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二十碳五烯酸抑制小鼠胆囊胆固醇结石形成的作用及分子机制被引量：1: 2016年; 目的观察二十碳五烯酸（EPA）和二十二碳六烯酸（DHA）对致结石饮食诱导的C57BL／6小鼠胆囊胆固醇结石形成的影响，并探讨其作用机制。方法50只C57BL／6小鼠随机分为正常组、模型组、模型＋DHA组、模型＋EPA组和模型＋DHA＋EPA组，每组10只。正常组喂食普通饲料，其余各组喂以致结石饮食2周，DHA或（和）EPA（70mg·kg-1·d-1）灌胃8周。造模10周后，检测各组小鼠血脂水平、胆汁中总胆固醇（TC）、磷脂（PL）以及肝脏TC含量，蛋白印迹法检测各组小鼠肝脏HMGCR、SRBI、ABCG5／ABCG8、CYP7A1和ABCB11基因蛋白表达。结果模型＋EPA组小鼠肝脏及胆汁中Tc含量分别为（0．033±0．008）mmolfg、（1．807±0．381）mmol／L，明显低于模型组的（0．048±0．006）mmol/g和（2．662±0．339）mmol／L（P值均〈0．05）。模型＋EPA组小鼠肝脏HMGCR、ABCG5、ABCG8蛋白相对表达量分别为（0．545±0．098）、（0．418±0．089）、（0．501±0．151），明显低于模型组的（1．011±0．213）、（1．037±0．276）、（1．266±0．312）（P值均〈0．05）。模型＋DHA组与模型组上述指标差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论EPA可通过降低小鼠肝脏HMGCR及ABCG5／8基因表达减少肝脏胆固醇的合成及向胆汁中的转运，降低胆汁中胆固醇的含量，抑制胆囊结石的形成，而DHA抑制胆囊结石形成的作用效果并不明显。; 赵小毅孙诚谊喻超宋健张栋; 关键词：二十碳五烯酸小鼠胆固醇结石基因

高浓度葡萄糖对人结肠癌上皮细胞Caco-2细胞胆固醇吸收的影响及机制研究被引量：1: 2016年; 目的：探讨高浓度葡萄糖对人结肠癌上皮细胞Caco-2细胞胆固醇吸收的影响，探索其作用机制。方法：采用实验研究方法。（1）CCK-8检测细胞增殖：采用CCK-8检测不同浓度（12.5、100.0、300.0、700.0、1 000.0、1 388.0 mmol/L）葡萄糖溶液作用于Caco-2细胞时，Caco-2细胞增殖率变化情况，确定葡萄糖溶液对Caco-2细胞半数抑制浓度，结合文献确定后续实验中葡萄糖溶液浓度梯度。（2）检测 Caco-2细胞胆固醇吸收量：将Caco-2细胞分为胆固醇组、胆固醇＋依折麦布（胆固醇抑制剂）组和空白对照组。胆固醇组：加入100 μmol/L胆固醇溶液和不同浓度（5.0、25.0、50.0 mmol/L）葡萄糖溶液。胆固醇＋依折麦布组：加入100 μmol/L依折麦布、 100 μmol/L胆固醇溶液和不同浓度（5.0、25.0、50.0 mmol/L）葡萄糖溶液。空白对照组：加入DMEM培养基和对应浓度DMSO。检测Caco-2细胞胆固醇吸收量。（3）Western blot检测三磷酸腺苷结合盒G8（ABCG8）、三磷酸腺苷结合盒G5（ABCG5）、尼克曼蛋白（NPC1L1）、B族Ⅰ型清道夫受体（SRBⅠ）蛋白表达：将Caco-2细胞分为葡萄糖组、葡萄糖＋依折麦布组和对照组。葡萄糖组：加入不同浓度（5.0、25.0、50.0 mmol/L）葡萄糖溶液。葡萄糖＋依折麦布组：加入不同浓度（5.0、25.0、50.0mmol/L）葡萄糖溶液和100 μmol/L依折麦布。对照组加入100 μmol/L 依折麦布。采用Western blot检测各组ABCG8、ABCG5、NPC1L1、SRBⅠ蛋白相对表达量。计量资料以±s表示，变化趋势检验采用重复测量方差分析，组间比较采用t检验。结果：（1）CCK-8检测结果显示：葡萄糖溶液浓度为12.5、100.0、300.0、700.0、1 000.0、 1 388.0 mmol/L的Caco-2细胞增殖率分别为1.380±0.043、1.238±0.072、0.736±0.035、0.336±0.021、0.316±0.020、0.288±0.010，6者比较，差异有统计学意义（F=11.019，P〈0.05）。葡萄糖溶液对Caco-2细胞半数抑; 张栋喻超赵小毅宋健周海燕罗玉梅孙诚谊; 关键词：胆石症 CACO-2细胞胆固醇

胆固醇代谢相关蛋白及相关特异microRNAs在胆固醇型胆囊结石患者血清中的表达及意义被引量：10: 2016年; 目的探讨胆固醇型胆囊结石患者和健康对照人群血清中胆固醇代谢相关蛋白,以及可能靶向ABCA1的相关micro RNAs(mi RNAs)表达差异及意义。方法选取60例胆固醇型胆囊结石患者(结石组)和60例健康对照人群(非结石组)的血清样本,采用Western blot检测胆固醇代谢相关蛋白(SREBP-2、FXR、LXR、ABCA1、ABCB11)的表达,利用生物信息学软件预测可能靶向调控ABCA1的相关mi RNAs,采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-q PCR)对相关mi RNAs的表达进行检测。结果结石组血清中SREBP-2、FXR、LXR、ABCA1、ABCB11蛋白的表达量较非结石组降低(P<0.05),结石组血清中mi RNA-26a、mi RNA-144、mi RNA-758表达较非结石组升高(P<0.05)。结论胆固醇代谢相关蛋白差异性表达及可能靶向ABCA1的相关mi RNA在胆固醇型胆囊结石的发病过程中可能发挥极为重要的作用。; 宋健喻超詹磊张宏赵小毅张栋孙诚谊; 关键词：胆固醇代谢 MICRORNAS

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张栋

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