您的位置： 专家智库 > >

刘奇

作品数：2 被引量：7H指数：2
供职机构：广州医科大学更多>>
发文基金：国家自然科学基金更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

合作作者

文献类型

  • 2篇中文期刊文章

领域

  • 2篇医药卫生

主题

  • 2篇胸苷
  • 2篇胸苷磷酸化酶
  • 2篇尿苷
  • 2篇脱氧
  • 2篇脱氧氟尿苷
  • 2篇细胞
  • 2篇磷酸
  • 2篇磷酸化
  • 2篇磷酸化酶
  • 2篇结肠
  • 2篇结肠癌
  • 2篇氟尿苷
  • 2篇肠癌
  • 1篇毒作用
  • 1篇转染
  • 1篇细胞毒
  • 1篇细胞毒作用
  • 1篇细胞活性
  • 1篇细胞株
  • 1篇联合干扰素

机构

  • 2篇广州医科大学

作者

  • 2篇张继民
  • 2篇王绮雯
  • 2篇刘奇
  • 1篇叶钿均
  • 1篇方耿

传媒

  • 1篇中华肿瘤杂志
  • 1篇中华普通外科...

年份

  • 2篇2015
共 2 条 记 录，以下是 1-2
全选 清除 导出
排序方式：
转染胸苷磷酸化酶基因联合干扰素α2a增强5＆#39;-脱氧氟尿苷对结肠癌细胞株的细胞毒作用被引量：2
2015年
目的 利用慢病毒载体将胸苷磷酸化酶（TP）基因转染人结肠癌细胞株LOVO,然后应用干扰素-α2a（INF-α2a）处理转染前后细胞,分别测定5＇-脱氧氟尿苷（5＇-DFUR）和5-氟尿嘧啶（5-FU）对LOVO抗肿瘤效应的影响.方法 构建包含TP基因的慢病毒载体,转染结肠癌细胞株LOVO,以流式细胞技术和免疫荧光法检测在第5代LOVO中的转染效率;加INF-α2a培养24h后分别应用RT-PCR和Wester blot检测细胞的TP mRNA和TP蛋白表达;MTS法检测5＇-DFUR和5-FU对各组细胞的半数抑制浓度（IC50）;高效液相色谱法检测各组细胞转化5＇-DFUR为5-FU的量.结果 转染TP基因的效率达95％.LOVO＋INF-α2a组的TP mRNA表达是LOVO组的1.87倍,而LOVO-TP组和LOVO-TP＋ INF-α2a组TPmRNA表达则比LOVO组分别增加了18.56倍和59.61倍（P＜0.01）.LOVO-TP＋ INF-α2a组和LOVO-TP组蛋白表达水平比LOVO组分别增加242.23倍和197.69倍（P＜0.01）.5＇-DFUR对LOVO-TP组细胞的IC50值仅为LOVO组细胞的37.2％,而LOVO-TP＋INF-α2a组的IC50则是LOVO组的18.2％.LOVO-TP组在加入100、200、400 μmol/L5＇-DFUR的培养基中检测的5-FU浓度比LOVO组分别增高了26.13％、33.23％、32.95％,而LOVO-TP＋ INF-α2a组比LOVO组分别增高了49.94％、61.66％、72.14％. 结论 转染TP eDNA能够明显提高LOVO细胞的TP mRNA及TP蛋白的表达水平,而INF-α2a则进一步增强这种上调作用.增高的TP表达使细胞外5＇-DFUR转化为5-FU含量增加,明显提高5＇-DFUR的细胞毒性.
刘奇王绮雯张继民方耿
关键词：胸苷磷酸化酶氟尿苷
慢病毒转染胸苷磷酸化酶基因增强5’-脱氧氟尿苷抗结肠癌细胞活性被引量：6
2015年
目的探讨5’-脱氧氟尿苷（5’-DFUR）和氟尿嘧啶（5-Fu）对人结肠癌细胞株HT29和LS174T转染胸苷磷酸化酶（TP）基因前后抗癌效应的变化。方法构建包含TP基因的慢病毒载体，转染结肠癌细胞株HT29和HLS174T。传代5代后，以流式细胞术检测转染效率。免疫组织化学染色和Westernblot检测转染TP基因前后HT29和LS174T细胞中TP蛋白的表达，逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）法检测细胞中TPmRNA的表达水平，四唑氮化合物法检测5’-DFUR和5-Fu对转染TP基因前后细胞株的半数抑制浓度（IC50），高效液相色谱（HPLC）法检测HT29和LS174T在细胞转染rrP基因前后转化5’-DFUR为5-Fu的水平。结果转染TP基因的HT29和LS174T细胞传代5代后，转染效率稳定在约95．0％。转染TP基因的HT29和LS174T细胞中TP表达阳性，而野生型细胞和仅转染病毒载体细胞中TP表达阴性；Westernblot结果显示，HT29和HLS174T细胞中’rP蛋白的表达明显增强。RT-PCR结果显示，转染TP基因的HT29和LS174T细胞中TPmRNA的相对表达水平分别为8．45±0．15和2615．02±253．97，与野生型细胞比较，差异均有统计学意义（均P〈0．01）。5’-DFUR对转染TP基因的HT29-TP细胞和野生型细胞的IC50分别为（14．33±0．74）μmol／L和（707．66±5．66）μmol／L（P〈0．05）；对转染TP基因的LS174T—TP细胞和野生型细胞的IC50分别为（0．59±0．11）μmol／L和（239．20±21．83）μmol／L（P〈0．05）。5-Fu对转染TP基因的HT29-TP细胞和野生型细胞的Ic50分别为（5．42±0．75）μmol／L和（14．19±0．97）μmol／L（P〈0．05）；对转染TP基因的LS174T—TP细胞和野生型细胞的Ic。分别为（4．41±0．96）μmol／L和（16．42±2．12）μmol／L（P〈0．05）。转染TP基因后的HT29和HLS174T细胞培养基中，则检出大量转化的5-Fu，较转染前分别增加了12．2～23．6倍，差异均有统计学意义（均P〈0．01）。�
叶钿均王绮雯张继民刘奇
关键词：胸苷磷酸化酶转染
全选 清除 导出
共1页<1>
聚类工具0