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根瘤共生对紫花苜蓿耐盐碱性及有机酸含量变化的影响被引量：7: 2016年; 为研究根瘤共生对紫花苜蓿(Medicago sativa)耐碱性及有机酸含量的影响,本研究以龙牧806为材料,用200 mmol/L Na HCO_3胁迫处理正常植株与接种根瘤菌植株0、4、6、8天,分别测量根中苹果酸、柠檬酸、琥珀酸、草酸、酒石酸、乙酸的含量。结果表明,根瘤共生有效的提高了苜蓿对盐碱胁迫的耐性;正常植株在胁迫第4天时,苹果酸、柠檬酸、草酸、酒石酸的含量大幅度显著下降,而后小幅度减少,胁迫第8天时有所提高,琥珀酸则在胁迫第6天大幅度下降,后稍有增加;相对于正常植株来说,接种根瘤菌的植株,有机酸含量波动较小,草酸和酒石酸平稳减少,柠檬酸和琥珀酸随着胁迫时间延长,含量逐渐增加,胁迫第6天达到最高值,然后减少,苹果酸在胁迫第4天时含量增加,而后逐渐减少。综上所述,接种根瘤菌可减缓盐碱胁迫对植株根的伤害,共生根瘤提高苜蓿的耐碱性一部分是通过调节有机酸含量的变化实现。; 宋婷婷田璞勇月圆杨巍巍王泽伟吴限许慧慧才华; 关键词：苜蓿 NA 有机酸

丛枝菌根真菌对碱胁迫下紫花苜蓿耐碱性的影响被引量：11: 2019年; 以紫花苜蓿(Medicago sativa)龙牧806为材料,采用盆栽试验,测定接种摩西球囊霉(Glomus mosseae)后紫花苜蓿生长情况。利用碱胁迫处理5、8d相对含水量、相对电导率、叶绿素含量、丙二醛(MDA)、抗氧化酶活性、脯氨酸和可溶性糖含量等指标,分析接种丛枝菌根真菌(Arbuscular mycorrhizal fungi,AMF)对提高苜蓿耐碱性的作用。结果表明,正常情况下,接种摩西球囊霉菌苜蓿株高、根长及分支数均高于对照组,叶绿素含量、根中MDA含量,SOD、POD和CAT酶活、脯氨酸含量、可溶性糖含量均高于对照组;碱胁迫后,接种摩西球囊霉可提高紫花苜蓿根和叶中抗氧化酶(POD、SOD和CAT)活性、渗透调节物质(可溶性糖和脯氨酸)含量,降低丙二醛(MDA)含量和细胞膜透性。丛枝菌根真菌摩西球囊霉通过增强紫花苜蓿抗氧化能力,降低碱胁迫对苜蓿造成的损伤,并通过渗透调节能力提高接种苜蓿耐碱性。研究为紫花苜蓿盐碱地种植提供理论依据。; 才华董理邢易梅杨圣秋宋婷婷许慧慧; 关键词：紫花苜蓿耐碱性

蒺藜苜蓿PEPC蛋白生物信息学分析及在碱胁迫中功能的预测被引量：3: 2016年; 磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(phosphoenolpyruvate carboxylase,PEPC)是一种广泛存在于自然界中的代谢酶,在高等植物中参与光合作用的碳固定、生物合成前体的供应、p H的调控等多种生物学过程。本研究通过生物信息学方法,识别、筛选、获得蒺藜苜蓿(Medicago truncatula)PEPC(Mt PEPC)的氨基酸序列Medtr2g076670.2,并对与Medtr2g076670.2相似的25个豆科PEPC基因进行系统进化树分析。着重对4个Mt PEPCs和6个Gm PEPCs基因进行功能域分析、蛋白二级结构域预测及组织表达特异性分析,以推测蒺藜苜蓿PEPC基因的功能。结果表明,该10个基因分为两个Group分支,两个分支中存在不同的亚细胞定位信号,并且两个分支中大豆基因在地上和地下组织之间存在差异。通过蛋白相互作用的预测分析,PEPC蛋白可与苹果酸脱氢酶(malate dehydrogenase,MDH)、丙酮酸激酶(pyruvate kinase,PK)及2个未知蛋白存在相互作用;在碱胁迫下,Gs PEPCs基因与苹果酸脱氢酶基因是"共表达"基因。可以推测,PEPC对碱胁迫的反应,可能是通过调节有机酸含量实现的。通过对Mt PEPC蛋白和Gm PEPC蛋白的生物信息学分析,获得了其相应的分子生物学特征,为PEPC蛋白在碱胁迫反应中的功能提供理论依据。; 任永晶宋婷婷姜柳许慧慧才华; 关键词：蒺藜苜蓿大豆 PEPC 生物信息学碱胁迫

根瘤菌共生对紫花苜蓿耐碱能力的影响被引量：4: 2018年; 以紫花苜蓿龙牧806为试验材料,设置未接种菌(NI)和接种耐碱苜蓿中华根瘤菌CCBAU 81024(RI)两组,采用p H 8.5 100 mmol·L-1NaHCO3溶液碱胁迫处理,分别测定胁迫0、5、8 d时生长及生理指标,确定接种耐碱根瘤菌对紫花苜蓿耐碱性的影响。结果表明,正常培养条件下,RI组紫花苜蓿叶绿素和超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)酶活性、脯氨酸(Pro)和可溶性糖含量均高于NI组,且丙二醛(MDA)含量低于NI组。碱胁迫处理后,RI组与NI组植株相比,其MDA含量,相对电导率均保持在较低水平,脯氨酸积累,可溶性糖含量增加;SOD、POD、CAT表现出较NI更高的酶活。接种耐碱根瘤菌可提高紫花苜蓿耐碱性及抗氧化能力,增强渗透调节能力,降低细胞膜损伤程度。; 才华王硕董理孙娜宋婷婷杨圣秋许慧慧; 关键词：紫花苜蓿耐碱性

MsRCI2A、MsRCI2B、MsRCI2C基因超量表达对紫花苜蓿耐冷的影响被引量：1: 2021年; 以紫花苜蓿为试材,对紫花苜蓿来源的RCI2类基因MsRCI2A/2B/2C在4℃的表达差异进行分析,采用农杆菌介导的方法对紫花苜蓿进行遗传转化,研究了超量表达MsRCI2A/2B/2C基因对紫花苜耐冷性的影响,以期为培育耐冷紫花苜蓿提供参考依据。结果表明:MsRCI2A/2B/2C基因均受低温诱导,转基因苜蓿材料经4℃冷处理12 d后,叶绿素相对含量、相对电导率、丙二醛含量才发生明显变化,对冷的敏感性下降。并且4℃处理后,转基因株系较WT(野生型)积累更多脯氨酸和可溶性糖,抗氧化酶(SOD、POD和CAT)活性在低温6 d时迅速上升,响应冷胁迫更迅速。综上所述,MsRCI2A/2B/2C基因的超量表达提高了紫花苜蓿的耐冷性。; 战力峰李淳馨何凯董理许慧慧才华; 关键词：紫花苜蓿冷胁迫转基因苜蓿

从光合作用和有机酸积累角度探索转GsPPCK1和GsPPCK3基因苜蓿耐碱性增强的生理机制被引量：3: 2018年; 光合作用影响着植物的生长发育及产量,并在盐碱胁迫响应中起到积极作用。前期研究将光合途径中野生大豆来源的GsPPCK1和GsPPCK3基因转入苜蓿,所获得转基因苜蓿耐碱性提高。从光合作用和有机酸积累角度探索转GsPPCK1和GsPPCK3基因苜蓿耐碱性增强的生理机制。结果表明,碱胁迫9d后,叶绿素的相对含量下降,转基因株系P1-5、P3-8与未处理相比变化并不显著,分别下降了11.27%、13.30%,而非转基因株系的叶绿素含量下降了39.11%。转基因株系P1-5、P3-8光合速率(Pn)、蒸腾速率(Tr)、气孔导度(Gs)及胞间CO2浓度(Ci)在胁迫处理后也有下降趋势,但下降的幅度仅为非转基因植株下降幅度的1/2。光合途径中NADP-苹果酸脱氢酶、NADP-苹果酸酶、磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶、丙酮酸正磷酸二激酶、核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶等关键酶的酶活及有机酸(苹果酸、柠檬酸、草酰乙酸、磷酸烯醇式丙酮酸)含量在碱胁迫处理后均呈上升趋势,而转基因株系P1-5、P3-8的光合酶活和4种有机酸含量与非转基因对照相比上升极显著(P<0.01)。PEPC(Medtr4g079860.1)、NADP-ME(Medtr8g014390.1)、NADP-MDH(Medtr1g043040.1)、PPDK(Medtr4g118350.1)及Rubisco(Medtr4g021210.1)基因的表达呈先上升后下降趋势,转基因株系中基因的表达变化较非转基因对照更为显著(P<0.01)。由此表明,在正常情况下,GsPPCK1和GsPPCK3基因的超量表达并未影响植物的光合作用,但是在碱胁迫下,转基因苜蓿的光合作用受碱胁迫的抑制较小,这一过程可能与PEPC酶的激活有关。另外,光合中间产物有机酸含量的显著上升对维持细胞内pH值的稳定也起到重要作用。; 才华许慧慧孙娜宋婷婷任永晶杨圣秋; 关键词：耐碱性转基因苜蓿光合效率

MsRCI2A/B/C基因超量表达对紫花苜蓿耐旱性的影响被引量：1: 2022年; 【目的】分析紫花苜蓿MsRCI2A、MsRCI2B、MsRCI2C的表达差异并研究其抗旱功能,为苜蓿抗旱机制解析及分子育种奠定基础。【方法】采用qPCR的方法,分析紫花苜蓿MsRCI2A、MsRCI2B、MsRCI2C基因在20%PEG6000溶液模拟干旱条件下表达的差异,采用农杆菌介导法获得MsRCI2A、MsRCI2B和MsRCI2C基因超量表达的转基因苜蓿A12、A22、B13、B19、C2和C10,观察正常生长条件(干旱胁迫0 d)下和20%PEG6000干旱胁迫6,12 d的野生型株系WT(对照)及超量表达的转基因紫花苜蓿的表型,测定超表达苜蓿和WT的叶绿素含量、相对电导率、丙二醛(MDA)含量、抗氧化酶(超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT))活性及渗透调节系统(可溶性糖和脯氨酸含量)在干旱胁迫条件下的变化。【结果】在20%PEG6000模拟干旱条件下,MsRCI2A/B/C基因在紫花苜蓿叶和根中表达变化趋势相反,但3个基因在同一组织中的表达趋势相似。紫花苜蓿叶片中的MsRCI2A/B/C基因在干旱胁迫处理后均明显上调,其中MsRCI2A/C基因在干旱胁迫处理2 h时即极显著上升(P<0.01),而MsRCI2B的表达相对缓慢,在处理8 h时极显著上升(P<0.01)。在根中,MsRCI2A/B/C基因在干旱胁迫处理2 h时相对表达量极显著下降(P<0.01)。在正常生长条件(干旱胁迫0 d)下,6个转基因苜蓿叶绿素含量、相对电导率和MDA含量、可溶性糖含量和脯氨酸含量与野生型苜蓿(WT)相比无明显差异,但转基因苜蓿SOD、POD、CAT活性明显高于WT(P<0.05),其中转MsRCI2B/C基因苜蓿叶片中的SOD活性及叶和根中POD活性是WT的1.97~2.27倍。转基因株系A12、A22、B13、B19、C2和C10与野生型苜蓿(WT)同时进行20%PEG6000模拟干旱胁迫处理12 d后,各转基因株系的叶绿素含量极显著高于WT(P<0.01),为WT的3.00~3.46倍,而相对电导率和丙二醛含量则极显著下降了73%和55%。转基因苜蓿叶和根中的可溶性糖和脯氨酸含量及SOD、POD和CAT活性均�; 才华李淳馨丛春龙战力峰何凯董理许慧慧; 关键词：紫花苜蓿耐旱性

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许慧慧

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