任兰
- 作品数:3 被引量:6H指数:2
- 供职机构:重庆医科大学附属儿童医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- siCBP慢病毒降低大鼠原代海马神经元乙酰化组蛋白表达被引量:1
- 2015年
- 本研究目的为构建携带针对大鼠环磷酸腺苷反应元件结合因子的结合蛋白(CBP)基因的siRNA重组慢病毒,感染原代海马神经元并检测其对乙酰化组蛋白表达的抑制作用。本文构建了4种siCBP,并检测其对神经元中CBP表达的抑制作用,选择效果最好的一种检测神经元中HAT活性及乙酰化组蛋白Ac-H3、Ac-H4的表达。酶切及测序鉴定证实siCBP正确克隆至慢病毒质粒中,4种siCBP感染原代海马神经元后CBP mRNA和蛋白表达有不同程度降低,效果最佳的GR806对神经元的HAT活性及Ac-H3、Ac-H4表达均有显著抑制作用。本研究为后续应用siCBP阐明CBP依赖的组蛋白乙酰化对海马区学习记忆功能调节的相关分子机制提供了实验工具。
- 侯娜丽吴小凤任兰郭敏毕杨刘友学陈洁黄鸿眉李廷玉
- 关键词:慢病毒载体海马神经元组蛋白乙酰化
- 孕期边缘型维生素A缺乏对新生鼠RARα、Src和NMDAR1表达的影响被引量:3
- 2015年
- 目的探讨孕期边缘型维生素A缺乏(MVAD)对新生鼠海马中视黄酸核受体α(RARα)、肉瘤基因Src和N-甲基-D-天门冬氨酸受体1(NMDAR1)表达的影响。方法构建孕期维生素A正常(VAN)和MVAD大鼠模型(VAN组和MVAD组);分离培养新生鼠原代海马神经元,免疫荧光染色鉴定;采用real-time PCR和Western blotting检测新生鼠海马组织及体外培养的原代海马神经元中RARα、Src和NMDAR1的mRNA和蛋白表达;利用钙影像仪检测原代海马神经元钙兴奋性。结果免疫荧光染色显示,分离培养的新生鼠原代海马神经元95%表达神经元标志物神经元特异性烯醇化酶(NSE);MVAD组新生鼠海马组织和原代海马神经元中RARα、Src、NMDAR1的mRNA和蛋白表达水平明显低于VAN组(P<0.05);MVAD组新生鼠海马神经元的钙兴奋性明显低于VAN组(P<0.05)。结论孕期MVAD会降低海马RARα、Src和NMDAR1的表达,可能与孕期MVAD影响幼鼠的学习记忆功能有关。
- 陈丽君任兰刘祖银李廷玉陈洁张萱
- 关键词:孕期边缘型维生素A缺乏
- 海马细胞胞浆RARα表达对大鼠学习记忆功能的影响被引量:2
- 2017年
- 目的探讨海马细胞胞浆视黄酸受体(retinoic acid receptor,RAR)α蛋白表达对大鼠空间学习记忆功能的影响。方法 SD大鼠采用完全随机化分组方法分为Morris水迷宫(Morris water maze,MWM)训练组(n=6)和未训练组(n=6),检测海马组织RARα和GluR1表达水平。分别将AAV-control sh RNA和AAV-RARαsh RNAs海马定位注射SD大鼠后,检测其学习记忆功能及海马组织RARα和GluR1表达水平变化。体外利用神经生长因子(neuron growth factor,NGF)诱导PC12细胞成熟分化,检测RARα和GluR1表达水平、胞内钙活性及静息膜电位。结果水迷宫训练组大鼠海马组织RARα和GluR1总蛋白和胞浆蛋白表达水平均较未训练组显著增加(P<0.01)。海马定位注射2周后,Morris水迷宫检测发现AAV-RARαsh RNAs组大鼠学习记忆功能较对照组明显减弱(P<0.05),同时海马RARα和GluR1总蛋白和胞浆蛋白表达水平也明显下降(P<0.01)。经NGF诱导后的PC12细胞静息膜电位更接近于神经元静息膜电位(P<0.01),RARα和GluR1总蛋白和胞浆蛋白表达水平较对照组明显增高(P<0.01),胞内钙活性明显增强(P<0.05)。结论海马细胞胞浆RARα蛋白表达与学习记忆能力呈正相关,在调节突触可塑性中发挥重要作用。
- 吴小凤任兰侯娜丽杨亭何慕兰谷燕黄鸿眉陈洁李廷玉
- 关键词:海马细胞GLUR1学习记忆功能