组 DNA进行多态性研究 ,目的是在分子水平上了解亲本与子一代之间的遗传结构 ,比较了两个家系的遗传差异。结果表明 ,使用 OPG系列 2 0个引物 ,有 16个引物获得了谱带清晰且重复性好的产物 ,扩增的多态性片段分子量大小在 2 6 0 0～ 2 2 0 bp之间。家系 A检测 78个位点 ,其中多态位点数为 14个 ,占17.95% ,家系 B检测 88个位点 ,其中多态位点数为 18个 ,占 2 0 .4 5%。家系 A父本对其子代的遗传距离为 0 .0 4 50± 0 .0 0 93,母本对其子代的遗传距离为 0 .0 570± 0 .0 0 87,30个个体之间的遗传距离为 0 .0 2 83± 0 .0 0 95;家系 B父本对其子代的遗传距离为 0 .0 52 3± 0 .0 12 4 ,母本对其子代的遗传距离为 0 .0 6 4 1± 0 .0 132 ,2 8个个体之间的遗传距离为 0 .0 384± 0 .0 155。研究结果进一步证实 ,子代之间的遗传距离比其父、母与子代之间更小 ,遗传变异程度更低。另外 ,发现了与性别有关的 12 0 0 bp的片段。
- 刘萍孔杰石拓刘志鸿邓景耀庄志猛徐怀恕韩玲玲
- 关键词：中国对虾RAPD分析
- 暴发性流行病病原对中国对虾亲虾人工感染及对子代影响的PCR检测被引量：42
- 1999年
- 1997年4月在山东海阳市近海捕获10尾中国对虾，采用患暴发性流行病的虾池中的病虾为毒种，进行人工感染试验。采用两次聚合酶链反应（PCR）检测方法，对感染亲虾的胃、腮、卵巢，以及卵和各期幼体进行跟踪检测。对经人工感染的10尾亲虾组织的PCR检测结果表明，6尾虾的胃样呈阳性，其中4尾为第1次检测出阳性；1尾虾的腮样呈阳性；2尾虾的卵巢样呈阳性，且其所产的卵子也呈阳性；每尾亲虾产卵所孵化出来的各期幼体，经两次PCR检测均呈阴性。随着实验水温的上升，人工感染病毒的亲虾存活的时间缩短；卵子的孵化率随着对亲虾感染时间的增长而有大幅度降低的趋势。
- 刘萍ns.qd.sd.cn孔杰石拓刘志鸿李健韩玲玲
- 关键词：亲虾子代PCR检测
- 中国对虾一种C型杆状病毒随机扩增多态性DNA分析被引量：45
- 1997年
- 于1994和1995两年的7月从青岛崂山上马镇养虾场中染病的中国对虾中分离纯化出一种C型杆状病毒。为建立中国对虾病毒的鉴别和检测技术，利用随机扩增多态性DNA技术对电泳纯化的病毒DNA进行分析和研究。将病虾匀浆、经差速离心和蔗糖密度梯度离心纯化获得完整病毒粒子；从病毒中提取DNA后再进行电泳纯化，收集长度完整、均一的病毒DNA；在其他参数保持不变的情况下，对Operon生产的10碱基随机引物K试剂盒进行扩增试验。结果显示：1．病毒DNA有两种存在形式；2．K试剂盒中有2个引物能将病毒DNA扩增出长度不同的产物，其中编号为OPK—01的随机引物可产生多态性DNA片段；3．1995年中国对虾杆状病毒的RAPD分析结果与1994年相同，证实1994和1995两年度引起中国对虾疾病的病原是同一种杆状病毒。由此可以认为：随机扩增多态性DNA技术能将中国对虾C型杆状病毒扩增出多态性DNA片段而达到病毒鉴别和诊断的目的。
- 孔杰石拓刘萍韩玲玲徐怀恕相建海
- 关键词：中国对虾杆状病毒多态性DNA分析
- 中国对虾黄、渤海沿岸地理群的RAPD分析被引量：54
- 2000年
- 采用随机扩增多态 ＤＮＡ（ｒａｎｄｏｍ ａｍｐｌｉｆｉｅｄ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ ＤＮＡ，简称ＲＡＰＤ）技 术，对中国对虾的黄、渤海地理群的３２个个体遗传多样性进行了检测．使用ＯＰＩ系列 的２０个 １０ ｂｐ的寡核苷酸随机引物，对每个个体的基因组 ＤＮＡ进行扩增，结果为：１７ 个引物获得了谱带清晰且重复性好的产物，扩增片段的分子量在 ２ ０００～２００ ｂｐ之间， 共检测 １０６个位点，其中多态位点数为 ３９个，占 ３６． ８ ％；平均遗传距离为 ０． ０９４１＋ ０． ０２０ ６，有 ６７个标记（占 ６３． ２％）在整个群体的 ３２个个体间表现稳定的一致性。
- 刘萍孔杰石拓庄志猛邓景耀徐怀恕韩玲玲
- 关键词：中国对虾种群RAPD技术
- 对虾一种无包涵体杆状病毒病原的PCR检测被引量：10
- 2000年
- 为建立对虾无包涵体杆状病毒的快速诊断技术，应用PCR技术分别对暴发性流行病发生前、流行中和发病后的对虾样品进行了检测．根据已克隆的对虾杆状病毒部分基因组序列而设计的引物能特异性地扩增出靶DNA片段，最低可以检测1pg的病素DNA．由典型发病症状对虾的胃、腮、肝胰腺、中肠、游泳足、肌内和心脏等器官和组织中成功地检测到病毒．不同组织和器官经扩增得到的信号强弱不同：病虾的胃扩增得到的信号最强，中肠、肌肉、心脏和游泳足次之，腮和肝胰腺信号最弱，说明病毒在不同组织和器官中数量及感染程度不同．在对虾发病前及发病后，用二次PCR还能检测表面不发病呈隐性感染状态的对虾携带的病毒；而对野生健康虾的检测结果为阴性．研究表明，PCR是检测对虾暴发性流行病快速、灵敏而准确的方法，对病毒病的早期诊断、防治和高健康对虾品种的选育具有指导意义．
- 石拓孔杰刘萍包振民韩玲玲徐怀恕
- 关键词：对虾PCR技术病原检测
