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一种海洋黑曲霉耐盐内切纤维素酶的分离纯化和酶学性质研究被引量：6: 2016年; 采用实验室从海底淤泥中筛选得到的海洋黑曲霉固态发酵生产纤维素酶,纤维素酶粗酶液经过硫酸铵分级沉淀、超滤、离子交换层析和疏水层析分离纯化后,得到了电泳纯的内切纤维素酶,酶的比活力由37.72 U·mg^(-1)提高到557.27 U·mg^(-1)。SDS-PAGE显示该内切纤维素酶的分子量约为34 kDa。考察了该酶的酶学性质,结果表明该酶的最适温度为60℃,最适pH为4.5,具有较好的热稳定性和p H稳定性。金属离子对该内切纤维素酶的酶活影响较大,Cu^(2+)、Fe^(2+)对内切纤维素酶具有一定的激活作用,Mn^(2+)、Ni^(2+)、Zn^(2+)对酶活性具有强烈的抑制作用。当NaCl浓度为40 g·L^(-1)时具有最佳酶活,在20~60 g·L^(-1)的高NaCl浓度环境下的酶活均高于不含NaCl环境下的酶活,在200 g·L^(-1) NaCl高盐浓度下,该酶尚能保持初始酶活的89%,是典型的耐盐型酶。对该酶的酶促进反应动力学进行研究发现其在pH4.5、60℃条件下米氏常数Km为11.7 mg·mL^(-1),Vmax为943.4 U·mg^(-1)。; 王红兵王荣柱陆涛姚善泾; 关键词：内切纤维素酶分离纯化耐盐纤维素酶

一种以四肽为功能配基的亲和层析介质及其制备方法: 本发明公开了一种以四肽为功能配基的亲和层析介质及其制备方法。二甲基亚砜溶液中加入抽干基质和烯丙基溴进行活化；活化基质与N-溴代丁二酰亚胺反应；将溴代醇化的基质与己二胺反应，得到氨基活化基质；依次用去离子水、无水乙醇和无水...; 姚善泾王荣柱林东强

pH和盐浓度影响磺酸基团吸附乳铁蛋白的机理被引量：6: 2014年; 磺酸基团是用来分离乳铁蛋白普遍被认可的配基,因此含有磺酸基团的层析剂是被用得最广泛的分离介质。通过对三种接有磺酸基团的层析介质,在不同pH和盐浓度时的静态吸附研究,得到了吸附的基本规律:随着pH或盐浓度的增大,吸附容量降低。利用分子模拟技术,比较了乳铁蛋白分子表面电势在不同条件时的变化,推测pH影响吸附的机理在于改变了蛋白表面氨基酸残基的质子化状态和分子表面电势,而盐浓度主要是屏蔽了蛋白和配基之间的相互作用,改变蛋白分子表面整体电势强弱,对电势分布没有明显影响。通过计算蛋白和配基之间的结合能,量化不同条件下的吸附能力,表征pH和盐浓度的影响。; 杜巧燕林东强王荣柱姚善泾; 关键词：乳铁蛋白盐浓度分子模拟结合能

一种以四肽为功能配基的亲和层析介质及其制备方法: 本发明公开了一种以四肽为功能配基的亲和层析介质及其制备方法。二甲基亚砜溶液中加入抽干基质和烯丙基溴进行活化；活化基质与N‑溴代丁二酰亚胺反应；将溴代醇化的基质与己二胺反应，得到氨基活化基质；依次用去离子水、无水乙醇和无水...; 姚善泾王荣柱林东强; 文献传递

以四肽为配基的仿生层析和抗体的分离纯化: 抗体是一类重要的生物技术药物，具有广阔的应用前景。目前，蛋白A亲和层析是抗体分离的平台技术，具有高度特异性，但是存在成本高、洗脱条件苛刻、蛋白配基易脱落等问题。寻求经济高效的抗体分离新方法，具有重要的意义。混合模式层析和...; 王荣柱; 关键词：抗体

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王荣柱