贺玲玲
- 作品数：4 被引量：15H指数：2
- 供职机构：北京大学人民医院更多>>
- 发文基金：国家重大科学仪器设备开发专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- TRBC1和TCR Vβ两种流式细胞仪T细胞克隆性检测方法的对比分析
- 2023年
- 目的:分析健康人T细胞各亚群TRBC1和TCR Vβ家族的表达,比较两种流式细胞仪检测T细胞克隆的方法及其判定标准。方法:收集40例健康志愿者外周血,分别对全部CD3^(+)和去除TCRγδ^(+)细胞后的CD3^(+)TCRγδ^(-)T细胞设门,每群T细胞分为CD7^(+)CD5^(+)(T1)、CD7^(+)CD5^(dim+)(T2)、CD7^(+)CD5^(dim2+)(T3)、CD7^(+)CD5^(-)(T4)和CD7^(-)CD5^(+)(T5)5个亚群,分析亚群中CD4、CD8、TCR Vβ家族和TRBC1的表达。结果:39例纳入统计分析,CD3^(+)细胞中,T1、T2、T3、T4和T5的平均比例分别为57.29%、27.74%、5.15%、1.43%和5.99%;T1和T5以CD4^(+)细胞为主,T2、T3和T4以CD8^(+)细胞为主;CD3^(+)中T2、T3和T4亚群中TRBC1+%均明显低于CD3^(+)TCRγδ^(-)T门内相应值(P<0.01)。21例健康人22个亚群中出现TRBC1+%异常(<15%或>85%),主要见于T3和T4亚群;部分亚群可见单个优势Vβ表位,以优势Vβ表位占比≥60%或Vβ总和占比<15%作为判定异常克隆的标准;同时将TRBC1克隆性诊断标准修订为TRBC1+%<12%或>82%后,TRBC1和TCR Vβ两种方法判断克隆性的一致性为96.77%(180/186)。将TCRγδ^(+)细胞影响去除后,分布趋势不变。最终确定的单克隆T细胞发生率为38.46%(15/39),86.67%(13例)克隆性T细胞在淋巴细胞中的比例均低于5%,考虑为生理性克隆性增生;另外2例在淋巴细胞中分别占6.76%和33.24%,可能为意义未明的T细胞克隆(T-cell clones of uncertain signifificance,T-CUS)和T细胞增殖性疾病。结论:健康人利用CD7/CD5分群后在CD5^(dim+)或CD5^(-)亚群内可出现较多的生理性克隆性T细胞,对克隆性T细胞的解释必须与临床密切结合。
- 石韦华刘艳荣常艳袁晓英贺玲玲郝乐殷佳怡卢井泉王亚哲
- 关键词：流式细胞仪T细胞克隆性
- 4色与8色荧光抗体组合检测多发性骨髓瘤患者微小残留病的比较分析被引量：8
- 2017年
- 目的探讨与比较4色和8色荧光抗体组合检测多发性骨髓瘤（MM）患者治疗后微小残留病（MRD）的灵敏度。
方法建立一组以CD38/CD138对浆细胞进行设门，同时检测胞膜抗原CD45、CD19、CD56、CD117及胞质轻链cKappa、cLambda的8色抗体组合；6组4色抗体组合中，4组以CD38/CD138设门，分别分析CD45/CD19、CD56/CD117、CD19/CD56胞膜抗原（M1-3）和胞质轻链（C组）表达；MC1-2组分别以CD38/SSC和CD138/SSC设门，同时检测CD19或CD45胞膜抗原和胞质轻链。采用以上组合对20名健康志愿者和73例完全缓解后MM患者标本进行检测并进行比较分析。
结果8色组合识别异常浆细胞（aPCs）和克隆性浆细胞（cPCs）的阳性率均为82.19%，一致率为89.04%（65/73）；cPCs中位比例为0.105%，均显示明显的单克隆轻链；敏感度为0.004%。CD38/SSC设门的浆细胞比例明显高于CD38/CD138（P〈0.001）和CD138/SSC（P=0.001）设门。4色组合中C-胞质组MRD阳性率最低，仅为65.75%，明显低于8色组合的82.19%（P=0.024）；M2-56/117组检测的aPCs比例最低，为0.095%，与其他组相比差异有统计学意义（P=0.014）；MC1-CD38和MC2-CD138组，以cPCs作为判断标准时MRD阳性率均高于以aPCs为判断标准（P〈0.05），结果一致率分别为68.49%（50/73）和79.45%（58/73）。与8色组合相比，4色组合中MC2-CD138组敏感性、准确性和阴性预测值最高，阳性预测值和特异性也较高；其次是M1-45/19组。
结论CD38/CD138设门更准确，反映克隆性的胞质轻链检测较胞膜抗原更敏感，胞膜抗原异常表达并不完全代表为cPCs，建议胞膜抗原和胞质轻链同时检测。有条件者建议选用8色组合，4色组合中建议同时采用M1-45/19和MC2-CD138组合。
- 王亚哲路瑾郝乐常艳贺玲玲黄晓军刘艳荣
- 关键词：多发性骨髓瘤微小残留病
- 28例急性巨核细胞白血病实验室检查结果分析被引量：2
- 2019年
- 目的:分析急性巨核细胞白血病(AMKL)患者实验室检查特点。方法:4管用8色抗体组合对28例AMKL患者的骨髓有核细胞进行免疫表型分析,同时结合分析患者骨髓细胞形态学、融合基因和染色体核型等检查结果。结果:28例AMKL患者中阳性表达率较高的是巨核细胞相关抗体:CD41a、CD61、CD42b、CD36,阳性率分别为81. 48%、92. 86%、72. 00%、70. 83%,其中,CD41a、CD61、CD42b三种抗体共表达的患者占53. 57%,至少表达两种抗体的患者占82. 14%。髓系祖细胞相关标志:CD117、CD34、CD38、HLA-DR阳性表达率分别为64. 29%、42. 86%、64. 29%和46. 15%,与非APL的AML患者相比表达率均较低(P <0.01);髓系全程抗原CD13、CD33在AMKL中阳性表达率与非APL的AML之间无统计学差异。髓系中后期抗原CD15及单核系抗原CD64、CD14、CD300e和胞浆抗原MPO、cCD79a和cCD3均阴性。与非Down综合征相关AMKL(non-DS-AMKL)相比,CD7与CD11b的表达在Down综合征相关AMKL(DS-AMKL)中较高(P <0.05)。AMKL患者中17例(65.4%)为复杂染色体核型,5例为+21染色体异常;仅5例患者核型正常。25例行白血病融合基因筛查,24例(96%)患者WT1基因表达增高(40.24±59.14%),12例患者(70.58%) EVI1基因表达增高(53.93±37.98%),4例患者融合基因阳性(2例MLL-AF9阳性,1例TLS-ERG,1例P210 BCL/ABL)。结论:AMKL中82.14%患者表达至少两种巨核细胞相关标志,髓系祖细胞标志表达相对较低,多为复杂染色体核型异常,WT1及EVI1异常表达率较高。
- 贺玲玲骆婷婷常艳王亚哲袁晓英石韦华赖悦云石红霞秦亚溱黄晓军刘艳荣
- 关键词：急性巨核细胞白血病免疫表型分析流式细胞术
- 流式检测PNH克隆的方法学探讨及临床筛检和意义被引量：5
- 2019年
- 目的:探讨流式细胞仪高敏感方法检测PNH克隆的必要性和血细胞减少患者PNH克隆的发生率及临床意义。方法:采用CD59检测红细胞及FLAER联合CD24或CD14检测粒细胞和单核细胞的方法检测了20例健康志愿者和1 095例血细胞减少患者的PNH克隆比例,同时对31例患者采用传统的CD59方法检测粒细胞和单核细胞中CD59^-细胞比例。结果:根据健康志愿者正常背景和患者获取的细胞数,确定粒细胞、单核细胞和红细胞PNH克隆的最低检测限(LOD)分别为0.04%、0.10%和0.05%;827例患者FLAER^-CD24^-粒细胞、FLAER^-CD14^-单核细胞和CD59^-红细胞的中位比例分别为0.02%、0.02%和0.03%;318例(38.45%)患者粒细胞PNH克隆高于LOD,180例FLAER^-CD24^-粒细胞<1.00%,粒红和粒单细胞的一致性只有43%~45%。138例FLAER^-CD24^-粒细胞≥1.00%,粒红、粒单和粒单红细胞的一致率分别为91.30%、97.83%和89.86%;比较CD59^-和FLAER^-CD24^-粒细胞、CD59^-和FLAER^-CD14^-单核细胞比例,CD59^-细胞比例明显更低(P<0.000 1和P=0.000 9);26.85%和24.54%患者因出现FLAER^-CD24^+粒细胞与FLAER^-CD14^+单核细胞,导致FLAER单阴比例高于FLAER和锚连蛋白双阴比例,对PNH克隆比例低于0.10%的患者影响更大;36例PNH患者和50例MDS或AA患者PNH克隆比例分别为90.30%(44.49%~99.05%)和1.30%(0.10%~96.07%)(P<0.000 1);PNH克隆比例等于41.81%时,诊断PNH的敏感度和特异度分别为100.0%和96.0%。结论:在本实验条件下根据正常背景值,确定粒细胞、红细胞的LOD分别为0.04%和0.05%。粒细胞PNH克隆比例≥1.00%,与单核和红细胞诊断PNH克隆阳性结果更一致,PNH克隆比例高于41.81%时PNH疾病可能性更大。
- 袁晓英王亚哲石韦华常艳郝乐贺玲玲石红霞黄晓军刘艳荣
- 关键词：流式细胞仪
