陈郁筠
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 供职机构：广州市胸科医院更多>>
- 发文基金：广东省卫生厅资助课题更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 结核分枝杆菌Ag85B基因克隆及表达质粒构建被引量：1
- 2003年
- 目的 克隆并构建编码结核分枝杆菌Ag85B分泌蛋白的重组表达质粒。方法 采用聚合酶链反应 (PCR)方法从结核分枝杆菌H37Rv基因组DNA中扩增出Ag85B基因 (978bp) ,并克隆到T载体 ,然后用双内切酶消化后 ,与同样酶消化的pGEX 4T 2连接 ,转入大肠杆菌E .coliDH5α,阳性克隆用酶切和DNA测序鉴定。结果 酶切鉴定所切下的片段大小与预计相符 ,测序结果与文献报道一致 ,证实符合表达框架。结论 成功地克隆并构建了Ag85B基因的重组表达质粒 pGEX Ag85BV。
- 刘俊华冯蝶仪陈建波陈郁筠
- 关键词：结核分枝杆菌抗原AG85B基因重组
- 结核分支杆菌Ag85B基因在大肠杆菌中的高效表达被引量：1
- 2004年
- 目的通过结核分支杆菌Ag85B蛋白编码基因在大肠杆菌中稳定表达,以获得大量纯化的Ag85B蛋白。方法采用DNA重组技术构建结核分支杆菌Ag85B基因的表达载体,双酶切和聚合酶链反应(PCR)鉴定重组子,阳性重组子转化大肠杆菌,并诱导表达外源蛋白。十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDSPAGE)鉴定Ag85B蛋白抗原在大肠杆菌中的表达,对染色的凝胶扫描,以测定目的蛋白表达水平。结果菌体蛋白经SDSPAGE,含阳性重组质粒的菌体蛋白中出现一条新蛋白带,表达量占菌体总蛋白的33%～38%。Ag85B蛋白抗原在大肠杆菌中表达方式主要是包涵体形式。结论构建的大肠杆菌重组体能高效表达结核分支杆菌Ag85B蛋白抗原。
- 罗一鲁陈建波冯蝶仪谭守勇陈郁筠
- 关键词：分支杆菌抗原重组体
