李佳佳
- 作品数：6 被引量：15H指数：2
- 供职机构：中山大学孙逸仙纪念医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省医学科学技术研究基金中央高校基本科研业务费专项资金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 免疫纳米微粒靶向胰腺癌细胞输送siRNA的方法研究被引量：1
- 2014年
- 目的:构建一种向胰腺癌细胞安全、高效输送siRNA的免疫纳米载体。方法:检测纳米载体IONP-PEI(非靶向组)及其与siRNA复合物的表征;通过琼脂糖凝胶电泳检测siRNA结合力、MTS法检测细胞活力和流式细胞术检测转染率以确定其复合siRNA的最佳N/P比值;细胞免疫荧光和普鲁士蓝染色观察scFvCD44v6偶联IONP-PEI的靶向纳米载体(靶向组)在细胞内分布;流式细胞术、荧光显微镜观察、real-time PCR和Western blotting检测靶向组和非靶向组的转染率和转染siKRAS后的干扰效果。结果:IONP和PEI的最适质量比为0.75;纳米载体复合siRNA的最佳N/P比值为20;IONP-PEI/siRNA复合物的电位为(21.73±8.07)mV,粒径为(51.3±2.2)nm。荧光显微镜显示,非靶向组和靶向组转染后均在细胞内,靶向组的转染率为(89.75±1.81)%,高于非靶向组的(59.87±4.52)%,且靶向组的荧光强度高于非靶向组。靶向组的KRAS mRNA的相对表达量为(34.02±6.15)%,低于非靶向组的(51.09±6.70)%;Western blotting显示靶向组的KRAS蛋白表达量低于非靶向组。结论:非靶向组和靶向组均能够将siRNA转染进细胞内,且靶向组具有更高的转染效率和更好的干扰基因表达效果。本课题构建的scFvCD44v6-IONP-PEI是一种高效、安全和靶向识别胰腺癌细胞的免疫纳米载体。
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- 关键词：胰腺肿瘤纳米微粒基因治疗靶向
- 肿瘤分期及不同治疗方式对胰腺癌患者生存期的影响被引量：10
- 2018年
- 目的探讨影响胰腺癌患者生存期的相关因素。方法回顾性分析广州中山大学孙逸仙纪念医院、中山大学附属肿瘤防治中心、广东省人民医院共3家医院2004年至2016年间1620例确诊为胰腺癌患者的病例资料,采用寿命表法及Log-rank检验分析TNM分期、手术治疗、姑息化疗、术后辅助化疗对胰腺癌患者生存时间的影响。结果所有胰腺癌患者的中位生存期为7.15个月。TNMⅠ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期患者的中位生存期分别为12.50、10.12、9.56、5.43个月,差异有统计学意义(P=0.001)。非手术治疗患者中位生存期为6.10个月,行根治性手术患者为13.67个月,差异有统计学意义(P=0.001)。未化疗患者中位生存期为5.55个月,行姑息化疗患者为7.58个月,差异有统计学意义(P=0.001)。行单纯根治性手术患者中位生存期为12.38个月,术后行辅助化疗患者为14.50个月,差异无统计学意义(P=0.561)。结论早期诊断胰腺癌从而进行根治性手术治疗是延长患者生存期的重要举措,失去手术机会的患者行姑息性化疗可在一定程度上改善临床预后。
- 谢锐杰曾林涓练国达陈少杰李佳佳陈茵婷陈燕珠陈燕珠张力吴莉莉刘建化
- 关键词：胰腺肿瘤肿瘤分期化学疗法
- TIMP1与EFEMP1在直肠癌中的表达水平及预后意义被引量：3
- 2020年
- 目的运用TCGA数据库,分析组织金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP1)在直肠癌中的表达情况,及与直肠癌预后的关系。分析与TIMP1高表达组与低表达组差异基因的分子功能及生物学功能。分析TIMP1与EFEMP1的关系,EFEMP1与直肠癌预后的关系。方法下载TCGA数据库中直肠癌相关数据,分析TIMP1在癌旁组织与直肠癌组织中的表达差异。分析不同临床分期患者的TIMP1表达水平。Kaplan-Meier生存曲线分析TIMP1表达量与直肠癌患者总体生存时间(OS)和无瘤生存时间(PFS)的关系。根据TIMP1表达水平,将直肠癌病人分为TIMP1高表达与低表达组,分析两组差异基因。对差异基因进行富集分析及通路分析,从而探索TIMP1相关基因的功能。寻找与TIMP1密切相关的基因,分析其与TIMP1的相关性,分析其与直肠癌预后的关系。结果与癌旁组织比较,TIMP1在直肠癌组织中呈高表达,Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期和Ⅳ期患者的TIMP1水平比对照组高。TIMP1表达水平越高,患者总体生存时间与无瘤生存时间越短,预后越差。基因富集结果显示,TIMP1高表达组与低表达组的差异基因,大多参与细胞黏附,维持细胞外基质稳定性等生物学过程。通路分析结果显示,差异基因在功能上与参与上皮-间质转化(EMT)的基因存在密切关联。其中含表皮生长因子的纤维蛋白样细胞外基质蛋白1(EFEMP1)基因与TIMP1呈正相关,EFEMP1表达越高,直肠癌患者总体生存时间和无瘤生存时间越短,预后越差。结论TIMP1在直肠癌中高表达,与预后呈负相关。TIMP1与EFEMP1呈正相关;EFEMP1基因在直肠癌中与预后呈负相关。
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- 关键词：TIMP1EMT直肠癌预后
- 顺铂诱导急性肾损伤差异基因的分析和鉴定被引量：1
- 2022年
- 目的:分析与鉴定顺铂诱导急性肾损伤(Cisplatin induced acute kidney injury,Cis-AKI)的关键差异基因。方法:选取公共基因表达数据库(Gene Expression Omnibus,GEO)中Cis-AKI大鼠的微阵列测序数据集进行分析,通过R软件中的limma包分析Cis-AKI的差异基因(Differentially expressed genes,DEGs),对差异基因进行基因的本体论(Gene Ontology,GO)分析、京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)富集分析。使用MCODE模块和CytoHubba模块筛选蛋白质互作网络(Protein-Protein Interaction Networks,PPI)中的关键差异基因。结果:与对照组相比,Cis-AKI组共有119个DEGs,其中上调基因62个,下调基因57个。DEGs主要富集在细胞周期和昼夜节律等通路上。ARNTL、CLOCK、CRY1、DBP、PER3、NR1D1、CCNG1、FOS、BTG2和AEN基因被鉴定为是Cis-AKI中的关键差异基因。这些关键差异基因主要富集在p53信号通路、细胞周期和昼夜节律等相关通路。结论:利用生物信息学方法对Cis-AKI差异表达基因的分析,鉴定出ARNTL、CLOCK、CRY1、DBP、PER3、NR1D1、CCNG1、FOS、BTG2和AEN等基因是Cis-AKI中的关键差异基因。
- 韦肖娜吴剑平张瑞李佳佳甘言刚杨琼琼
- 关键词：顺铂急性肾损伤生物信息学差异表达基因
- 通过酸敏四肽构建载吉西他滨免疫纳米微粒的方法
- 2018年
- 通过酸敏四肽构建靶向载吉西他滨(gemcitabine,Gem)免疫纳米微粒,为载药纳米合成提供新思路。Gem和IONP(iron oxide nanoparticles)通过酸敏四肽链接,形成Gem-IONP-NPs;将其与CD44v6单链抗体(single chain antibody fragment,scFv)偶联,形成scFv-Gem-IONP-NPs。高效液相色谱仪检测Gem释放,细胞免疫荧光验证抗体偶联,MTS法检测Gem、Gem-IONPNPs和scFv-Gem-IONP-NPs细胞杀伤能力,流式细胞学检测各组细胞凋亡情况,皮下移植瘤模型验证各组体内抑瘤作用。结果表明:纳米微粒在肿瘤组织酸性环境下释放更多Gem,细胞免疫荧光证实抗体偶联成功,细胞毒性及凋亡细胞增加、移植瘤重量降低证实靶向组杀伤作用强于非靶向组,具有统计学差别(P<0.05)。酸敏四肽偶联吉西他滨及单链抗体,可成功制备胰腺癌靶向的免疫纳米微粒,增强抗瘤作用。
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- 关键词：消化系统疾病胰腺癌CD44V6吉西他滨
- 人永生化胰腺星形细胞系的构建及其功能的验证
- 2021年
- 目的构建人永生化胰腺星形细胞(PSCs)系并探讨其生物学功能。方法采用outgrowth方法提取人原代胰腺星形细胞(hPSCs),慢病毒感染方法导入SV40LT基因和hTERT基因,嘌呤霉素筛选稳定高表达两个基因的细胞(im PSCs),qRT-PCR和Western bolt方法检测表达水平;CCK8法、核型分析、免疫荧光、体内成瘤实验检测im PSCs生长曲线,染色体数目,胶原基质蛋白表达和有无恶性表型转化;共培养方法、CCK8法、细胞划痕、迁移侵袭方法检测imPSCs促瘤作用。结果hPSCs呈多角形和梭形,慢病毒感染的im PSCs,显微镜下有亮绿色荧光;im PSCs细胞高表达SV40LT基因和hTERT基因;im PSCs生长曲线呈典型的“S”型,染色体数目增多,体内不能成瘤,表达α-SMA、Collagen I、Fibronectin,具有PSCs的生物学功能和特点;其与胰腺癌细胞共培养后,明显促进肿瘤生长,与人原代PSCs功能相当。结论采用慢病毒转染SV40LT基因和hTERT基因可成功构建人胰腺星形细胞永生化细胞系,为胰腺星形细胞本身及胰腺癌微环境相关研究提供实验材料和模型。
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- 关键词：胰腺癌胰腺星形细胞永生化细胞系
