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自噬抑制剂3-MA对高糖诱导的人视网膜色素上皮细胞增生的抑制作用被引量：8: 2017年; 背景糖尿病视网膜病变（DR）是糖尿病常见的并发症之一，视网膜色素上皮（RPE）细胞作为视网膜重要的组成细胞在DR的发生和发展中至关重要。目的探讨自噬抑制剂3-MA对高糖培养的人RPE细胞（hRPECs）增生的影响。方法将体外培养的hRPECs分为对照组、高糖组和3-MA＋高糖组，对照组细胞用含5mmol／L葡萄糖的DMEM／F12培养基进行培养，高糖组采用含30mmol／L葡萄糖的DMEM／F12培养基进行培养，干预组细胞先在DMEM／F12培养基中添加10mmol／L的3-MA处理1h后，再添加30mmol／L葡萄糖溶液进行培养。将培养的细胞以1×10^5／孔的密度接种于24孔细胞培养板中，待细胞80％融合后用含体积分数0．5％胎牛血清的培养基继续孵育24h，使细胞周期同步化。倒置光学显微镜和透射电子显微镜下观察各组jRPECs的形态及超微结构；采用CCK-8法检测各组hRPECs的增生率；采用Western blot法检测各组hRPECs中自噬相关基因微管相关蛋白轻链3B（LC3B）蛋白的表达。结果对照组细胞生长状态良好，细胞排列整齐；高糖组细胞体积稍增大，细胞数量明显多于对照组，而3-MA＋高糖组细胞形态不规则，排列紊乱。透射电子显微镜下可见对照组细胞核呈圆形或卵圆形，亚细胞器形态均正常，未发现自噬小体；高糖组细胞中可见自噬溶酶体，而3-MA＋高糖组可见自噬小体。对照组、高糖组、3-MA＋高糖组细胞的增生率分别为（100．0±2．0）％、（116．9±5．2）％和（103．7±4．7）％，总体比较差异有统计学意义（F=13．526，P=0．006），高糖组的细胞增生率明显高于对照组和3-MA＋高糖组，差异均有统计学意义（均P〈0．05），3-MA＋高糖组与对照组间细胞增生率的差异无统计学意义（P〉0．05）。与对照组比较，高糖组细胞中LC3B—Ⅰ蛋白表达减弱，LC3B-Ⅱ蛋白表达增强，而3-MA＋高糖组细胞中LC3B—Ⅰ�; 侯文文石焕琦张真张晓梅; 关键词：超微结构

雌二醇对视网膜缺血-再灌注损伤后基质细胞衍生因子-1表达的影响被引量：1: 2017年; 目的通过观察视网膜缺血-再灌注损伤后基质细胞衍生因子-1(stromal cell-derived factor-1,SDF-1)的表达情况,以及雌二醇对SDF-1的表达及调控作用,研究雌二醇对大鼠视网膜缺血-再灌注损伤的保护作用机制。方法通过升高大鼠眼压的方法建立视网膜缺血-再灌注损伤模型,应用RT-PCR和Western blot方法检测视网膜缺血-再灌注损伤后各时间点(6 h、12 h、24 h)视网膜SDF-1表达情况;腹腔注射雌二醇后观察雌二醇对视网膜缺血-再灌注损伤后SDF-1表达的影响;并且应用雌激素受体拮抗剂ICI 182-780研究雌激素受体对雌二醇诱导视网膜缺血-再灌注损伤后的SDF-1的影响。结果SDF-1 mRNA和蛋白在缺血-再灌注6 h组、缺血-再灌注12 h组和缺血-再灌注24 h组表达均增加,与正常对照组比较差异均有统计学意义(均为P<0.05),并且在缺血-再灌注12 h组SDF-1表达达高峰。雌二醇预处理对视网膜缺血-再灌注具有一定的保护作用;缺血-再灌注+雌二醇组SDF-1 mRNA和蛋白表达增加,与缺血-再灌注对照组及缺血-再灌注+溶剂对照组比较差异均有统计学意义(均为P<0.05)。与缺血-再灌注+雌二醇组相比较,缺血-再灌注+雌二醇+ICI 182-780组SDF-1 mRNA和蛋白表达明显降低,差异均有统计学意义(均为P<0.0 5)。结论雌二醇对视网膜缺血-再灌注损伤的保护作用是通过雌激素受体介导的SDF-1 mRNA和蛋白表达增强实现的。; 王业青张晓梅董丽石焕琦毕文娇侯文文; 关键词：视网膜缺血-再灌注损伤雌二醇基质细胞衍生因子-1

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