王冠中
- 作品数：3 被引量：11H指数：1
- 供职机构：沈阳农业大学植物保护学院更多>>
- 发文基金：公益性行业(农业)科研专项国家自然科学基金国家烟草专卖局基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 烟草花叶病毒辽宁分离物Northern杂交检测体系的建立被引量：1
- 2017年
- 为了建立烟草花叶病毒辽宁分离物(TMV-LN)的高特异性、高灵敏度的分子杂交检测体系,从粗提纯的TMV-LN粒子中提取RNA,设计特异性引物通过RT-PCR扩增TMV-LN的CP和3'端非翻译区域,将片段连至p UC119载体获得重组质粒p UCTMV-PP,体外转录获得地高辛(DIG)标记的TMV-LN正义链RNA杂交检测探针,同时构建DNA检测探针作为对照。采用点印迹(Dot-blot)杂交和Northern杂交对比RNA探针和DNA探针对TMV-LN的检测特异性和灵敏性。检测结果表明,RNA探针和DNA探针在点印记杂交和Northern杂交中均表现出良好的检测特异性,RNA探针在检测灵敏度方面要略好于DNA探针,且点印迹杂交体系在病毒定性方面较为快捷,Northern杂交体系在病毒基因组RNA的定量方面具有明显优势。
- 李艳丽安梦楠王冠中吴元华
- 关键词：RNA探针DNA探针NORTHERN杂交
- 辣椒轻斑驳病毒辽宁分离物的鉴定及序列分析被引量：11
- 2016年
- 采用鉴别寄主、血清学及RT-PCR检测的方法对采自辽宁省葫芦岛地区的辣椒病毒进行了分离与鉴定,并将克隆得到的病毒CP基因进行测序及同源性比较.结果表明：该病毒分离物可侵染辣椒（Capsicum frutescens）产生局部枯斑、系统斑驳或花叶;局部侵染普通烟（Nicotiana tabacum）、心叶烟（Nicotiana glutinosa）、三生烟（Nicotiana tabacum. var. samsun）、矮牵牛（Petuniahybrida）产生坏死枯斑,在曼陀罗（Datura stramonium）、洋酸浆（Physalis pubescens）和苋色藜（Chenopodium amaranticolor）上引起褪绿斑;不能侵染番茄（Lycopersicon esculentum）、葫芦（Lagenaria siceraria）、甜瓜（Cucumis melo）、黄瓜（Cucumis sativus）、千日红（Gomphrena globosa）、白菜（Brassica pekinensis）、百日草（Zinnia elegans）、蚕豆（Vicia faba）和玉米（Zea mays）.辣椒病叶、病果和种子及表现症状的鉴别寄主叶片经DAS-ELISA检测均证实存在辣椒轻斑驳病毒（Pepper mild mottle virus, PMMoV）.通过RTPCR技术成功克隆获得该病毒CP基因,测序并分析其同源性表明,该分离物与GenBank 上已报道的13 个国内外PMMoV分离物同源性很高,核苷酸和氨基酸同源性均为94%-100%.将该分离物与其他13 个PMMoV分离物的CP基因序列一起构建系统发育进化树分析表明,该分离物与各亚洲分离物亲缘关系密切,并与国内各分离物可能具有相同的进化祖先.综上所述,辽宁辣椒上发现的病毒可鉴定为辣椒轻斑驳病毒辽宁分离物（PMMoV-LN）,此为辽宁辣椒生产区首次报道.由于PMMoV 具有典型的种传特性,而我国目前尚未将其列为检疫对象,这将促进病毒的快速扩展蔓延,因此应重视该病毒的危害性及对我国辣椒生产的潜在威胁,并加强其抗病育种和检验检疫工作以达到对PMMoV防控的目的.
- 李晓冬安梦楠王冠中赵秀香吴元华
- 关键词：辣椒辣椒轻斑驳病毒DAS-ELISART-PCR
- 烟草花叶病毒辽宁分离物正义链及负义链检测探针的构建
- 烟草花叶病毒（Tobacoo mosaic virus,TMV）是烟草花叶病毒属（Tobamovirus）中的一种正义链RNA病毒,可侵染38科268种植物,该病毒传播方式多样,防治较为困难,主要以化学防治为主,生物农药...
- 王冠中李艳丽安梦楠吴元华
- 文献传递
