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马亚茹

作品数：9 被引量：46H指数：4
供职机构：石河子大学动物科技学院更多>>
发文基金：国家自然科学基金甘肃省科技支撑计划甘肃省农业生物技术研究与应用开发项目更多>>
相关领域：农业科学生物学更多>>

合作作者

题名
作者

文献类型

  • 9篇中文期刊文章

领域

  • 5篇农业科学
  • 4篇生物学

主题

  • 5篇基因
  • 2篇芽孢
  • 2篇芽孢杆菌
  • 2篇纤维素
  • 2篇纤维素酶
  • 2篇绵羊
  • 2篇菌株
  • 1篇烟曲霉
  • 1篇羊种
  • 1篇羊种布鲁氏菌
  • 1篇原核表达
  • 1篇真菌
  • 1篇真菌菌株
  • 1篇生物防治
  • 1篇生物信息
  • 1篇生物信息学
  • 1篇生物信息学分...
  • 1篇糖苷酶
  • 1篇套式
  • 1篇套式PCR

机构

  • 6篇石河子大学
  • 3篇甘肃农业大学
  • 1篇延安大学
  • 1篇河南科技学院

作者

  • 9篇马亚茹
  • 3篇赛务加甫
  • 3篇万学瑞
  • 3篇陈创夫
  • 3篇吴润
  • 2篇刘磊
  • 2篇王川
  • 2篇张小丽
  • 2篇贾晓蕊
  • 2篇杨润霞
  • 2篇张天亮
  • 2篇魏姣
  • 2篇王红红
  • 2篇王艳
  • 2篇吴自祥
  • 2篇徐锦凤
  • 1篇张辉
  • 1篇李超
  • 1篇李爽
  • 1篇邓振山

传媒

  • 2篇动物医学进展
  • 1篇江苏农业学报
  • 1篇甘肃农业大学...
  • 1篇草业学报
  • 1篇畜牧兽医学报
  • 1篇石河子大学学...
  • 1篇微生物学杂志
  • 1篇草原与草坪

年份

  • 2篇2018
  • 5篇2017
  • 2篇2016
共 9 条 记 录，以下是 1-9
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绵羊NYD-SP27基因慢病毒干扰载体的构建与鉴定被引量：1
2018年
构建并筛选针对干扰绵羊NYD-SP27基因的shRNA慢病毒载体。使用RNAi Target Sequence Selector软件设计并合成针对绵羊NYD-SP27基因的4条shRNA表达序列(shRNA1、shRNA2、shRNA3、shRNA4)及1条阴性对照序列(NC),分别将其连接到载体pLentiLox3.7(PLL3.7)中,得到4个shRNA干扰载体NYDSP27-shRNA及1条阴性对照载体NC-shRNA,同时将构建好的干扰载体及辅助质粒瞬时共转染至HEK-293FT细胞中,收集病毒液纯化后感染SP27-21细胞,48h后用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测NYD-SP27相对表达量,将干扰效果最好的载体用于进一步的研究中。结果表明,构建了重组慢病毒干扰载体,并成功包装成干扰慢病毒NYDSP27-shRNA-LV以及用来感染BHK-SP27-21细胞,48h后用实时定量PCR筛选出高效干扰绵羊NYD-SP27的片段NYDSP27-shRNA-1。为进一步研究NYD-SP27基因表达下调对绵羊精子发育的影响奠定了基础。
陈云蕾袁力明李娜马亚茹徐锦凤赛务加甫
关键词：慢病毒
多粘类芽孢杆菌β-葡萄糖苷酶bglA、bglB和bgl基因在大肠杆菌中的表达被引量：4
2017年
为了有效地提高β-葡萄糖苷酶的活性,本实验将多粘类芽孢杆菌(Bacillus polymyxa)β-葡萄糖苷酶bglA、bglB和bgl(bglA和bglB基因)基因分别连接在pET-28a上并在大肠杆菌C41中表达。将这3株重组菌分别命名为EA、EB及共表达菌株EAB,并将构建好的工程菌EA和EB按1∶1,1∶2,2∶1进行混合培养,分别比较单一酶组分、共表达及混合表达菌株的酶活。SDS-PAGE电泳图显示BglA和BglB的大小都为50ku,EA和EB混合培养的蛋白大小也为50ku,Bgl大小为100ku,表明BglA和BglB在体外不能形成蛋白复合物,只有在生物体内才能形成Bgl复合蛋白。酶活测定结果表明共表达Bgl与多粘类芽孢杆菌的酶活差异不显著,但显著高于其他组分酶活(P<0.05)。刚果红染色结果也表明Bgl酶活比单一酶组分的酶活明显提高。本实验为纤维素酶多组分人工组装及集成生物工艺菌种的构建奠定实验基础。
王艳马亚茹万学瑞王川吴润刘桂林刘原子吴自祥
关键词：Β-葡萄糖苷酶多粘类芽孢杆菌共表达酶活
鸡白痢沙门菌套式PCR检测方法的建立及初步应用被引量：3
2017年
为了建立一种快速、高效和简便的鸡白痢沙门菌套式PCR检测方法,根据沙门菌侵袭蛋白基因invA的高度保守区域,利用Primmer 5.0软件设计2对特异性的套式引物,以提取的沙门菌DNA为模板克隆invA基因,将其连入T载体并计算拷贝数作为套式PCR的模板,在对反应条件进行优化的基础上,建立最佳的套式PCR反应条件,确定其上、下游引物用量分别为0.3μL,套式PCR的第1次退火温度为57.4℃,第2次为53.5℃。应用该方法对已构建好的不同浓度的标准阳性质粒作为模板进行检测,其灵敏度为102拷贝数/20μL,远高于常规PCR的106拷贝数/20μL。用建立的套式PCR方法对从新疆石河子某鸡场采集的25样品进行检测,与传统的诊断方法比较符合率达95.00%。建立的鸡白痢沙门菌套式PCR检测方法具有快速、可行、特异性强、准确率高等特点,为鸡沙门菌病的早期诊断和研究提供了技术支撑。
刘志科李村院张秋雨刘洋马亚茹王月丽陈创夫
关键词：鸡白痢沙门菌套式PCR常规PCR灵敏性
绵羊NYD-SP27基因在BHK-21细胞中的稳定表达及其特征鉴定
2017年
旨在构建稳定表达绵羊NYD-SP27基因的BHK-21细胞株,对NYD-SP27基因的表达特征进行分析,为进一步研究NYD-SP27基因功能奠定基础。本研究克隆绵羊NYD-SP27基因,并将其插入到真核表达载体pDsRed1-C1中,利用猪捷申病毒2A肽(P2A)将NYD-SP27蛋白和红色荧光蛋白连接以实现共表达,将重组质粒pDsRed-P2A-Flag-NYDSP转染至BHK-21细胞中,经G418筛选获得稳定转基因细胞株,利用RT-PCR、间接免疫荧光(Indirect immunofluorescence assay,IFA)和Western blot对NYD-SP27基因的表达进行鉴定。结果表明,NYD-SP27基因稳定整合至宿主细胞基因组;NYD-SP27蛋白能够在BHK-21细胞中正常表达,分子大小约为63ku;在NYD-SP27蛋白和红色荧光蛋白翻译过程中,P2A成功自我剪切。本研究成功构建了绵羊NYD-SP27基因的真核表达载体,建立了稳定表达绵羊NYD-SP27基因的BHK-21细胞系。
马亚茹胡广东王红红加米拉徐锦凤陈创夫赛务加甫
关键词：BHK-21细胞
新疆哈萨克羊NYD-SP27基因的克隆及序列分析
2018年
本研究通过新疆哈萨克羊NYD-SP27基因的克隆及序列分析,为研究绵羊NYD-SP27表达调控机制奠定基础。根据Genbank中公布的人类的NYD-SP27基因序列设计引物,本研究以新疆哈萨克羊的睾丸组织的总DNA为模板,采用RT-PCR扩增方法对绵羊NYD-SP27基因序列进行研究。结果显示:哈萨克羊NYD-SP27基因全长为1901 bp,其中只含有1617 bp组成的开放阅读框(ORF),共编码538个氨基酸;相对分子质量61995.66,理论PI值为6.16,正电荷残基数(Arg+Lys)为61,负电荷残基数(Asp+Glu)为67;分子式C2798H4319N737O819S19;体外半衰期为30 h,不稳定系数46.96(不稳定);总平均吸水性-0.403。结论:哈萨克羊NYD-SP27基因属于PLCζ家族;同时将所得序列已提交到Gene Bank(登录号:KX905090)。
加米拉.吐尔逊陈云蕾吾热力哈孜.哈孜汗马亚茹赛务加甫
关键词：哈萨克羊基因克隆
产纤维素酶真菌菌株的分离筛选及产酶条件优化被引量：20
2016年
【目的】由于真菌的纤维素酶系较全,且可分泌至胞外,易分离,所以试验致力于筛选高产纤维素酶真菌菌株.【方法】利用羧甲基纤维素钠培养法、刚果红染色法、纤维素酶活性测定法从样品中分离筛选出产纤维素酶菌株,同时结合菌落形态观察、显微镜观察和ITS序列同源性分析进行鉴定.【结果】通过初筛,筛选出15株Hc值较大的产纤维素酶真菌菌株,再经过液体发酵复测羧甲基纤维素酶活和滤纸酶活,筛选出一株产纤维素酶活最高的菌株B-2-3,经鉴定B-2-3为烟曲霉（Aspergillus fumigatus）,其羧甲基纤维素酶活为2 341.76U/mL,滤纸酶活为398.18U/mL.经过产酶条件优化,确定其最适产酶条件为温度25℃、接种量4μL、蛋白胨0.5~0.6g/L、CMCNa 0.3~0.35g/L、pH 6.5.【结论】筛选出一株产纤维素酶活较高的烟曲霉菌株B-2-3.
魏姣万学瑞吴润畅通马亚茹刘磊张小丽张天亮杨润霞贾晓蕊
关键词：纤维素酶烟曲霉
羊种布鲁氏菌043新疆流行株WbdA基因和WbkE基因的原核表达及生物信息学分析
2017年
研究分析羊种布鲁氏菌043新疆流行株中编码脂多糖的WbdA基因和WbkE基因的原核表达以及蛋白的生物信息学信息。以043菌株为模板,构建重组质粒pET-30a-WbdA和pET-30a-WbkE,转化至E.coli BL21(DE3)菌株,IPTG诱导表达,然后通过Western Blot分析检测目的蛋白的表达,最后运用DNAMAN和TMHMM Server v.2.0软件等对WbdA基因和WbkE基因编码的氨基酸序列进行分析。结果显示,成功构建了WbdA基因和WbkE基因的原核表达载体pET-30a-WbdA和pET-30a-WbkE,并且在大肠杆菌中成功表达。生物信息学分析结果显示,043菌株的WbdA蛋白和WbkE蛋白与标准菌株16M的WbdA蛋白和WbkE蛋白的同源性高。WbdA蛋白有1个跨膜结构区,没有信号肽,20个抗原决定簇,二级结构主要由α-螺旋构成,利用Phyre2在线软件成功构建了该蛋白的3D模型。WbkE蛋白没有跨膜结构区,没有信号肽,有17个抗原决定簇,二级结构主要由α-螺旋构成,并利用Phyre2在线软件成功构建了该蛋白的3D模型。
王红红熊意马亚茹李爽张辉陈创夫
关键词：布鲁氏菌原核表达生物信息学
苹果树内生菌筛选及其对苹果腐烂病防治效果被引量：13
2016年
为了获得苹果腐烂病菌的内生拮抗菌株,并初步研究其拮抗特性以及防治效果,用平板对峙法从苹果树根部、茎部、叶片筛选到具有拮抗作用的内生菌,明确其无菌滤液的抑菌效果,并测定拮抗菌株对苹果离体果实腐烂病害的防治效果。从分离纯化的56株内生菌中筛选出12株苹果腐烂病菌的拮抗菌,其中G2、G9、J32和Y40的抑菌效果比较明显,分别为69.64%、58.93%、67.86%、67.88%,当G2和G9的无菌滤液浓度达到8%时,其抑制率最高,分别达到了78.26%、76.29%,J32和Y40的无菌滤液浓度达到8%时抑制率均达到72.33%;在苹果果实离体试验中,G2、Y40的抑制率分别达到32.56%和26.89%;所筛选的这4株菌株对小麦赤霉病菌(Fusa Hum graminearum)、番茄灰霉病菌(Botrytis cinerea)、烟草赤星病菌(Alternaria longipes)、棉花枯萎病菌(Fusarium oxysporun f.sp.vasinfectum)、稻瘟病菌(Pyricularia oryzae Cav)、黄瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.cucumerium)、西瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.niveum)均有一定的抑制作用,其中抑制率最高达79.65%;4株菌对苹果腐烂病病原菌的抑制大多数会导致病原菌菌丝畸形。试验结果表明拮抗真菌G2、G9、J32和Y40均对苹果腐烂病菌有较强拮抗作用,为进一步开展苹果主要病害的生物防治研究提供了潜在资源菌。
邓振山马亚茹何园李超汪飞贺晓龙赵瑞华
关键词：苹果树内生菌苹果腐烂病拮抗菌株生物防治
产纤维素酶细菌的分离筛选与鉴定被引量：6
2017年
通过筛选获得高产纤维素酶细菌菌株,为纤维素酶制剂研制及纤维素酶工程菌构建提供试验材料。采用刚果红平板从牛羊粪便及腐败的玉米秸秆和木屑中分离产纤维素酶菌株,以DNS法测定酶活,根据酶活复筛产纤维素酶分离菌株;观察分离菌株的形态、染色与培养特性;应用16S rDNA通用引物扩增菌株基因组DNA,测序结果提交GenBank数据库进行Blast比对分析和相似性搜索,作出复筛菌株种的鉴定。结果表明:分离获得16株纤维素酶产量较高的细菌菌株,均为革兰氏阳性菌,菌体呈短杆状、具中央芽孢,经16S rDNA序列比对分析和相似性搜索,鉴定为10株枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、6株解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。
吴自祥万学瑞马亚茹王艳吴润王川魏姣刘磊张小丽张天亮杨润霞贾晓蕊
关键词：纤维素酶RDNA枯草芽孢杆菌解淀粉芽孢杆菌
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