黄思斯
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 供职机构：中南大学更多>>
- 发文基金：国家杰出青年科学基金国家自然科学基金全球变化研究国家重大科学研究计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 泛素连接酶Smurf1不同剪接异构体的鉴定及功能研究
- 研究目的:鉴定Smurf1的两种不同剪接异构体，对其功能进行初步研究。
研究方法:Western blotting检测小鼠12种组织和9种细胞系中Smurf1(Smurf1 S和Smurf1 L)的蛋白质表达水平，...
- 黄思斯
- 关键词：组织表达谱细胞定位泛素连接酶间接免疫荧光法
- 文献传递
- 泛素连接酶Smurf1不同亚型的功能研究被引量：2
- 2015年
- Smad泛素调节因子1(Smad ubiquitination regulatory factor 1,Smurf1)是一种HECT类的泛素连接酶,它参与许多生命活动的调节,如神经发育、细胞极性、骨的重塑和肿瘤形成等.虽然目前对Smurf1的了解较为深入,但在研究过程中并未对它的两种亚型Smurf1 L和Smurf1 S(两者在一级结构上仅相差26个氨基酸残基)进行详细区分,且偏重于对Smurf1 S的研究.因此本文对Smurf1上述两种亚型的功能(特别是Smurf1 L)进行了更加深入的探索.利用RT-PCR、免疫荧光和蛋白质印迹(Western blot)等实验技术,我们从组织表达、亚细胞定位和对底物的降解能力这三个方面深入研究了Smurf1 S和Smurf1 L的不同之处.实验结果表明:一方面,Smurf1 S的组织分布比Smurf1 L更加广泛,表达量更高;另一方面,两者的亚细胞定位也有所不同,Smurf1 L在有丝分裂期定位于纺锤体,而Smurf1 S则可能主要分布于胞质中.此外,Smurf1 S对底物的降解比Smurf1 L更彻底,且前者的降解效应有剂量依赖性.上述成果对今后更为精确地研究Smurf1的功能具有重要意义.
- 汪呈黄思斯路丽顾永清张令强
- 关键词：泛素连接酶亚细胞定位
- CUL4A-DDB1细胞稳定株筛选及DNA双链断裂模型构建被引量：1
- 2012年
- 目的为了鉴定并验证CUL4A-DDB1泛素连接酶复合体中参与DNA损伤修复反应过程的1～2种关键成分在损伤识别、早期及晚期修复中的动态变化,拟构建含有串联亲和纯化(TAP)标签载体并筛选高表达CUL4A/DDB1的细胞株,建立DNA双链断裂模型。方法利用PCR获得CUL4A/DDB1基因,构建重组表达载体pNTAP-A-CUL4A/DDB1;使用顺铂和电离辐射刺激等外界刺激建立合适的DNA双链断裂细胞模型,使用G418筛选稳定表达CUL4A/DDB1的细胞株。结果与结论成功构建pNTAP-A-CUL4A/DDB1表达载体,建立合适的DNA双链断裂细胞模型,筛选得到稳定表达CUL4A/DDB1的细胞稳定株,为下一步质谱分析CUL4A-DDB1泛素连接酶在DNA损伤修复过程中的新功能打下基础。
- 黄思斯焦杨谢萍王青张令强
- 关键词：DNA损伤串联亲和纯化
