程晓薇
- 作品数：7 被引量：7H指数：1
- 供职机构：扬州大学兽医学院江苏省动物预防医学重点实验室更多>>
- 发文基金：江苏高校优势学科建设工程项目教育部“新世纪优秀人才支持计划”国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生化学工程天文地球更多>>
- 禽白血病病毒衣壳蛋白表达载体的构建及应用被引量：1
- 2017年
- 为利用分段表达载体鉴定禽白血病病毒(ALV)衣壳蛋白单克隆抗体识别区域,构建ALV衣壳蛋白p27全长及分段真核表达载体。将实验室保存的pGEX-6p-1-p27质粒双酶切亚克隆到pcDNA3.1真核表达载体中,构建pcDNA3.1-p27全长表达质粒。同时设计引物,扩增p27基因1~480 bp的A片段以及241~720 bp的B片段,构建pcDNA3.1-p27A和pcDNA3.1-p27B分段表达载体,并在DF-1细胞中暂态表达,利用IFA和Western blot方法鉴定病毒衣壳蛋白单克隆抗体的识别区域。结果表明:重组质粒均能正确表达,并鉴定出两株单克隆抗体5D3和4F12的抗原识别区域均位于衣壳蛋白p27蛋白碳端161~240位氨基酸区域。研究成功构建并表达了ALV衣壳蛋白p27的全长和分段真核表达载体,并利用分段表达质粒鉴定了两株单克隆抗体的抗原识别区域,为深入研究衣壳蛋白p27的生物学功能提供了生物材料。
- 孙舒胡海胡海秦爱建程晓薇
- 关键词：真核表达载体
- 不同家禽细胞Wnt/β-catenin信号通路基础活化状态的比较
- 2019年
- 了解家禽细胞静息状态下Wnt/β-catenin信号通路的基础活化状态,为研究家禽Wnt信号通路提供细胞模型。利用激光共聚焦显微镜、绝对荧光定量PCR和Western-blot方法检测鸡胚成纤维细胞(CEF)、鸡胚肾细胞(CEK)、鸡成纤维永生化细胞系(DF-1)和鸡肝癌细胞系(LMH)中β-catenin蛋白的定位情况以及表达情况。同时使用双荧光素酶报告基因检测不同细胞加入激活剂后Wnt信号通路的活化情况。结果显示,CEF细胞中β-catenin基因和蛋白表达水平较低,主要位于细胞膜上,且对信号通路激活剂反应最为明显。DF-1细胞与LMH细胞中β-catenin的mRNA水平与蛋白水平均高于正常家禽细胞。结果表明,CEF细胞Wnt/β-catenin信号通路基础活化状态较低,是研究家禽Wnt相关信号通路的良好细胞模型。
- 乔丹丹程晓薇何倩秦爱建秦爱建
- 关键词：WNTΒ-连环蛋白信号通路
- ALV病毒衣壳蛋白p27真核表达载体的构建及鉴定
- 孙舒张杰程晓薇孔正茹顾晨曦武宗仪钱琨秦爱建
- 家禽β连环蛋白基因绝对定量PCR方法的建立及应用
- 程晓薇张丹阳张杰邵红霞秦爱建钱琨
- 江苏省某鸡场CAstV、CIAV和REV感染情况的调查及分析被引量：5
- 2017年
- 为研究鸡星状病毒(Chicken-origin astrovirus,CAst V)、鸡传染性贫血病毒(Chickeninfectious anemia virus,CIAV)和禽网状内皮组织增生症病毒(Reticuloendotheliosis virus,REV)在江苏某鸡场的流行和混合感染情况,采集该鸡场1日龄雏鸡的脏器,应用PCR和RT-PCR检测CAst V、CIAV和REV的单独感染以及混合感染情况。结果显示:1日龄雏鸡CAst V、CIAV、REV单独检出率分别为45%、37.5%和0%,其中CAst V和CIAV双重感染率为25%。表明该鸡场CAst V阳性率较高,提示养禽企业需增强对该病毒的关注。
- 姜泊宇褚珊珊武宗仪程晓薇程晓薇钱琨
- 关键词：CIAVREV
- PEG-it^(TM)纯化浓缩J亚群禽白血病病毒效果的鉴定被引量：1
- 2017年
- 为建立一种不利用超速离心法纯化浓缩J亚群禽白血病病毒(ALV-J)简便、易行的方法,利用PEG-it^(TM)病毒浓缩试剂与病毒培养细胞上清按比例混合,4℃低速离心,最后用无菌的预冷PBS进行重悬,取100μL病毒液进行TCID50的测定,同时利用电镜负染、SDS-PAGE银染及Western blot的方法对浓缩纯化后的病毒进行鉴定。结果表明:经过PEG-it^(TM)浓缩纯化病毒滴度提高10~100倍,滴度可达到1×10~7TCID50/m L;透射电镜负染观察结果表明,病毒粒子呈卵圆形,直径80~120 nm,并清晰可见囊膜上均匀密布的纤突;Western blot和银染结果显示,经过PEG-it^(TM)浓缩纯化的病毒杂蛋白明显减少,且具有良好的抗原性,能够被鸡多抗血清识别。提示在没有超高速离心机的情况下,可以使用PEG-it^(TM)纯化浓缩ALV-J,该方法使用方便,能满足大多数试验的需求。
- 程晓薇孔正茹顾晨曦武宗仪邵红霞秦爱建钱琨
- 关键词：ALV-J
- 如何不用超高速离心法浓缩纯化ALV-J病毒
- 程晓薇孙舒张杰邵红霞秦爱建钱琨
