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S100A6 siRNA的构建及鉴定被引量：1: 2016年; 目的利用小片段干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)抑制S100A6蛋白的表达,为研究CacyBP/SIP核转位机制提供有利的工具。方法设计S100A6的siRNA序列,用脂质体LipofectamineTM 2000将siRNA转染至人结肠癌SW480细胞中,在荧光显微镜下观察转染效率,用Real-time PCR及Western blot方法检测S100A6在人结肠癌SW480细胞内的mRNA和蛋白表达。结果构建了3对S100A6-siRNA,荧光显微镜下检测转染人结肠癌SW480细胞成功;RT-PCR证明了在SW480细胞内S100A6的mRNA表达显著降低(P<0.05);Western blot证明了SW480细胞内S100A6蛋白表达显著降低(P<0.05);与S100A6si-1、S100A6si-3组相比,S100A6si-2组对S100A6的mRNA和蛋白抑制效果最明显(P<0.05)。结论成功构建了S100A6-siRNA,为CacyBP/SIP核转位机制研究提供了有利的工具。; 冯珊珊杨博刘爱琴武婧翟惠虹; 关键词：结肠癌 S100A6 SIRNA 钙周期素结合蛋白

结肠癌SW480细胞中钙离子浓度对钙周期素结合蛋白的核转位及功能学影响: 2017年; 目的观察在结肠癌SW480细胞中Ca2＋浓度对钙周期素结合蛋白（CacyBP/SIP）的核转位及增殖、凋亡的影响。方法采用免疫荧光染色观察不同浓度的钙离子载体（ionomycin）刺激结肠癌SW480细胞CacyBP/SIP的细胞内定位，噻唑蓝（MTT）法检测细胞存活率，流式细胞仪检测细胞周期与凋亡。结果在结肠癌细胞SW480中，CacyBP/SIP在细胞质表达；1 μmol/L ionomycin刺激组CacyBP/SIP表达于细胞质；2 μmol/L刺激组CacyBP/SIP表达于胞质和胞核；5 μmol/L刺激组CacyBP/SIP表达于胞核；10 μmol/L刺激组CacyBP/SIP重新分布于胞质和胞核。不同浓度ionomycin组与未处理组比较，结肠癌SW480细胞的存活率无明显影响（（P＝172.918）。不同ionomycin浓度刺激组与对照组比较，对结肠癌SW480细胞的早期凋亡率[（0.747±0.049）%]和总凋亡率[（2.383±0.068）%]均无影响（P＝79.618）。结论在结肠癌SW480细胞中，Ca2＋浓度可以影响CacyBP/SIP核转位，但不影响细胞的增殖和凋亡。; 杨博刘爱琴武婧翟惠虹冯珊珊; 关键词：结肠癌钙离子核转位

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刘爱琴