田瑞敏
- 作品数：22 被引量：80H指数：6
- 供职机构：广东省中医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省中医药管理局基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 益母草碱激活p62/Nrf2/HO-1信号通路抑制肾小管上皮细胞铁死亡的作用机制被引量：20
- 2023年
- 为探讨益母草碱(leonurine,Leo)对erastin诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2细胞)铁死亡的保护作用及其潜在机制,在体外构建erastin诱导的HK-2细胞铁死亡模型,检测Leo对铁死亡细胞活力、细胞状态、铁死亡相关指标及相关信号通路蛋白的影响。首先,体外培养HK-2细胞,CCK-8法检测10、20、40、60、80、100μmol·L^(-1)的Leo对正常HK-2细胞活性的影响,以此确定Leo的安全给药剂量范围;用铁死亡经典诱导剂erastin诱导铁死亡细胞模型并筛选出合适的造模浓度;CCK-8法检测Leo(20、40、80μmol·L^(-1))及阳性药铁死亡抑制剂ferrostatin-1(Fer-1,1、2μmol·L^(-1))对铁死亡模型细胞活性的影响,同时在相差显微镜下观察细胞形态学的变化。其次,通过Western blot法检测核转录因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)的入核激活情况,并筛选后续机制研究的最佳浓度;进一步用透射电镜观察铁死亡发生的特征性显微形态学改变,应用流式细胞术检测活性氧(reactive oxygen species,ROS)变化,使用还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)测定试剂盒检测GSH含量。最后,采用Western blot法定量检测各组谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)、通路蛋白p62及Nrf2下游蛋白血红素加氧酶1(heme oxygenase 1,HO-1)的表达,探讨Leo对HK-2铁死亡调控作用的具体机制。结果显示,Leo在浓度为10~100μmol·L^(-1)时对正常HK-2细胞活性无影响,表明该浓度范围的药物对细胞无明显毒副作用;HK-2细胞活性随着铁死亡诱导剂erastin浓度的增高而降低,5μmol·L^(-1) erastin能够显著诱导HK-2细胞发生铁死亡;与模型组相比,20、40、80μmol·L^(-1)的Leo呈剂量依赖性提高HK-2细胞活性,并且能有效改善细胞形态;80μmol·L^(-1) Leo能显著上调HK-2细胞核中Nrf2的表达。进一步研究表明,Leo可以显著改善erastin造成的铁死亡特征性显微结构损伤,抑制细胞内ROS的释放,升高GSH含�
- 吴爱君吴爱君黄丽华陈乃清王晓婉黄丽华毛炜黄清明徐鹏黎创
- 关键词：益母草碱肾小管上皮细胞P62
- 从水通道蛋白角度探讨活血利水法治疗急性肾损伤的内在机制被引量：13
- 2022年
- 急性肾损伤(AKI)是一种以肾功能快速恶化及代谢废物蓄积为特征的严重临床综合征,中医学认为“水、湿、瘀、毒”是其发生、发展的关键病机,应用活血利水法清除互结之水湿、瘀血、浊毒是中医治疗AKI的重要原则。水通道蛋白(AQPs)是肾脏水液代谢的重要分子机制之一,同时也深度参与了AKI发生、发展过程,并且与AKI的预后密切相关。AQPs是大量活血利水方药的关键作用靶点之一。从AQPs与AKI核心病机“水、湿、瘀、毒”的内在关系出发,探讨活血利水治疗AKI的现代科学内涵,为临床防治AKI提供思路。
- 陆智昇徐鹏胡天祥黎创黎创黄丽华王晓婉黄丽华田瑞敏
- 关键词：急性肾损伤水通道蛋白活血利水法
- 基于网络药理学探讨益肾化湿颗粒治疗慢性肾小球肾炎的机制被引量：2
- 2021年
- 目的基于网络药理学探讨益肾化湿颗粒治疗慢性肾小球肾炎的有效成分、潜在靶点及通路,并阐述其作用机制。方法通过传统中药系统药理学数据库和分析平台(TCMSP),建立益肾化湿颗粒有效成分与靶点数据库。利用人类基因数据库(GeneCards)、人类孟德尔遗传综合数据库(OMIM)、遗传药理学与药物基因组学数据库(Pharm GKB)、治疗靶标数据库(TTD)和药物作用靶点数据库(DrugBank),筛选慢性肾小球肾炎相关基因及靶点。利用蛋白质相互作用数据库(STRING)进行蛋白质-蛋白质相互作用分析,筛选蛋白互作(PPI)网络得到核心基因。利用Cytoscape软件构建“关键活性成分-核心靶基因”网络。最后,利用基因本体(GO)数据库进行功能富集分析,利用京都基因与基因组百科全书(KEGG)数据库进行信号通路分析。结果筛选出258个中药活性成分靶基因,2143个慢性肾小球肾炎靶基因,132个治疗慢性肾小球肾炎的益肾化湿颗粒活性成分靶基因。其中,核心靶基因分别是原癌基因FOS、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK8、MAPK3、MAPK14、MAPK1)、原癌基因JUN等。177个益肾化湿颗粒有效活性成分与治疗慢性肾小球肾炎相关。GO功能富集分析提示,益肾化湿颗粒主要参与11种分子功能、10项生物学过程。KEGG通路富集分析显示,益肾化湿颗粒治疗慢性肾小球肾炎主要涉及糖基化终末产物及其受体(AGE-RAGE)、肿瘤坏死因子(TNF)、白介素17(IL-17)、低氧诱导因子-1(HIF-1)、Toll样受体等信号通路。结论益肾化湿颗粒可通过槲皮素、柚皮素、山奈酚、黄芩素等有效成分,调节原癌基因等靶点,介导FOS、MAPK、AGE-RAGE、HIF-1等相关通路,从而影响机体的免疫调节、抗炎、抗氧化等过程,发挥治疗慢性肾小球肾炎作用。益肾化湿颗粒的多成分、多靶点、多通路的整体性调节作用和潜在目标,为今后深入探寻机制与应用提供了研究基础。
- 胡天祥黄贵锐毛炜毛炜徐鹏黎创谢晨
- 关键词：慢性肾小球肾炎网络药理学靶点
- “去宛陈莝”理论视角下膜性肾病湿瘀证的辨治阐释被引量：8
- 2021年
- 膜性肾病是成人肾病综合征的常见病理类型,其病机为本虚标实,以脾肾亏虚为本,水湿、瘀血为标。本文以膜性肾病的“湿证”、“瘀证”为切入点,基于“去宛陈莝”理论探讨膜性肾病以“通”为则的治疗原则,进而提出膜性肾病在治疗的早期就应积极祛除体内郁积之水湿、化除体内郁久之积血,使气血津液流通如常,促进膜性肾病的早期缓解。
- 刘娟徐鹏徐鹏梁星黎创包崑
- 关键词：膜性肾病湿证瘀证
- 免疫包被法纯化胚胎大鼠脊髓前角运动神经元
- 目的探讨脊髓前角运动神经元(SMNs)分离、培养过程,建立了一种高效、稳定的脊髓前角运动神经元分离、纯化及培养方法。方法取胎龄14-16d的SD大鼠胚胎的脊髓组织,采用差速贴壁、免疫包被法分离并纯化出脊髓前角运动神经元,...
- 陈树东田瑞敏陈美惠侯宇
- 关键词：脊髓运动神经元
- 文献传递
- 免疫包被法纯化胚胎大鼠脊髓前角运动神经元
- 目的 探讨脊髓前角运动神经元(SMNs)分离、培养过程，建立了一种高效、稳定的脊髓前角运动神经元分离、纯化及培养方法。方法 取胎龄14-16d的SD大鼠胚胎的脊髓组织，采用差速贴壁、免疫包被法分离并纯化出脊髓前角运动神经...
- 陈树东田瑞敏陈美惠侯宇
- 关键词：脊髓运动神经元
- 尿酸性肾病大鼠模型建立的研究被引量：4
- 2022年
- 目的建立合理、稳定的尿酸性肾病大鼠模型,为筛选及研究治疗尿酸性肾病提供病理模型。方法实验大鼠随机分为3个造模组和正常组。造模组分别予以750 mg/kg氧嗪酸钾联合150 mg/kg低剂量尿酸(M-A组)、750 mg/kg氧嗪酸钾联合300 mg/kg中剂量尿酸(M-B组)、750 mg/kg氧嗪酸钾联合600 mg/kg高剂量尿酸(M-C组),正常组(Control组)予以0.3%羧甲基纤维素钠(100 g/mL),连续灌胃4周后检测血尿酸、血肌酐、尿素氮、甘油三酯、胆固醇等指标的变化以及肾的病理学改变。结果与正常组比较,3个模型组的血尿酸明显高于正常组(P<0.01,P<0.05,P<0.05);M-B组、M-C组的血肌酐显著升高(P<0.05,P<0.01);M-B组的甘油三酯明显低于正常组(P<0.05);肾病理评分M-B组、M-C组的肾病理评分明显高于正常组(P<0.01);Masson染色形态学显示,3个模型组与正常组比肾损伤明显(P<0.05,P<0.01,P<0.01)。免疫组化炎症CD68结果显示,与正常组比,3个模型组表达量增加(P<0.05,P<0.01,P<0.01);E-Cadherin表达与正常组相比,M-B、M-C组表达量明显降低(P<0.01);α-SMA表达与正常组相比,3个模型组表达量增加(P<0.05,P<0.01,P<0.01)。结论氧嗪酸钾(750 mg/kg)联合中剂量尿酸(300 mg/kg)可作为构建尿酸性肾病大鼠模型较为理想的方法。
- 严美霞霍帅田瑞敏田瑞敏黎创徐鹏陈达豪黎创毛炜
- 关键词：氧嗪酸钾尿酸尿酸性肾病动物模型
- 益母草碱调控水通道蛋白减轻急性肾损伤
- 2025年
- 目的从水通道蛋白(AQP)角度探讨活血利水中药益母草活性成分益母草碱对急性肾损伤(AKI)的作用及机制。方法将40只C57BL/6小鼠随机分为正常组、模型组及益母草碱低、中、高剂量组,每组8只。除正常组外,各组小鼠通过腹腔注射顺铂构建AKI模型;药物组预给药3天,低、中、高剂量组分别每日晨予以20、40、80 mg/kg益母草碱灌胃,连续7天;空白组与模型组予以等体积的纯水灌胃。造模72 h后取材,检测小鼠血肌酐与尿素氮水平,以筛选最佳剂量;HE染色观察肾脏病理变化;免疫组化检测肾组织中AQP各亚型(AQP1~4)的位置及相对表达;Western Blot法检测肾组织中AQP1~4蛋白表达水平。结果与正常组比较,模型组小鼠的肌酐和尿素氮水平升高(P<0.05)。肾脏病理染色显示,模型组的肾小管发生局灶性病变,部分小管细胞腔面刷状缘脱落,细胞扁平,而益母草碱治疗组较模型组病变明显减少。与正常组比较,模型组小鼠AQP1、AQP2、AQP4蛋白表达均降低(P<0.01,P<0.05)。与模型组比较,益母草碱高剂量组肌酐、尿素氮水平降低,AQP1、AQP3蛋白表达均升高(P<0.01,P<0.05)。结论益母草碱可以降低AKI小鼠的肌酐和尿素氮水平,减轻肾脏病理损伤,其机制可能与调控AQP密切相关。
- 黄丽华黄丽华徐鹏王晓婉徐鹏吴爱君黎创毛炜吴爱君
- 关键词：急性肾损伤活血利水益母草益母草碱水通道蛋白中药
- 雷公藤内酯三醇的快速安全制备方法
- 本发明公开了雷公藤内酯三醇(结构如式(Ⅰ)所示)的快速安全制备方法，具体如下：在pH 3.0～5.0或pH 7.0～9.0的磷酸缓冲溶液中，以式(Ⅱ)所示化合物为原料，在密闭环境下微波加热至120～160℃下水解反应25...
- 刘博刘旭生徐鹏周文韩晓东毛炜徐方方刘敬功李援朝杨祎琦邓金宝邓远辉吴利兰田瑞敏陆金健张玉琴
- 文献传递
- 低毒雷公藤新多苷、其制备方法及其应用
- 本发明公开了一种低毒的雷公藤新多苷，由雷公藤多苷经过化学炮制、并添加雷公藤内酯三醇后得到。本发明还公开了该低毒的雷公藤新多苷在医药中的应用。本发明的雷公藤新多苷能有效缓解肾病综合征的肾脏病理损伤及蛋白尿的产生，改善机体炎...
- 刘博毛炜刘旭生徐鹏韩晓东周文徐方方刘敬功李援朝杨祎琦邓金宝吴利兰吴云山陈伟英田瑞敏陆金健张玉琴
- 文献传递
