蔚丹丹
- 作品数：30 被引量：75H指数：5
- 供职机构：郑州大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：南通市科技局社会发展科技计划项目国际科技合作与交流专项项目江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- miRNA干扰质粒的构建及其对肝癌HepG2细胞IGF-Ⅱ表达的抑制作用被引量：3
- 2011年
- 目的:研究miRNA干扰质粒对胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)在肝细胞癌表达的抑制作用,探讨IGF-Ⅱ在肝细胞癌治疗中的价值.方法:以人IGF-Ⅱ基因序列设计并合成4条miRNA,将miRNA插入质粒构建pcDNATM6.2-GW/EmGFP miR1-4干扰载体;筛选、转染HepG2细胞,以荧光定量PCR分析靶向肝癌IGF-Ⅱ基因表达的干扰效果;以ELISA法比较转染前后IGF-Ⅱ蛋白表达水平.结果:测序证实,成功构建了真核IGF-Ⅱ干扰质粒MR-IGF-Ⅱ-1-4,将干扰质粒转染至HepG2细胞,镜下显示转染效率50%;经荧光定量PCR扩增,沉默IGF-Ⅱ基因表达效率MR-IGF-Ⅱ-1为33%、MR-IGF-Ⅱ-2为43%、MR-IGF-Ⅱ-3为0%、MR-IGF-Ⅱ-4为3%.将其中MR-IGF-Ⅱ-2转染至HepG2细胞,在转录和蛋白水平上对IGF-Ⅱ具有较高干扰效率,分别达43.0%和43.5%.结论:成功构建了人miRNA干扰质粒,他能有效抑制HepG2细胞IGF-Ⅱ的表达.
- 姚宁华姚登福钱静董志珍邱历伟蔚丹丹
- 关键词：微小RNA质粒构建基因沉默
- 循环血单核细胞磷脂酰肌醇蛋白多糖-3 mRNA扩增对肝癌诊断与转移监测的价值
- 目的：分析肝癌患者外周血中磷脂酰肌醇蛋白多糖-3信使核糖核酸(GPC-3 mRNA)表达及对肝癌诊断与转移监测价值。方法：收集住院肝病患者外周血，分离单核细胞，制备总RNA，经逆转录合成GPC-3 cDNA，以荧光定量P...
- 董志珍姚敏姚登福蔚丹丹严晓娣陈洁严美娟
- 关键词：肝癌信使核糖核酸磷脂酰肌醇蛋白多糖-3病理诊断
- 文献传递
- sICAM-1定量检测对肝细胞性肝癌诊断与预后的临床价值分析被引量：4
- 2012年
- 目的:定量检测肝病患者外周血可溶性细胞间黏附分子-1(soluble intercellular adhesion molecule-1,sICAM-1)的表达水平,以分析血清sICAM-1浓度对肝细胞性肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)诊断及预后监测的临床价值。方法:收集74例肝病患者血清及健康对照血32份,以酶联免疫吸附法定量检测血清sICAM-1水平,分析其临床意义。结果:肝病发展过程中血清sICAM-1表达呈梯度增加,HCC患者血清sICAM-1表达显著高于肝硬化患者(P<0.05)和正常对照组(P<0.01);与有无门脉癌栓、肝外转移明显相关(P<0.05);与患者年龄、性别、HBsAg阳性与否、AFP浓度及肿瘤大小间差异无统计学意义(P>0.05)。经受试者工作曲线分析,血清sICAM-1面积为0.872,sICAM-1表达异常,有助于HCC的诊断。结论:sICAM-1过表达与HCC发生、发展相关,血清sICAM-1异常是HCC诊断和转移监测的良好标志物。
- 杨君伶姚敏蔚丹丹严晓娣陈洁姚登福
- 关键词：肝细胞性肝癌细胞间黏附分子-1
- 下调GPC-3基因转录对肝癌细胞侵袭及血管新生的抑制作用被引量：1
- 2014年
- 目的:观察以短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)下调磷脂酰肌醇蛋白多糖-3(glypican-3,GPC-3)基因转录,对抑制肝癌MHCC-97H细胞侵袭和血管新生的作用与机制.方法:将对GPC-3特异性shRNA转染肝癌MHCC-97H细胞,以荧光定量PCR和Western blot分析GPC-3 mRNA及蛋白表达;以5-ethynyl-2'-deoxyuridine(EdU)和Transwell法等评估细胞增殖、迁移和侵袭能力.结果:shRNA1转染MHCC-97H细胞,GPC-3在mRNA水平下降75.6%(t=15.473,P<0.001),蛋白表达同步下调;干预GPC-3基因转录,可抑制肝癌细胞增殖,细胞迁移与侵袭能力减低,与抗癌药物具协同作用;Wnt/β-catenin中β-catenin表达下调67.7%;Hedgehogs通路中脑胶质瘤相关癌基因1(glioma-associated oncogene 1,Gli1)表达上调53.3%;shRNA1转染72 h细胞血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达下调54.2%(t=46.746,P<0.001).结论:shRNA下调GPC-3转录,经Wnt/β-catenin和Hh信号通路抑制癌细胞迁移、侵袭和血管新生,为肝癌基因治疗潜在的分子靶目标.
- 邰伯军姚敏王理钱琦时杨蔚丹丹陆少林姚登福
- 关键词：磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3SHRNA血管新生
- 靶向GPC-3基因转录对肝癌HepG2细胞增殖与凋亡的影响
- 目的:构建人磷脂酰肌醇蛋白多糖-3（GPC-3）基因序列特异性短发夹型RNA（shorthairpin RNA shRNA）真核表达载体,筛选有效序列,探究沉默GPC-3表达对肝癌HepG2细胞的影响。方法:根据GPC-...
- 严美娟蔚丹丹姚敏严晓娣陈洁姚登福
- IGF-Ⅱ/IGF-ⅠR相关信号通路与肝细胞癌靶向治疗被引量：1
- 2011年
- 胰岛素样生长因子(insulin-like growth factor,IGF)-Ⅱ/IGFⅡ-ⅠR相关信号通路与肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)发生发展密切相关.IGF-Ⅱ活化可经IGF-ⅠR传递促有丝分裂信号,增加HCC变可能.近来研究显示靶向IGF-Ⅱ或IGF-ⅠR可明显抑制HCC细胞增殖.本文就IGF-Ⅱ和IGF-ⅠR信号通路在肝细胞癌变、转化过程中的作用及作为HCC基因治疗靶目标的研究进展进行了评述.
- 姚登福姚敏蔚丹丹
- 关键词：分子靶向肝细胞癌
- 沉默GPC-3基因质粒构建及对HepG2细胞增殖的抑制作用被引量：1
- 2012年
- 目的:构建磷脂酰肌醇蛋白多糖(glypican,GPC)-3 shRNA质粒,观察GPC-3活化干扰对肝癌(HepG2)细胞的抑制作用。方法:设计与合成多条针对GPC-3序列的shRNA,插入pGPU6/GFP/Neo载体,构建、转染HepG2细胞、筛选高效质粒,观察沉默GPC-3表达对肝癌细胞增殖的抑制作用与机制。结果:经BamHⅠ或PstⅠ酶切鉴定,证实插入pGPU6/GFP/Neo载体GPC-3 shRNA序列正确,成功构建GPC-3 shRNA干扰质粒。以脂质体介导,将GPC-3shRNA1～4分别转染HepG2细胞,shRNA1沉默GPC-3 mRNA最高效率达89.3%,可有效抑制HepG2细胞增殖,在72 h达71.1%;shRNA1干扰使HepG2细胞周期阻滞在G1期,促进癌细胞发生凋亡(65.6%)。结论:shRNA可有效干预肝癌细胞GPC-3基因转录,促进凋亡并抑制增殖,GPC-3可望成为肝癌基因治疗的靶目标。
- 蔚丹丹姚敏陈洁严晓娣邱历伟姚登福
- 关键词：肝细胞性肝癌磷脂酰肌醇蛋白多糖-3
- 肝癌组织乙型肝炎病毒复制转化生长因子-β1和胰岛素样生长因子-Ⅱ表达的关系分析
- 目的：分析肝癌组织HBV复制与转化生长因子(TGF)-β1和胰岛素样生长因子(IGF)-Ⅱ表达间的关系。方法：以自身对照法收集人HCC组织及非癌组织，以生物素标记的HBV-DNA探针检测肝癌组织中HBV-DNA;采用免疫...
- 吴玮姚登福严晓娣陈洁蔚丹丹
- 关键词：肝癌乙型肝炎病毒免疫组织化学
- 磷脂酰肌醇蛋白聚糖3异常表达与肿瘤诊断及基因治疗
- 2011年
- 肿瘤发生发展由原癌基因激活和抑癌基因失活、信号传导通路异常、细胞周期调控因子突变、抗凋亡基因激活、血管形成及对放、化疗的耐药性等多种因素共同作用形成,肿瘤的早期特异诊断与有效治疗极为重要[1-2]。
- 蔚丹丹姚登福秦呈林
- 关键词：基因治疗GPC磷脂酰肌醇蛋白聚糖肿瘤诊断
- 靶向GPC-3基因转录对肝癌HepG2细胞增殖与凋亡的影响
- 目的：构建人磷脂酰肌醇蛋白多糖-3(GPC-3)基因序列特异性短发夹型RNA (shorthairpin RNA shRNA)真核表达载体,筛选有效序列,探究沉默GPC-3表达对肝癌HepG2细胞的影响.方法：根据GPC...
- 严美娟蔚丹丹姚敏严晓娣陈洁姚登福
