冯娜
- 作品数：5 被引量：40H指数：3
- 供职机构：甘肃农业大学动物医学院更多>>
- 发文基金：甘肃省高等学校基本科研业务费项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 猪支气管败血波氏杆菌外膜蛋白OmpQ基因的克隆表达及多抗血清的制备被引量：1
- 2018年
- 为研究猪源性支气管败血波氏杆菌外膜蛋白OmpQ的功能及免疫原性，本研究参照GenBank中支气管败血波氏杆菌S798株的外膜蛋白OmF·Q基因序列设计引物，通过PCR扩增技术获得OmpQ基因，测序后进行同源性分析，并将其克隆至pET-28a（＋）载体，构建重组质粒pET-OmpQ，转化大肠杆菌Transetta（DE3），经IPTG诱导表达纯化目的蛋白免疫昆明小鼠制备多克隆抗体，Western blot分析其免疫原性。结果显示，表达蛋白相对分子质量大小约为36000，且以包涵体的形式存在。间接ELISA和Western blot结果表明，表达产物具有较好的免疫原性。研究结果为支气管败血波氏杆菌外膜蛋白OmpQ的后续生物学功能研究奠定基础，并为支气管败血波氏杆菌的快速诊断提供数据支持。
- 宁建刚冯娜肖敏高翔温峰琴包世俊邢小勇胡永浩
- 关键词：支气管败血波氏杆菌多克隆抗体
- 牛源肺炎克雷伯氏菌的分离鉴定及遗传进化分析被引量：27
- 2016年
- 为了对兰州市榆中县某奶牛场犊牛疑似肺炎克雷伯氏菌感染病例进行确诊,本研究采集病死犊牛的脏器组织并从中分离到1株革兰阴性短杆菌,进而对分离菌进行了生化鉴定、16S r RN A鉴定及khe基因鉴定,在此基础上,完成了分离菌的致病性试验、耐药性分析及主要毒力基因的遗传进化分析。结果显示,除H2S试验外,分离菌生化特性均符合肺炎克雷伯氏菌的生化反应特性,其16S r RNA及khe基因序列与G enB ank中肺炎克雷伯氏菌株之间的同源性均高达99%,因此,可将分离菌确定为肺炎克雷伯氏菌,并将其命名为YZ2015。动物试验及耐药性试验结果表明,分离菌具有较强的致病性和多重耐药性。遗传进化分析表明,分离菌的fim H、mrk D及wab G基因与肺炎克雷伯氏菌其他菌株具有很高的同源性,其核酸序列相似性高达95%以上。
- 冯娜高翔肖敏宁建刚邢小勇包世俊
- 关键词：肺炎克雷伯氏菌药敏试验
- 牛支原体武威分离株丙酮酸激酶基因的原核表达及其表达产物的功能检测被引量：3
- 2020年
- 为研究牛支原体(Mb)威武分离株丙酮酸激酶(PK)的生物学功能,本研究采用PCR扩增Mb武威分离株PK基因(pyk),在测序的基础上利用over-lap PCR将Mb pyk基因中色氨酸密码子(TGA)突变为可在大肠杆菌中表达的同义密码子TGG,进而构建原核表达质粒pET-pyk并转化大肠杆菌Rosseta(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达后利用SDS-PAGE检测,结果显示重组蛋白His-PK以可溶性形式表达,且其相对分子质量约为57 ku。纯化该重组蛋白免疫新西兰白兔制备抗血清,采用western blot分析了PK在Mb细胞内的分布,并采用补体依赖的细胞毒试验和粘附及粘附抑制试验分别检测His-PK抗血清介导的补体杀Mb作用及His-PK抗血清对Mb粘附胎牛肺细胞(EBL)的抑制作用,结果表明Mb PK在细胞膜及细胞质中均有分布,且His-PK抗血清具有明显的介导补体杀灭Mb作用和抑制Mb对EBL的粘附作用。本研究为进一步探究Mb的生物学功能奠定了基础。
- 包世俊冯娜邢小勇温峰琴武小椿
- 关键词：牛支原体丙酮酸激酶基因原核表达
