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添加扩增内标的沙门氏菌PCR检测方法的建立及应用: 沙门氏菌是人类食源性疾病的重要病原细菌,也是引起食物中毒最为常见的病原菌之一。在全球范围内,因沙门氏菌引发的食物中毒事件发生频繁,且影响范围广,造成巨大的安全隐患。因此提高沙门氏菌检测技术显更为重要,尤其是快速简便的检测...; 杨晋; 关键词：沙门氏菌 PCR检测扩增内标假阴性; 文献传递

添加扩增内标的沙门氏菌PCR检测方法被引量：4: 2014年; 通过构建人工扩增内标,建立可以有效指示沙门氏菌检测过程可能出现假阴性情况的PCR检测方法。本研究基于沙门氏菌invA基因设计特异性引物,复合法构建扩增内标,建立PCR检测体系。特异性引物LW,对33株沙门氏菌和6株非沙门氏菌标准株进行检测,结果显示,所有沙门氏菌均扩增出385 bp的目标片段,非沙门氏菌则只能扩增出484 bp的扩增内标片段,特异性良好。灵敏度实验表明,该检测体系的灵敏度可达6.35 fg/μL。人工污染实验表明,起始染菌量为3.2 CFU/25 mL时,仅需8h增菌培养便可检出。大量食品样品检测证明,该检测体系确实可以有效的避免PCR检测过程出现的假阴性,提高检测准确性。; 杨晋曾庆梅张笛刘坤王琳张亚军; 关键词：沙门氏菌 PCR检测扩增内标假阴性

rpoE基因对环境胁迫下肠炎沙门氏菌生长能力的影响被引量：1: 2013年; rpoE基因是普遍存在于细菌中的一类调节基因,对细菌响应各种环境胁迫起着重要的调节作用。该研究利用λ噬菌体的Red重组系统构建出肠炎沙门氏菌(Salmonella enteritidis,S.E)的rpoE基因缺陷株ΔrpoE,并考察ΔrpoE在不同环境胁迫条件下的生长能力。结果显示,在37°C时,ΔrpoE的生长能力无显著变化;而在高低温、酸、氧、高渗培养条件下,ΔrpoE的生长能力显著弱于野生株。该研究首次获得了S.E的基因缺陷株ΔrpoE,并初步探索了rpoE基因在S.E中的功能,有助于进一步研究rpoE基因在大肠杆菌、沙门氏菌等肠杆科细菌在响应环境胁迫过程中表现出的生物学功能。; 乔向欣曾庆梅曾红亮杨晋刘坤; 关键词：肠炎沙门氏菌 RED重组环境胁迫

肠炎沙门氏菌rpoS基因缺陷株的构建及其生长特性观察被引量：2: 2013年; 目的利用λ-red同源重组系统构建食源性肠炎沙门氏菌(Salmonella enteritidis,SE)CICC21482rpoS基因缺陷株SE/⊿rpoS,观察其在胁迫环境中的生长特性,以探讨rpoS基因的生物学作用。方法通过PCR扩增两侧为肠炎沙门氏菌rpoS基因同源臂,中间为卡那霉素抗性基因(kmr)的打靶片段,再电击转入含质粒pkD46的肠炎沙门氏菌中,替换rpoS基因,筛选阳性转化子SE/⊿rpoS并用PCR法验证。结果成功构建了肠炎沙门氏菌rpoS基因缺陷株。在常规LB培养基中37℃培养的缺陷株和野生株生长曲线差异无统计学意义(P>0.05);SE/⊿rpoS菌株在45℃、2%NaCl和pH4.0应激条件下的生存能力较野生株弱(P<0.05)。结论成功构建SE/⊿rpoS基因缺陷株。该基因在肠炎沙门氏菌克服高温、高渗、酸应激时被诱导表达从而发挥作用。此结果为进一步研究rpoS基因在应激过程中的作用机制提供了基础资料。; 曾红亮曾庆梅乔向欣杨晋刘坤; 关键词：肠炎沙门氏菌基因敲除

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杨晋