- 须癣毛癣菌烯醇化酶基因的克隆、原核表达与纯化被引量:1
- 2016年
- 目的克隆须癣毛癣菌烯醇化酶(Enolase)基因全长c DNA,制备具有高免疫原性的须癣毛癣菌烯醇化酶重组蛋白。方法选用须癣毛癣菌肉芽肿株(774),提取总RNA,采用c DNA快速末端扩增法(RACE)克隆Enolase基因的全长序列,并对该片段进行序列测定和分析。同时对该片段进行了克隆、原核表达及纯化。结果获得须癣毛癣菌Enolase基因全长序列1 491bp,拥有一个1 317bp的开放阅读框,编码438个氨基酸,5'非编码区为106bp,3'非编码区为68bp;同源比对与断发毛癣菌Enolase同源性达100%,与红色毛癣菌同源性达98%。构建了p ET-16b-Enolase表达质粒,重组质粒都经过测序鉴定正确,p ET-16b-Enolase诱导表达后能抑制宿主菌生长,但经过条件优化后表达质粒能在BL21(DE3)菌中经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导大量表达和纯化,Western blot证实了表达的结果。结论克隆出须癣毛癣菌Enolase基因c DNA全长序列,原核表达和纯化成功,为进一步研究重组须癣毛癣菌Enolase的作用奠定了基础。
- 张芳芳刘金鹏鄢秋龙戴安安杨国玲
- 关键词:须癣毛癣菌烯醇化酶基因序列原核表达蛋白纯化
- PQ-LRP基因沉默对犬小孢子菌生长及毒力的影响及手术治疗皮肤淋巴细胞浸润症1例
- 本文主要从以下几方面论述: 第一部分 PQ-LRP基因沉默对犬小孢子菌生长及毒力的影响 目的: 1.观察犬小孢子菌PQ-LRP基因沉默前后形态学区别。 2.观察不同浓度L-半胱氨酸对PQ-LRP基因表达的影响。 ...
- 张芳芳
- 关键词:皮肤淋巴细胞浸润症手术治疗犬小孢子菌
- 联合治疗中重度痤疮的临床研究
- 目的:探讨联合治疗中重度痤疮的临床疗效与安全性。
方法:根据痤疮诊断标准和严重程度分级选取门诊中重度痤疮患者100例,年龄在15~35岁之间,随机分为三组:A组22例、B组50例和C组28例。治疗前详细了解患者基本...
- 张芳芳
- 关键词:中重度痤疮口服药物临床疗效
- 文献传递
- PQ-LRP基因沉默对犬小孢子菌生长及毒力的影响被引量:4
- 2015年
- 目的探讨PQ-LRP基因对犬小孢子菌生长及毒力的影响。方法野生株和干扰株分别于沙氏培养基(SDA)培养观察菌落形态;米饭培养基行扫描电镜(SEM)透射电镜(TEM)观察超微结构;构建豚鼠感染模型行直接镜检和组织病理检查观察致病情况;液体沙氏培养基加入L-半胱氨酸,RT-PCR检测PQ-LRP基因沉默前后mRNA表达的变化。结果菌落形态:干扰株较野生株生长受限;豚鼠模型:干扰株较野生株不易感染宿主;致病豚鼠毛发皮屑真菌镜检:野生株为发内外孢子,孢子多,菌丝粗细均匀,干扰株为发外孢子,孢子少,菌丝粗细不一、弯曲不自然;豚鼠模型:野生株真皮及皮下组织见感染性肉芽肿改变,干扰株感染性肉芽肿改变不明显;半胱氨酸对犬小孢子菌PQ-LRP基因影响:野生株随半胱氨酸的浓度增加PQ-LRP基因表达水平呈上升趋势,干扰株PQ-LRP基因表达水平无规律性。结论PQ-LRP基因抑制后犬小孢子菌形态有变化、毒力减弱,推测PQ-LRP基因可能是犬小孢子菌致头癣的可能毒力基因之一。
- 张芳芳张渊栾莉王华黄鑫琳刘金鹏赵晓宣杨国玲
- 关键词:犬小孢子菌基因毒力
- 71例T细胞淋巴瘤的临床病例分析
- 目的:探讨T细胞淋巴瘤的临床特点、治疗疗效和预后影响因素。 方法:收集大连医科大学附属第二医院自2011.1.1到2015.12.31初诊的71例T细胞淋巴瘤患者的临床数据,包括一般特征(性别、年龄、Ann Arbor...
- 张芳芳
- 关键词:T细胞淋巴瘤化学疗法疗效评价
- 文献传递