目的观察瓜蒌皮提取物对AngⅡ诱导血管平滑肌细胞增殖的影响。方法采用MTS法检测瓜蒌皮提取物(10、20、30 mg·L-1)对血管紧张素Ⅱ(10-7mol·L-1)所致血管平滑肌细胞增殖活性的影响;Real time RTPCR法检测血管平滑肌细胞中内皮型一氧化氮合酶、原癌基因c-fos。结果 MTS检测结果示,与对照组相比,AngⅡ组A490值明显升高(P<0.05),与AngⅡ组相比,AngⅡ+EPT组A490值均明显下降(P<0.05)。Real-time RT-PCR测定结果示,AngⅡ组e NOS mRNA的表达低于对照组,c-fos mRNA的表达高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);加入EPT后,e NOS mRNA的表达高于AngⅡ组,c-fos mRNA的表达低于AngⅡ组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论瓜蒌皮提取物抑制血管紧张素Ⅱ所致的细胞增殖,其作用机制可能与降低c-fos mRNA高表达,升高一氧化氮合酶mRNA表达有关。
目的比较齐墩果酸在人和其他种属肝微粒体CYP450酶中的代谢差异。方法采用基于多重质量亏损(Multiple mass defect filter,MMDF)的四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱色谱联用仪,分析齐墩果酸经人及昆明小鼠、C57小鼠、SD大鼠、猪、牛、羊、兔肝微粒体体外代谢的产物及种属差异。利用与CYP450各亚型酶的特异性抑制剂共孵育,对比不同种属参与齐墩果酸特征性代谢产物M-469的主要代谢亚型酶。结果齐墩果酸不同种属的肝微粒体体外代谢存在明显差异。齐墩果酸特征性代谢产物M-469,在昆明小鼠的肝微粒体中生成最多,其次是C57小鼠、SD大鼠、人、猪、兔,而牛、羊体外不生成此产物。在人肝微粒体CYP450酶中,CYP3A4是齐墩果酸特征性代谢产物M-469的主要代谢酶。昆明小鼠CYP450酶中,CYP3A、CYP2E1参与了此代谢产物的生成。结论齐墩果酸在人和不同种属肝微粒体CYP450代谢中存在差异,因此,本实验将为齐墩果酸进一步代谢研究及安全性评价提供重要参考价值。
目的:观察消癌舒(XAS)及其含药血清对Hela细胞增殖和迁移的影响,并初步探讨其作用机制。方法:采用倒置显微镜观察Hela细胞形态;四唑盐(MTT)法检测Hela细胞的增殖能力;Transwell观察Hela细胞的迁移能力;酶联免疫吸附实验(ELISA)检测Hela细胞糖类抗原125(CA125)的水平;real time RT-PCR法检测Hela细胞血管内皮生长因子(VEGF)mRNA的表达。结果:经消癌舒处理后Hela细胞形态发生了改变,表现为细胞折光度下降,体积明显缩小,形状变圆,消癌舒及其含药血清均明显抑制Hela细胞的增殖,消癌舒减少Hela细胞穿过滤膜的个数,降低Hela细胞CA125水平及VEGF mRNA的表达,且与顺铂联用效果更佳。结论:消癌舒及其含药血清明显抑制Hela细胞的增殖及迁移能力,与顺铂联用作用更明显,其机制可能与降低CA125水平和VEGF mRNA的表达有关。
