卢利宁
- 作品数：4 被引量：3H指数：1
- 供职机构：天津科技大学食品工程与生物技术学院更多>>
- 发文基金：“十一五”国家科技支撑计划国家科技重大专项国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 大肠杆菌L-组氨酸生物合成途径的改造及其对工程菌L-组氨酸产量的影响被引量：1
- 2011年
- 改造大肠杆菌L–组氨酸生物合成途径,以提高L–组氨酸的产量.用NTG诱变大肠杆菌M-17(SGr),依次赋予其2–噻唑丙氨酸(2-TA)和组氨酸氧肟酸盐(HisHx)遗传标记,再以突变株M-18(SGr+2-TAr+HisHxr)基因组为模板,扩增组氨酸操纵子基因,构建出重组质粒pUC118-his-operon,将重组质粒导入突变株M-18(SGr+2-TAr+HisHxr)得到工程菌E.coli M-19(SGr+2-TAr+HisHxr/pUC118-his-operon).根据zwf和prs基因序列分别合成引物进行PCR扩增,PCR产物与载体pSTV28连接,构建重组质粒pSTV28-zwf、pSTV28-prs和pSTV28-zwf-prs,将重组质粒分别转化至工程菌E.coli M-19,摇瓶发酵测定重组工程菌L–组氨酸的产量.摇瓶发酵结果显示,L–组氨酸产量与对照株相比,工程菌E.coli M-19提高了4.5倍,双质粒系统重组工程菌E.coli MZH-19、E.coli MPH-19和E.coli MZPH-19分别提高了5.14、5.78、8.43倍.
- 魏伟刘倩卢利宁谢希贤
- 关键词：L-组氨酸大肠杆菌摇瓶发酵
- 操纵子前导区的修饰及PRPP合成途径的加强对大肠杆菌积累L-组氨酸的影响被引量：3
- 2012年
- 目的:基于转酮酶基因缺失菌株MG1655-ΔtktA,研究启动子替换L-组氨酸操纵子前导区及6-磷酸葡萄糖脱氢酶基因zwf、6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶基因gnd、PRPP合成酶基因prs的过表达对大肠杆菌产L-组氨酸的影响。方法:通过Red重组系统用T5启动子替换L-组氨酸操纵子前导区;构建gnd和zwf串联表达载体gnd-zwf-pSTV28,prs表达载体prs-pQE30。通过摇瓶发酵,考察上述改造对大肠杆菌积累L-组氨酸的影响。结果:测定结果显示,改造菌株的发酵液中均能实现L-组氨酸积累,平均分别为MG1655-ΔtktA-PT5,60.12 mg/L;MG1655-ΔtktA-PT5(prs-pQE30),66.47mg/L;MG1655-ΔtktA-PT5(zwf-gnd-pSTV28),89.69 mg/L;MG1655-ΔtktA-PT5(prs-pQE30,zwf-gnd-pSTV28),111.56 mg/L。结论:L-组氨酸操纵子前导区的修饰使菌株合成L-组氨酸的能力大大增强,而氧化戊糖磷酸途径的加强和PRPP合成酶活性的提高能够进一步提高产量。
- 卢利宁程永松谢希贤徐庆阳陈宁
- 关键词：L-组氨酸操纵子启动子PRS
- 组氨酸产生菌的诱变育种及筛选方法
- 在工业生产中,谷氨酸棒杆菌已经广泛用于氨基酸的生产.通过传统诱变来直接解除相应通路的调控,从而增加茵株的氨基酸产量,这在工业生产中发挥着重要的作用.用诱变的方法,筛选结构类似物抗性,能够解除终产物对菌株通路的抑制.本研究...
- 程永松刘倩卢利宁徐庆阳谢希贤陈宁
- 关键词：L-组氨酸发酵工艺诱变育种
- 文献传递
- 两种前处理方法提取辣椒中辣椒碱的最优工艺研究
- 2012年
- 以辣椒为原料,分别用纤维素酶乙醇提取法和超声波乙醇提取法对辣椒中的辣椒碱进行了提取并研究了两种工艺的最优工艺参数。实验结果表明:酶法提取的最优工艺条件为:酶解液初始pH5.5,酶量9mg/g,酶解时间1h,酶解温度40℃,此条件下辣椒碱的提取率为0.795%;超声波辅助提取最优条件为温度70℃,乙醇浓度70%,超声波功率60W,料液比1:11,此条件下辣椒碱的提取率为1.271%。
- 张百刚刘晓风卢利宁
- 关键词：辣椒碱纤维素酶超声波
