王俊芳 作品数:20 被引量:81 H指数:5 供职机构: 南京医科大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 南京医科大学科技发展基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 环境科学与工程 更多>>
骨髓基质干细胞和神经生长因子悬液移植对脊髓损伤修复的影响 被引量:15 2006年 目的研究骨髓基质干细胞(BMSCs)移植联用神经生长因子(NGF)对脊髓损伤修复的治疗作用。方法用改良Allen法制成SD大鼠脊髓损伤动物模型(共32只),1周后分别将DMEM、BMSCs、NGF和BMSCs+NGF移植入脊髓损伤部位即制成四组(每组8只),移植1、2个月后分别采用神经核蛋白(NeuN)抗体、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)抗体和神经丝蛋白(NF)抗体进行免疫荧光染色观察移植的BMSCs的存活及分化情况、损伤部位神经纤维的再生情况。HE染色观察脊髓损伤处空洞面积的改变情况。同时采用BBB运动评分观察大鼠运动功能恢复情况。结果移植1、2个月后,部分移植细胞呈NeuN和GFAP阳性,同时实验组可见明显的神经纤维再生。脊髓损伤处的空洞面积明显减小,差异有显著性意义(P<0.05),BBB评分结果比对照组均有明显增高,差异有显著性意义(P<0.05)。在BMSCs+NGF组上述改变更加显著。结论BMSCs可在脊髓损伤处分化为神经元和神经胶质细胞,BMSCs和NGF能够减小脊髓损伤处的空洞面积,促进受损轴突的再生和运动功能的恢复,两者联合应用在脊髓损伤修复治疗中具有协同作用。 王俊芳 方煌 罗永湘 陈安民 胡卫国 孙成群关键词:脊髓损伤 骨髓基质干细胞 神经生长因子 人前软骨干细胞体外分离培养及鉴定的实验研究 被引量:1 2009年 目的探讨体外分离、培养人前软骨干细胞(PSCs)的可行性,分析其表型特点,为相关的实验研究奠定基础。方法采用酶消化法从流产胎儿干骺端中收集细胞,用免疫磁性分选技术分离出前软骨干细胞,体外扩增培养,用流式细胞术、免疫组化、免疫荧光、RT-PCR等方法鉴定纯化后的PSCs。结果从流产胎儿干骺端中成功培养出人前软骨干细胞,细胞表面表达成纤维生长因子受体-3(FGFR-3)标记物,细胞生长迅速。结论在体外培养条件下可以从流产胎儿干骺端中分离培养出较高丰度的前软骨干细胞。 王俊芳 夏仁云 方煌 陈安民 李锋 尹德龙 程浩关键词:前软骨干细胞 细胞培养 可吸收钉板系统治疗踝关节骨折 被引量:5 2015年 目的 探讨应用可吸收钉板系统治疗踝关节骨折的疗效. 方法 对2012年12月至2013年12月20例踝关节骨折的患者资料进行回顾性分析,男14例,女6例;年龄21 ~52岁,平均33.2岁;左踝8例,右踝12例.三踝骨折7例,内外踝骨折10例,单纯内踝骨折3例.均采用Inion可吸收钉板系统治疗.术后定期随访,应用美国足踝外科协会(AOFAS)踝-后足功能评分标准评定患足功能;观察术后并发症发生的情况. 结果 20例患者均顺利完成手术,连续X线检查未见骨折复位丢失,骨折愈合时间平均为3个月,无骨折延迟愈合或不愈合;患足AOFAS踝-后足功能疗效评定:优15例,良5例,优良率为100%;2例患者出现局部皮肤感觉障碍,1例患者术后6个月出现切口局部迟发性炎性反应.结论 合理选择手术适应证,应用可吸收钉板系统治疗踝关节骨折并发症少,无需二次手术取出内固定物,疗效可靠. 王俊芳 王琼 张成玉 程力 顾晓峰关键词:踝关节 骨折 骨板 永生化人前软骨干细胞株的构建 被引量:2 2010年 背景:前软骨干细胞体外培养增殖能力有限,但永生化细胞株可以提供大量性状稳定的永生化细胞,并且猿肾病毒40大T抗原基因(simian virus40large tumor antigen,SV40Tag)是较为常用且有效的体外永生化细胞的基因片段之一。目的:以SV40Tag转染的人前软骨干细胞构建永生化人前软骨干细胞株。方法:采用酶消化法及免疫磁珠筛选技术分离纯化人胚胎前软骨干细胞。利用脂质体介导基因转染技术将含有SV40Tag的质粒pCMVSV40T/PUR转染原代胚胎前软骨干细胞,以未转染细胞作阴性对照。阳性克隆扩大培养,观察细胞形态学以及传代复苏情况,计算细胞存活率和群体倍增时间,绘制细胞生长曲线。以免疫荧光细胞化学技术检测永生化人前软骨干细胞成纤维生长因子受体3,以RT-PCR检测永生化人前软骨干细胞及人前软骨干细胞中SV40Tag和成纤维生长因子受体3表达。结果与结论:贴壁培养的永生化人前软骨干细胞形态与原代人前软骨干细胞形态无明显差别。传代、冻存、复苏对人永生化前软骨干细胞的存活率无影响,第6,10代人前软骨干细胞的存活率降低(P<0.01)。与第6,10代人前软骨干细胞相比,永生化人前软骨干细胞增殖较旺盛,群体倍增时间短、增殖率高(P<0.01)。第2代永生化人前软骨干细胞成纤维生长因子受体3染色阳性,成纤维生长因子受体3的RT-PCR结果显示在约400bp处有一特异形扩增条带,SV40Tag的RT-PCR结果显示在约560bp处有一特异形扩增条带,未转染的原代细胞未见条带。提示以免疫磁珠筛选技术及脂质体转染技术成功构建了SV40Tag永生化人前软骨干细胞株。 尹德龙 陈安民 郭风劲 王俊芳 程浩关键词:永生化 软骨组织工程 脉冲电磁场对免疫磁性分选人前软骨干细胞增殖功能的影响 被引量:4 2009年 目的研究脉冲电磁场对免疫磁性分选人前软骨干细胞(PSCs)增殖功能的影响。方法采用酶消化法从流产胎儿下肢股骨干骺端中收集细胞,选用免疫磁性分选技术分离出PSCs;经体外扩增培养后采用流式细胞术、免疫组化、免疫荧光、RT—PCR等技术鉴定纯化后的PSCs。采用50Hz 1mT脉冲电磁场间断刺激纯化后的PSCs,并绘制细胞生长曲线,采用MTT法测定细胞增殖活性,采用流式细胞术检测细胞周期及细胞凋亡情况。结果从流产胎儿干骺端中成功培养出细胞表面表达成纤维生长因子受体-3(FGFR-3)标记物的人PSCs;免疫磁性分选系统能有效分离纯化PSCs;PSCs经脉冲电磁场刺激4d和6d后,发现能明显促进细胞增殖功能(P〈0.05),其S期细胞数量百分比较对照组显著增高(P〈0.01),细胞早期凋亡率、晚期凋亡率及总凋亡率均较对照组明显降低(P〈0.05)。结论免疫磁性分选系统能有效分离、纯化PSCs,脉冲电磁场刺激能显著提高体外培养人PSCs增殖功能并抑制细胞凋亡。 王俊芳 夏仁云 方煌 陈安民 尹德龙 程浩关键词:前软骨干细胞 细胞培养 脉冲电磁场 单切口Wiltse入路微创经椎间孔椎间融合术与后路椎间融合术治疗复发性腰椎间盘突出症的对比研究 被引量:1 2022年 目的比较单切口Wiltse入路微创经椎间孔腰椎椎体间融合术(minimally invasive transforaminal lumbar interbody fusion,MIS-TLIF)与腰椎后路椎间融合术(posterior lumbar interbody fusion,PLIF)治疗复发性腰椎间盘突出症的临床疗效。方法回顾性分析2016年1月至2018年10月我科手术治疗的44例复发性腰椎间盘突出症病人的临床资料。采用PIPELINE通道下单切口Wiltse入路MIS-TLIF手术治疗的23例纳入MIS-TLIF组,采用PLIF手术治疗的21例纳入PLIF组。记录手术时间、术中出血量、住院时间、手术前后疼痛视觉模拟量表(visual analogue scale,VAS)评分、Oswestry功能障碍指数(Oswestry disability index,ODI)、肌酸激酶值、并发症及末次随访椎间融合情况。结果44例均顺利完成手术并定期随访,MIS-TLIF组随访时间为(16.91±3.37)个月,PLIF组随访时间为(16.81±3.04)个月。MIS-TLIF组手术时间、术中出血量、术后第2天肌酸激酶值均低于PLIF组,差异有统计学意义(P<0.05)。所有病例术后的VAS评分、ODI指数均明显低于术前,差异有统计学意义(P<0.05);MIS-TLIF组术后下床时VAS评分低于PLIF组,差异有统计学意义(P<0.05)。MIS-TLIF组出现2例硬膜撕裂,2例一过性神经根损伤;PLIF组出现4例硬膜撕裂,2例一过性神经根损伤。末次随访时,按照Bridwell融合评价分级,MISTLIF组Ⅰ级9例,Ⅱ级11例,Ⅲ级3例;PLIF组Ⅰ级7例,Ⅱ级11例,Ⅲ级3例。结论与PLIF相比,单切口Wiltse入路MIS-TLIF治疗复发性腰椎间盘突出症具有创伤小、恢复快、并发症少的优点,但在长期随访中,两者在疼痛、功能恢复及融合效率等方面基本一致。 李丁 江涛 王烨 秦佳霖 顾晓峰 王俊芳跟骨骨折术后伤口并发症相关因素的Logistic回归分析 2018年 目的探讨跟骨骨折术后伤口并发症相关因素。方法回顾分析2013年01月-2015年12月行跟骨骨折切开复位内固定术91例。选取术前白蛋白水平、Sanders分型、切口选择、术中拉钩方式、是否使用人工骨或异体骨植骨、手术时间、伤口缝合方式、术后是否引流作为相关因素。使用二元Logistic回归分析。结果术前白蛋白水平大于30g/L,手术时间小于1.5h,伤口缝合采用Allgower-Donati缝合方式可减少跟骨术后伤口并发症的发生,差异有统计学意义(P<0.05)。结论术前维持患者白蛋白水平,减少手术时间,使用Allgower-Donati缝合伤口,可减少跟骨骨折术后伤口并发症。 李丁 王烨 王俊芳 江涛 顾晓峰关键词:跟骨骨折 切口并发症 内皮细胞中剪切型XBP1的过表达对动脉粥样硬化形成的影响 2012年 目的探讨血管壁内皮细胞中剪切型XBP1的过表达对动脉粥样硬化形成的影响。方法从产后的健康新生儿脐带获取脐静脉内皮细胞,脐静脉内皮细胞传代至第3代后,以不同浓度(10mg/L,20mg/L)的氧化胆固醇(7-酮基胆固醇,7-KC)温育脐静脉内皮细胞,应用Western Blot的方法,检测脐静脉内皮细胞中剪切型XBP1的蛋白表达水平,凋亡蛋白Caspase3的活性,应用流式细胞学的方法检测脐静脉内皮细胞的凋亡率和继发性细胞坏死阳性率。结果 随着7-KC温育浓度的增加,脐静脉内皮细胞中剪切型XBP1的蛋白表达水平增加,Caspase3的活性增加,脐静脉内皮细胞的凋亡率和继发性细胞坏死阳性率增加。结论血管壁内皮细胞S-XBP1的表达可能会激活凋亡途径,使内皮细胞发生凋亡,启动AS的形成。 王琼 王俊芳 杨燕 陈国千关键词:动脉粥样硬化 人脐静脉内皮细胞 黄韧带骨化研究热点及趋势的可视化分析 2025年 背景:既往认为黄韧带骨化在人群中罕见发生,随着研究深入,发现其发病率逐渐上升,这引起大量学者的研究兴趣。目的:通过检索科学引文索引数据库核心集自1999年以来的有关黄韧带骨化的研究成果,使用文献计量学方法对数据进行可视化分析,回顾黄韧带骨化的研究历史,指示重要文献,梳理研究热点,为学者寻找研究方向提供思路。方法:以Web of Science核心集数据库为主,搜索并筛选黄韧带骨化相关论文,使用VOSviewer 1.6.19和CiteSpace 6.2.R6软件对年度发文量、研究国家、机构、被引文献、期刊、作者和关键词等进行可视化分析。结果与结论:①共纳入347篇文献,自1999年发文量呈螺旋上升,中国研究较日本起步晚,但是发文量后来居上,北京大学是发文量最多的机构,北京大学的陈仲强教授是发文量最多的学者。②被引用最多的10篇文献中5篇都与黄韧带骨化的手术治疗有关。③去除与研究主题直接相关的关键词,综合词频和中介中心性的结果发现,“胸椎脊髓病”“硬膜骨化”“微创手术”“后纵韧带骨化”处于领域研究的核心地位。④关键词聚类分析显示,黄韧带骨化的临床表现和手术治疗在疾病的研究中占比较大。⑤关键词时间线图及关键词突现分析显示,“微创手术”作为关键词出现在2015年前后,是突现强度最高的关键词,也是突现开始时间最晚的关键词,2019年开始受到学者广泛关注,关键词“硬膜骨化”的突现尚未结束。⑥黄韧带骨化的手术治疗一直处于研究前沿,微创手术方式的开发和研究、黄韧带骨化继发硬膜骨化的研究是该领域的研究热点。 徐强 秦佳霖 连泽双 王傲廷 李丁 王烨 王烨关键词:黄韧带骨化 骨化 文献计量学 可视化分析 CITESPACE 通滞苏润江胶囊治疗膝骨性关节炎89例 被引量:5 2008年 目的:探讨通滞苏润江胶囊治疗膝骨性关节炎(OA)的疗效。方法:89例OA患者,按Kellgren-Law-rance的X线分级标准,分为三组:Ⅰ级患者为A组(26例),Ⅱ级患者为B组(48例),Ⅲ级及以上患者为C组(15例),每组分别给予口服通滞苏润江胶囊6粒,bid、疗程3个月。观察治疗前后临床症状的改善情况,应用磁共振成影(MRI)检测关节软骨结构改变情况,应用中医氧分压传感针测定治疗前后局部组织氧分压的变化。结果:MRI检查显示,Ⅰ级、Ⅱ级患者软骨磨损出现明显好转与减少(P<0.05),Ⅲ级及以上患者差异无统计学意义(P>0.05)。而治疗后A、B组的局部氧分压较治疗前明显增高,差异有统计学意义(P<0.01),而C组的局部氧分压变化不明显,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:通滞苏润江胶囊能通过改善局部微循环,增加局部氧供给,改善局部组织代谢达到早期控制症状、改善关节功能、保护关节软骨磨损和促进软骨的修复。 王俊芳 夏仁云 李光辉关键词:通滞苏润江胶囊 膝关节骨关节炎 氧分压