王西西
- 作品数：1 被引量：2H指数：1
- 供职机构：青岛农业大学海洋科学与工程学院更多>>
- 发文基金：山东省农业重大应用技术创新课题博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 大菱鲆弧菌LAMP快速检测方法的建立与初步应用被引量：2
- 2015年
- 为建立大菱鲆弧菌环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测方法,本试验以大菱鲆弧菌的luxR基因为靶点设计LAMP扩增引物,通过对反应时间和反应温度的优化,成功建立了大菱鲆弧菌LAMP检测方法,并研究了该方法的特异性、灵敏度和应用性。结果显示:应用该LAMP方法在62℃反应30min,可成功检测到大菱鲆弧菌的存在。选择6种细菌菌株作为检测模板,发现除大菱鲆弧菌反应结果呈阳性外,其它均为阴性,说明该检测方法特异性良好。灵敏度检测结果显示该方法比普通PCR检测方法灵敏度高102倍。以大菱鲆作为实验动物,检测该LAMP技术的实际应用性,结果显示该方法可准确检测并鉴定出组织和血液中感染的大菱鲆弧菌,其灵敏度可达7~14CFU/反应。在反应产物中加入荧光染料后,检测结果极易用肉眼判别。本研究成功建立了大菱鲆弧菌LAMP检测方法,该方法可用于水产养殖中大菱鲆弧菌的早期诊断。
- 高志鑫张敏王西西周顺
