李双
- 作品数：4 被引量：17H指数：2
- 供职机构：南昌大学第三附属医院更多>>
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- 着色性干皮病D组蛋白对胰腺癌PANC-1细胞紫杉醇敏感性的影响
- 2016年
- 目的研究表明化疗药物耐药和与消化道肿瘤相关的一系列基因分子突变密切相关。文章研究野生型人剪切修复基因XPD转染人胰腺癌PANC-1细胞后对结合型紫杉醇敏感性的影响。方法将空载质粒p EGFP-N_2及重组质粒p EGFP-N_2/XPD通过瞬时转染于人胰腺癌PANC-1细胞。设正常对照组(不作任何处理)、空载质粒转染组(空载质粒p EGFPN_2转染)、重组质粒XPD转染组(重组质粒p EGFP-N_2/XPD转染)。使用RT-PCR和Western blot方法检验转染后XPD mRNA及蛋白表达;MTT实验检测结合型紫杉醇对XPD转染后PANC-1细胞增殖活性的变化;流式细胞仪检测XPD转染后PANC-1细胞在结合型紫杉醇作用下凋亡反应的差异。结果重组质粒XPD转染组中XPD mRNA表达量(9.572±0.345)和蛋白表达量(1.055±0.012)较正常对照组(1.125±0.043,0.302±0.002)及空载质粒转染组(1.273±0.057,0.378±0.004)明显升高(P<0.01);正常对照组与空载质粒转染组XPD mRNA和蛋白表达量差异无统计学意义(P>0.05)。MTT结果显示不同浓度结合型紫杉醇作用PANC-1细胞24 h后,重组质粒XPD转染组的A值均明显低于正常对照组、空载质粒转染组,差异均有统计学意义(P<0.05);正常对照组与空载质粒转染组差异无统计学意义(P>0.05)。流式细胞仪检测结果显示不同浓度结合型紫杉醇作用PANC-1细胞24 h后,重组质粒XPD转染组细胞凋亡率均明显高于正常对照组、空载质粒转染组,差异均有统计学意义(P<0.01);正常对照组与空载质粒转染组差异无统计学意义(P>0.05)。结论通过XPD转染PANC-1细胞可明显增强PANC-1细胞对结合型紫杉醇的化疗敏感性。
- 简捷刘利珍邓峰黄缘秦健斌李双
- 关键词：紫杉醇凋亡
- 人参皂苷Rg3对人结肠癌细胞株SW480增殖的影响及其作用机制被引量：12
- 2016年
- 目的观察人参皂苷Rg3对人结肠癌细胞株SW480增殖的影响,并探讨其可能作用机制。方法取对数生长期SW480细胞,分别加入含160、80、40、0μmol/L人参皂苷Rg3的储备液(分别计为A、B、C、D组)培养24 h,采用MTT法检测人参皂苷Rg3对SW480细胞增殖活性(OD值)的影响,倒置显微镜观察人参皂苷Rg3诱导SW480细胞凋亡形态学改变,流式细胞术检测SW480细胞凋亡率,RT-PCR法检测细胞间黏附分子1(ICAM-1)、闭锁蛋白(Occludin)mRNA,Western blotting法检测ICAM-1、Occludin蛋白。结果与D组比较,A、B、C组细胞OD值下降,凋亡率增加,ICAM-1 mRNA、蛋白表达降低,Occludin mRNA、蛋白表达升高(P均<0.05)。结论人参皂苷Rg3可抑制SW480细胞增殖,促进其凋亡,机制可能与ICAM-1表达下调、Occludin表达上调有关。
- 简捷刘利珍黄缘李双邓峰
- 关键词：人参皂苷RG3结肠癌细胞株SW480细胞间黏附分子1闭锁蛋白
- 靶向沉默TPX2基因可抑制人结肠癌SW480细胞的增殖和侵袭被引量：5
- 2016年
- 目的 :探讨靶向沉默Xklp2靶蛋白(targeting protein for Xenopus kinesinlike protein 2,TPX 2)基因对结肠癌SW480细胞增殖、侵袭的影响及其可能的作用机制。方法:将靶向沉默TPX2基因的重组载体p Magic4.1-sh RNA-TPX2转入结肠癌SW480细胞后,应用MTT法检测SW480细胞的增殖能力,Transwell小室法检测细胞的侵袭能力,RT-PCR和蛋白质印迹法检测SW480细胞中TPX2、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)mRNA及蛋白的表达。结果 :重组载体p Magic4.1-shRNA-TPX2转染后,SW480细胞的增殖和侵袭能力均显著低于阴性对照组(阴性对照载体p Magic4.1-sh RNA-NC转染至SW480细胞)和空白对照组(未进行任何转染的SW480细胞)(P值均<0.01);p Magic4.1-shRNA-TPX2转染组SW480细胞中TPX2、VEGF、MMP-9 m RNA及蛋白的表达水平均显著低于阴性对照组和空白对照组(P值均<0.01)。结论 :靶向沉默TPX2基因能够显著抑制结肠癌SW480细胞的增殖和侵袭,这一作用可能与VEGF和MMP-9基因的表达下调有关。
- 简捷黄缘刘利珍李双邓峰
- 关键词：结肠肿瘤血管内皮生长因子类基质金属蛋白酶9肿瘤浸润
- 重组质粒pEGFP-N2/Pim-3转染对胰腺细胞损伤的保护作用
- 2016年
- 目的 :研究重组质粒p EGFP-N2/Pim-3转染对内毒素脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)引起的大鼠胰腺AR4-2J细胞损伤的保护机制。方法:实验分为4组:A组(正常对照组),B组(5μg/m L LPS处理组),C组(空载质粒p EGFP-N2转染+5μg/m L LPS处理组),D组(重组质粒p EGFP-N2/Pim-3转染+5μg/m L LPS处理组)。流式细胞仪检测各组处理24 h后细胞凋亡情况。处理0、6、12、24 h后分别提取各组总RNA及蛋白,RT-PCR及Western blot分别检测Pim-3、细胞间黏附分子(intercellular cell adhesion molecule-1,ICAM-1)、紧密连接蛋白闭锁蛋白(Occludin)m RNA及蛋白的表达。结果 :处理24 h,各组细胞凋亡率分别为:A组(7.85±1.14)%、B组(53.13±5.73)%、C组(51.76±5.17)%、D组(21.13±4.15)%,D组细胞相对B、C组凋亡明显减少,差异有统计学意义(P<0.05);D组Pim-3表达与A、B、C组之间的差异有统计学意义(P<0.05);处理12 h后B、C、D组ICAM-1高表达,24 h达高峰,相对于A组,差异均有统计学意义(P<0.01),D组与B、C组差异有统计学意义(P<0.05);处理6 h后,B、C、D组Occludin高表达,12 h达高峰,相对于A组,差异均有统计学意义(P<0.01),D组与B、C组差异有统计学意义(P<0.05)。结论:丝/苏氨酸激酶Pim-3能够抑制胰腺细胞炎症反应和胰腺细胞凋亡,可能与上调闭锁蛋白和下调细胞间黏附分子的表达有关。
- 简捷黄缘刘利珍李双邓峰
- 关键词：细胞间黏附分子脂多糖
