赵秀玲
- 作品数：24 被引量：27H指数：3
- 供职机构：广西大学更多>>
- 发文基金：广西壮族自治区自然科学基金国家自然科学基金广西研究生教育创新计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 抑制小鼠Iqcf5基因表达的shRNA及其干扰重组表达载体、构建方法和应用
- 张明赵秀玲潘宏王焕景濮黎萍张鹏飞陈富
- 精子发生是一个复杂精细的过程，在此过程中存在着严格的同源群现象和周期变化规律，受众多因素的协同调控。然而，对于哺乳动物精子发生的分子事件人们依然知之甚少。近年来，受各种因素影响，越来越多的人受到不育症的困扰，其中一半左右...
- 关键词：
- 关键词：精子发生基因表达男性不育症
- 水牛合子基因组激活前后差异蛋白质组分析
- 濮黎萍陈富美姚顺陈东荣汤玉燕赵秀玲付强张明
- 水牛精子蛋白质图谱的构建及生物信息学
- 2016年
- 以水牛为研究对象,应用SDS-PAGE电泳分离和LTQ-Orbitrap高分辨率组合式质谱构建水牛精子蛋白质图谱,鉴定出了1 074个精子蛋白质。用生物信息学手段对水牛精子蛋白质进行GO分类,其中参与细胞代谢的蛋白质所占比例最大,说明了成熟精子进行着旺盛的代谢活动,为其受精等活动提供能量准备。生物信息学分析结果显示,参与翻译后修饰的蛋白质有36%,说明成熟的精子在RNA转录和翻译水平上基本处于沉默状态时,主要靠蛋白质的翻译后修饰来实现细胞的功能。本试验为水牛精子细胞增殖发育研究、提高水牛精子活力以及受精机理研究提供了新的手段和信息。
- 黄德伦付强官俊良黄愉淋陈富美王焕景赵秀玲黄凤玲梁贤威张明
- 关键词：水牛精子蛋白质组
- 小鼠Iqcf5基因干扰载体的构建及筛选
- 2016年
- 本试验旨在构建4条针对Iqcf5(IQ motif containing F5)基因的sh RNA干扰载体,并进行有效干扰靶点的筛选,为以后进一步对Iqcf5基因功能的研究奠定基础。提取成年小鼠睾丸组织的RNA,进行反转录,扩增Iqcf5基因的编码区,并将其克隆到真核表达载体HP362-PBL-PBR-CAG-m Cherry-WPRE上。设计针对Iqcf5基因的sh RNA序列,应用基因重组技术插入到p GPU6/GFP/Neo载体中,将其与Iqcf5基因的真核表达载体共转染293T细胞,进行有效干扰靶点的筛选。构建了Iqcf5基因的真核表达载体和4条针对目的基因Iqcf5的sh RNA,分别是Iqcf5-107、Iqcf5-257、Iqcf5-425和Iqcf5-500和一个阴性对照质粒,经测序鉴定正确,共转染293T细胞,经过筛选Iqcf5-257和Iqcf5-500在293T细胞中对Iqcf5基因表达的干扰效果最佳。成功构建了Iqcf5基因的真核表达载体及其sh RNA干扰载体,并在工具细胞293T中进行了有效干扰靶点的筛选,这为下一步对Iqcf5基因功能的研究奠定了基础。
- 赵秀玲潘宏濮黎萍张鹏飞王焕景张明
- 关键词：SHRNA钙调蛋白RNAI
- 水牛卵巢黄体形成和退化的差异蛋白质初步研究
- 引言/目的卵巢作为雌性动物的重要生殖器官,在卵泡成熟排卵后形成黄体(corpus luteum,CL)。黄体能够分泌孕酮维持妊娠;如果未受精,则发生退化,开始下一次的发情周期。我国南方水牛不正常的发情周期较多,发情周期长...
- 陈富美王焕景赵秀玲濮黎萍张鹏飞张明
- 精卵融合过程中关键蛋白的研究进展被引量：3
- 2016年
- 受精作用是有性生殖过程中的终极事件,精子与卵子间的融合过程是其中最关键的步骤。单倍体的精子和卵子相互识别和融合形成一个双倍有机体。尽管其潜在的分子机制还不是很清楚,但是最近的基因敲除试验已经证实精卵融合过程中需要3个必不可少的因子:位于卵母细胞上的CD9蛋白,精子上的Izumo1蛋白及其在卵母细胞上的受体蛋白Juno。缺乏其中的任何一种蛋白分子将会导致精卵融合机制紊乱。综述重点介绍了这3种精卵融合关键蛋白的最新研究进展。
- 王焕景陈富美濮黎萍赵秀玲黄愉淋张鹏飞张明
- 关键词：精卵融合CD9
- 水牛BCL2L10基因的克隆、序列分析及其在卵母细胞中的表达
- 2017年
- 本研究克隆了水牛BCL2-like 10(BCL2L10)基因序列,并用生物信息学技术分析了该序列的同源性、系统进化树、蛋白的理化性质以及高级结构。同时利用免疫荧光染色的方法检测了BCL2L10蛋白在水牛卵母细胞成熟前后的表达情况。结果表明,应用RT-PCR技术克隆得到的水牛BCL2L10基因序列全长600 bp,其中编码区长度为558 bp,共编码185个氨基酸。对该序列进行对比分析发现,水牛BCL2L10基因的核苷酸序列与野牛、牛、绵羊、小鼠、大鼠、野猪的同源性分别为99%、98%、96%、84%、81%、75%。生物进化树分析显示,水牛BCL2L10基因与牦牛、野牛的亲缘关系最近。生物信息学分析得到BCL2L10蛋白的分子量为21.6 k D,理论等电点为9.54。功能结构域预测显示BCL2L10蛋白属于BCL-2家族成员,参与细胞凋亡调控过程。免疫荧光染色结果发现,BCL2L10蛋白在水牛卵母细胞成熟过程中均有表达。
- 王焕景赵秀玲濮黎萍张鹏飞张明
- 关键词：水牛
- 一种哺乳动物胚胎性别鉴定方法
- 本发明涉及性别鉴定技术领域，特别涉及一种哺乳动物胚胎性别鉴定方法，本发明通过在Y染色体上插入荧光报道基因，通过荧光报道基因的荧光表达，准确鉴定出哺乳动物的胚胎性别，该方法简单、高效、准确、损伤小；在构建Y染色体含荧光报道...
- 张明赵秀玲左二伟陆阳清魏巍
- 文献传递
- 细胞荧光原位杂交方法
- 本发明公开了一种细胞荧光原位杂交方法，包括预处理和杂交，预处理采用75％的低渗液进行低渗处理；杂交之前进行鱼精DNA的预杂交试验，预杂交时间为1‑2h。实际使用表明，该法能够得到更为清晰、直观、准确的染色结果，实现了快速...
- 张明赵秀玲左二伟濮黎萍张鹏飞陈富美候振徐壮壮
- 文献传递
- 水牛卵巢黄体形成和退化的蛋白质表达谱构建及生物信息学分析被引量：1
- 2018年
- 本研究构建了水牛卵巢黄体形成及退化过程的定量蛋白质表达谱,从中寻找与水牛发情周期相关的重要蛋白质。为研究水牛卵巢周期性变化的分子机制提供蛋白质水平的数据支撑,进而为提高水牛繁殖效率奠定实验基础。以水牛排卵后的红体期（corpus hemorrhagicum,CH）、黄体期（corpus luteum,CL）和白体期（corpus fibrosum,CF）的卵巢作为研究对象,利用串联质谱标签（tandem mass tag,TMT）标记结合液质联用（（liquid chromatography/mass spectrometry,LC-MS/MS）的定量蛋白质组学技术,采用相关软件对得到的差异表达蛋白质进行生物信息学分析。同时对与水牛发情周期相关的重要差异蛋白质：单核巨噬细胞分化抗原（CD14）、通用转录因子Ⅱ-Ⅰ（GTF2I）、羟基类固醇（17β）脱氢酶1（HSD17B1）、U6 sn RNA相关Sm样蛋白质（LSM1）和纤溶酶原激活物抑制物（SERPINE1）进行了qRT-PCR分析验证。结果显示,共鉴定得到2 343种蛋白质,其中差异表达蛋白质有284种（差异倍数≥2.0）,初步构建了水牛卵巢黄体形成和退化的定量蛋白质表达谱。对其中的五种重要差异蛋白质（CD14、GTF2I、HSD17B1、LSM1和SERPINE1）进行qRT-PCR验证,结果有四种（CD14、HSD17B1、LSM1和SERPINE1）的qPCR结果与质谱结果相一致,仅GTF2I与质谱结果不一致,可能是由于GTF2I存在转录后调控。本研究首次从蛋白质水平对水牛卵巢排卵后的周期性变化的分子机制进行了探究,同时为其他家畜品种发情周期的研究提供了新的研究思路。
- 陈富美姚顺陈东荣徐壮壮候振濮黎萍张鹏飞赵秀玲张明
- 关键词：水牛发情周期定量蛋白质组学生物信息学
