- 奇异变形杆菌聚磷酸盐激酶多克隆抗体的制备和鉴定被引量：1
- 2017年
- 目的表达、纯化奇异变形杆菌聚磷酸盐激酶(PPK)蛋白,制备PPK多克隆抗体。方法利用分子生物学软件分析奇异变形杆菌PPK的抗原性、疏水性等参数,选取N端较保守的309个氨基酸,并对其基因序列进行密码子优化以利于原核表达。合成新的基因序列后插入pET28b(+)质粒,转化入转化宿主菌BL21(DE3),诱导、表达融合蛋白。通过镍琼脂糖亲和层析技术,将获得的融合蛋白进行纯化。以纯化的蛋白作为免疫原并结合使用佐剂,背部多点注射新西兰大白兔,ELISA检测兔血清效价,Western Blotting验证抗体特异性。结果成功构建了奇异变形杆菌PPK的原核表达重组质粒,可在0.5 mmol/L IPTG、37℃条件下获得较好的诱导、表达;利用镍柱纯化后的PPK蛋白与免疫佐剂一起,采用背部多点接种新西兰大白兔,制备了效价高的兔抗血清。ELISA检测血清效价达到1∶512 000,Western Blotting对ppk基因缺失株及其野生株进行验证显示抗体特异性良好。结论利用pET28b(+)载体可构建奇异变形杆菌PPK的原核表达重组质粒,表达、纯化后的蛋白与佐剂共同免疫新西兰大白兔,可获得效价高、特异性良好的兔多克隆抗体血清,为奇异变形杆菌聚磷酸盐激酶的检测以及深入研究PPK在奇异变形杆菌致病中的作用奠定了基础。
- 彭亮区静怡潘嘉韵邓聪陈景红曹虹
- 关键词：奇异变形杆菌多克隆抗体
- 血栓弹力图评价患者颈内动脉狭窄支架成形术后抗血小板聚集药物的疗效
- 目的 采用血栓弹力图(TEG)仪检测颈内动脉狭窄支架成形术(PTAS)后,服用阿司匹林和氯呲格雷患者的血小板抑制情况,以指导PTAS术后抗血小板聚集药物的个体化治疗方案调整.方法 选取我院2014年6月份至2015年6月...
- 陈景红庞缨冯莹
- 关键词：血栓弹力图血小板聚集抑制
- 血栓弹力图评价抗血小板聚集药物疗效对颈内动脉狭窄支架成形术后再狭窄的影响
- 目的 采用血栓弹力图(TEG)仪检测颈内动脉狭窄支架成形术(PTAS)后，服用阿司匹林和氯吡格雷患者的血小板抑制情况，了解其疗效对PTAS术后支架内再狭窄(ISR)的影响。方法 收集我院颈内外动脉PTAS术后因缺血性中风...
- 陈景红庞缨冯莹
- 关键词：血栓弹力图血小板聚集抑制氯吡格雷抵抗
- 血栓弹力图评价抗血小板聚集药物疗效对颈内动脉狭窄支架成形术后再狭窄的影响
- 目的:采用血栓弹力图(TEG)仪检测颈内动脉狭窄支架成形术(PTAS)后,服用阿司匹林和氯吡格雷患者的血小板抑制情况,了解其疗效对PTAS术后支架内再狭窄(ISR)的影响.方法:收集我院颈内外动脉PTAS术后因缺血性中风...
- 陈景红庞缨冯莹
