刘正玲
- 作品数：13 被引量：20H指数：3
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所更多>>
- 发文基金：云南省重点新产品开发计划国家高技术研究发展计划云南省科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学更多>>
- Cox A16抗原检测试剂研究及初步应用被引量：4
- 2013年
- 目的:建立柯萨奇病毒A组16型抗原检测酶联免疫法,为疫苗研发及病原学检查提供有效的技术手段。方法:以CA16多抗为包被抗体,以辣根过氧化物酶标记抗体为指示物建立CA16抗原ELISA检测法,对其线性、灵敏度、特异度、精密度及稳定性等指标进行分析。将所建立的方法应用到疫苗研发及病原检测中进行验证及评价。结果:建立的CA16抗原ELISA检测线性范围为1.25μg/ml～80μg/ml,R2达0.98以上;最低检测下限为1.25μg/ml,可检测到2×102CCID50～9×103CCID50活病毒;与CA16以外的10种肠道病毒无交叉反应;变异系数CV小于15%。与荧光PCR、中和法鉴定结果一致性高。结论:建立的ELISA法各项性能符合抗原检测要求,可用于CA16疫苗研发及病原学检查。
- 刘正玲李华龙润乡杨婷杨蓉岳磊谢忠平
- 关键词：手足口病肠道病毒柯萨奇病毒A组16型
- CoxA16抗原检测试剂的研制及应用
- 谢忠平李华龙润乡刘正玲罗芳宇谢天宏蒋蕊鞠
- 项目的主要内容：检测方法研究：完成了检测试剂的条件筛选及检测程序优化、经主要技术指标的验证，建立了可用于Cox A16定性及定量检测双抗体夹心的ELISA检测方法。试剂生产工艺研究：完成Cox A16抗原产品的中试生产规...
- 关键词：
- 关键词：生产工艺
- CA16疫苗候选株特异性免疫血清保护性的初步评价被引量：1
- 2016年
- 目的评价CA16 K168/8疫苗候选株免疫血清对不同CA16毒株的交叉中和能力及对致乳鼠麻痹CA16临床分离株的体内中和保护能力。方法将CA16 K168/8疫苗候选株病毒纯化液辅以弗氏佐剂经背部及侧腹部皮下多点注射免疫新西兰大白兔,制备高效价免疫血清。采用微量细胞病变法检测中和抗体效价;用中和抗体效价终浓度为32 U的特异性免疫血清对18株不同CA16临床分离毒株及15株EV71毒株进行交叉中和指数检测;选取中和抗体效价为16、32、64、128、256 U的特异性免疫血清对可致乳鼠产生明显麻痹作用的CA16 FY-18株进行体内中和保护水平检测。结果获得的兔抗CA16 K168/8血清对14株CA16毒株的中和效价为1∶1 024~1∶6 144,GMT值为1∶3 153;可于体外完全中和18株不同CA16毒株,中和指数为100~5 623.4,平均值为794.1,而对15株EV71临床分离株中和指数仅为0.32~5.62,平均值为2.2;体内中和保护水平随抗体效价升高而增加,呈量-效关系,当中和抗体效价达128 U时,可完全保护乳鼠不发生临床麻痹反应。结论 CA16 K168/8疫苗候选株特异性免疫血清体内、外试验结果表明其具有良好的免疫保护性。
- 谢忠平李华杨水芝谢天宏杨婷刘正玲岳磊宋霞
- 关键词：柯萨奇病毒A组16型免疫血清
- 一种省力型动物饲养笼
- 本实用新型公开了一种省力型动物饲养笼，包括笼体；笼体由长方体状的框架以及用于围合框架的拦网组成；框架内设有挤拉装置；挤拉装置包括拉板、拉手、活动连杆机构以及顶部滑动组件；框架上设有与拉手滑动配合的拉手轨道，拉手与拉板固定...
- 郑吟秋刘正玲陈学平潘剑成
- 文献传递
- 人呼吸道合胞病毒Long株的免疫原性初探被引量：1
- 2014年
- 目的评价人呼吸道合胞病毒(HRSV)Long株的免疫原性,为进一步的研究疫苗提供实验数据。方法将HRSV制备成纯化抗原,取40只ICR鼠,随机分为4组,分别用纯化HRSV、纯化HRSV+Al(OH)3、并设0.01 mol/L PBS、Al(OH)3对照组,0天、28天免疫小鼠,采用中和试验检测血清中和抗体,流式检测7种细胞因子。结果初免后28天,加Al(OH)3组与无Al(OH)3组抗体阳转率分别为60%和50%,抗体几何平均效价(GMT)分别为1∶4.49和1∶5.27;加强免疫后,Al(OH)3组与无Al(OH)3组小鼠血清抗体阳转率均达100%,抗体几何平均效价(GMT)分别为1∶17.15和1∶10.56,平均增长3.8倍和2.0倍;中和抗体在组间无差异,而组内初免与再免的中和抗体有统计学差异(P<0.01)。加Al(OH)3样品组与无Al(OH)3样品组,所检测7种细胞因子均诱导IL-6及TNF,与两个对照组间有统计学差异(P<0.05),而另外5种细胞因子则无明显升高。结论人呼吸道合胞病毒Long株可产生良好的免疫效应。
- 李华杨婷岳磊刘正玲姜广菊龙润乡杨蓉罗芳宇谢忠平
- 关键词：人呼吸道合胞病毒细胞因子免疫原性
- 柯萨奇病毒A组16型多克隆抗体的制备及其在检定中的应用被引量：3
- 2017年
- 目的评价CV-A16-K168免疫血清对CV-A16不同毒株的中和抗体效价,确定完全中和不同病毒量所需的最低血清量,为CV-A16疫苗毒种检定中的鉴别试验和病毒外源因子检查提供参考。方法将CVA16病毒抗原辅以弗氏佐剂以皮下多点注射方式免疫新西兰大白兔,多次免疫后取血清,采用微量细胞病变法进行中和抗体效价检测和对15株不同CV-A16毒株的中和效价检测,并用CV-A16-4V和CV-A16-10R两个毒株分析中和不同量病毒所需的抗体量。结果浓缩抗原作为免疫原获得的兔抗CV-A16血清中和抗体效价可达1∶2 048;该免疫血清对15株CV-A16不同毒株的几何平均滴度(genomic mean titer,GMT)为1∶3 118;完全中和7.5lgCCID50/ml CV-A16病毒所需的最低血清量为128U,当病毒量在4.0~7.0lgCCID50/ml时,完全中和所需的最低血清量为48U,当病毒量低于4.0lgCCID50/ml时,1U的血清即可完全中和本病毒。结论 CV-A16-K168株作为免疫原可获得高效价的抗血清;用不同毒株检测得到的抗体效价存在差异;完全中和病毒所需的最低血清量与病毒量呈正相关;病毒量与测得的血清中和效价呈负相关。
- 谢天宏杨婷宋霞李华岳磊刘正玲龙润乡杨蓉罗芳宇朱凡丽谢忠平
- 关键词：柯萨奇病毒A组16型免疫血清
- 肠道病毒71型毒株体外不同温度连续传代其生物学特性变化研究被引量：1
- 2016年
- 目的探究肠道病毒71型(EV-A71)FY23-K株在不同温度下连续传代对其生物学特性的影响,旨在获得EV-A71的减毒候选株。方法在33℃条件下进行FY23-K株克隆筛选,之后分别在33℃及35℃下连续传代,并进行病毒生长增殖特性、乳鼠致病性及在小鼠体内的免疫原性检测,对比分析其各项生物学特性的变化。结果挑选出感染性滴度较高的6个克隆,在33℃条件下连续传代后发现,其感染性滴度逐渐降低,且相同接种条件下,达到75%病变程度的收获时间随代次的增加逐渐延长,至26代后,接种至第8天细胞病变程度只达到40%。而在35℃条件下连续传代的病毒能够稳定增殖,保持良好的生长特性,毒株感染性滴度>6.5lg CCID50/ml;35℃传代后毒株的免疫原性良好,6株克隆株有4株样品的灭活抗原免疫小鼠后抗体的阳转率可达100.0%,GMT可达1∶128,最高的中和抗体效价为1∶512;活病毒免疫小鼠抗体阳转率达88.9%以上,中和抗体效价均>1∶16;传代样品攻击乳鼠后,乳鼠无发病、死亡情况,其脑、脊髓也未产生明显病理性损伤,仅在肌肉组织细胞间隙发现少量的炎性细胞浸润,在脑前额叶出现数个胶质小结。结论 FY-23K克隆株在35℃低温连续传代后有稳定的生长特性和良好的免疫原性,对乳鼠未表现出明显致病性,可作为EV-A71减毒活疫苗进一步研究的候选毒株。
- 朱凡丽李华谢天宏杨婷宋霞王玺沈冬刘正玲岳磊谢忠平
- 关键词：手足口病肠道病毒71型减毒活疫苗
- Sabin株脊髓灰质炎病毒经透析处理后病毒回收效果评价
- 2018年
- 目的采用透析法对Sabin株3个型别的脊髓灰质炎病毒收获液进行透析后的病毒回收效果评价。方法高病毒滴度时,对Sabin株Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型病毒收获液分别进行透析,比较每个型别病毒收获液透析前后的病毒感染性滴度回收率,及透析后的甲醛清除率;低病毒滴度时,选取101、100、10-1 CCID_(50)/mL 3个滴度的Sabin株Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型病毒液,分别进行透析,将相同型别及滴度的透析前后样品接种至Hep-2细胞上进行3次传代,比较透析前后细胞病变比率及病毒滴度。结果高病毒滴度时,各型别病毒收获液透析后与透析前相比,样品体积和感染性滴度均未发生较大变化(P>0.05),透析后甲醛清除率达99%以上。101 CCID_(50)/mL低病毒滴度时,各型别病毒3次传代均能100%引起细胞病变;100 CCID_(50)/mL低病毒滴度时,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型病毒第1次传代引起细胞病变比率分别为66%、33%和33%,第2、3次传代均能100%引起细胞病变;10-1 CCID_(50)/mL低病毒滴度时,3个型别病毒3次传代均不能引起细胞病变。所有细胞病变后检测病毒滴度均在6.0 lgCCID_(50)/mL以上。结论 Sabin株3个型别的病毒收获液经透析后,活病毒的回收率较高,基本无损失,透析法可作为该病毒的纯化方法。
- 赵恒蔡秋龙袁梅李娜李娅娴杨佳刘正玲张晓丽蔡路奎易力
- 关键词：感染性滴度
- CoxA16抗原检测试剂研究及初步应用
- 柯萨奇病毒A组16型(Coxsackievirus A 16，CoxA 16)是引起儿童手足口病（Hand，Foot and Mouth Disease，HFMD）的主要病原之一。大多研究显示HFMD重症及死亡病例多由肠...
- 刘正玲
- 关键词：手足口病柯萨奇病毒检测试剂病理特征
- 文献传递
- 慢性肝病患者血清HA、LN、TNF-α及IL-6的水平变化及意义被引量：1
- 2006年
- 目的探讨慢性肝病患者血清透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)在肝病发展过程中的含量变化及临床意义。方法用放射免疫法(RIA)检测150例慢性肝病患者和80例正常对照者血清HA、LN、TNF-α、IL-6的含量。结果各组慢性肝病患者血清HA、LN、TNF-α、IL-6的含量明显高于正常对照组(P<0.01),肝病患者各组间比较也有明显差异(P<0.05,0.01)。结论检测血清HA、LN、TNF-α、IL-6的含量变化对探讨慢性肝病的诊断、治疗和预后具有重要意义。
- 刘建华娄树航刘正玲
- 关键词：慢性肝病层粘连蛋白
