符锋
- 作品数：1 被引量：2H指数：1
- 供职机构：中国人民武装警察部队后勤学院更多>>
- 发文基金：天津市应用基础与前沿技术研究计划重点项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 基于iTRAQ联合2D LC-MS/MS分析PM2.5对人类胎盘滋养细胞的影响被引量：2
- 2017年
- 目的:利用蛋白组学方法初步筛选PM2.5通过影响人类胎盘滋养细胞造成不良妊娠率增加可能涉及的蛋白分子和生物进程。方法:用0、30、60、120和200μg/mL的PM2.5分别染毒HTR-8/SVneo细胞24 h与48 h后观察细胞增殖情况,最终确定以120μg/mL PM2.5染毒细胞24 h和48 h进行后续实验。提取胞内蛋白,酶解消化后,同位素标记相对和绝对定量(isobaric tags for relative and absolute quantitation,iTRAQ)标记联合二维液相色谱串联质谱(2D LC-MS/MS)技术分析肽段,鉴定HTR-8/SVneo细胞内的差异表达蛋白,并进行生物信息学分析。结果:120μg/mL PM2.5染毒24 h和48 h后的存活率分别为86.09%和52.36%,与对照组(0μg/mL PM2.5染毒组)相比,细胞存活率显著下降(P<0.05)。120μg/mL PM2.5 24 h染毒组和48 h染毒组细胞中分别鉴定出182个和486个差异蛋白,涉及细胞生物进程22条和217条。结论:PM2.5对HTR-8/SVneo细胞的影响涉及大量细胞生物进程的改变;iTRAQ联合2D LC-MS/MS技术是一种对染毒后细胞内差异表达蛋白高敏感度、高通量筛选的有效途径,为今后对PM2.5增加不良妊娠结局风险的深入机制研究奠定基础。
- 秦喆符锋徐忠伟侯海燕陈亚琼
- 关键词：空气污染物串联质谱法
